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《轉(zhuǎn)基因棉花的檢測(cè)外源基因及檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、青島海潤(rùn)農(nóng)大檢測(cè)有限公司QingdaoHR-QAUInspectionLtd.轉(zhuǎn)基因棉花定性和實(shí)時(shí)熒光定性PCR檢測(cè)檢測(cè)基因基因來(lái)源參考標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)低限PCR性質(zhì)結(jié)果描述18srDNA內(nèi)源SN/T1199-2010棉花中轉(zhuǎn)基因成分定性PCR檢驗(yàn)方法0.1%定性PCR1.如果陰性對(duì)照和空白對(duì)照未出現(xiàn)擴(kuò)增條帶,陽(yáng)性對(duì)照、內(nèi)源基因(18srDNA)和測(cè)試樣品均出現(xiàn)預(yù)期大小的擴(kuò)增條帶,則可初步判斷有可疑的該外源基因,應(yīng)進(jìn)一步做實(shí)時(shí)熒光PCR等確證實(shí)驗(yàn),然后依據(jù)確證實(shí)驗(yàn)結(jié)果最終報(bào)告2.如果測(cè)試樣品中未出現(xiàn)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,則可判定測(cè)試樣品中
2、不含有該外源基因CaMV35S外源0.1%定性PCRNos外源0.1%定性PCRGus外源0.1%定性PCRNptⅡ外源0.1%定性PCRCryIA(c)外源0.1%定性PCRCryIA(b)+CryIA(c)外源0.1%定性PCRCpTⅠ外源0.1%定性PCRacp1內(nèi)源0.1%實(shí)時(shí)熒光定性PCR1.測(cè)試樣品內(nèi)源基因檢測(cè)Ct值小于或等于36,外源基因檢測(cè)Ct值大于或等于40,判斷該樣品不含所檢的外源基因;2.測(cè)試樣品內(nèi)源基因檢測(cè)Ct值小于或等于36,外源基因檢測(cè)Ct值小于或等于36,判斷該樣品含有所檢的外源基因;3.測(cè)試樣
3、品外源基因檢測(cè)Ct值在36-40之間,應(yīng)調(diào)整模板濃度,重做實(shí)時(shí)熒光PCR。再次擴(kuò)增后的外源基因Ct值仍小于40,且陰性對(duì)照,陽(yáng)性對(duì)照和空白對(duì)照結(jié)果正常,則可判定該樣品檢測(cè)該外源基因。再次擴(kuò)增后的外源基因Ct值大于或等于40,且陰性對(duì)照,陽(yáng)性對(duì)照和空白對(duì)照結(jié)果正常,則可判定該樣品未檢出該外源基因。Mon531品系特異基因外源0.1%實(shí)時(shí)熒光定性PCRMon15985品系特異基因外源0.1%實(shí)時(shí)熒光定性PCRMon1445品系特異基因外源0.1%實(shí)時(shí)熒光定性PCR地址:山東省青島市城陽(yáng)區(qū)長(zhǎng)城路700號(hào)青島農(nóng)業(yè)大學(xué)西門Addres
4、s:No.700ChangchengRoad,WestgateofQingdaoAgriculturalUniversity,China電話:0532-80655806傳真:0532-80655806郵編:266109Telephone:0532-80655806Fax:0532-80655806PubCode:266109青島海潤(rùn)農(nóng)大檢測(cè)有限公司QingdaoHR-QAUInspectionLtd.Sad1內(nèi)源農(nóng)業(yè)部1485號(hào)公告-10-2010轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分檢測(cè)耐除草劑棉花LLcotton25及其衍生品種定性PC
5、R方法0.1%定性PCR1.SadⅠ內(nèi)標(biāo)基因和LLcotton25轉(zhuǎn)化體特異性序列均得到擴(kuò)增,且擴(kuò)增片段大小與預(yù)期片段大小一致,則為:樣品中檢測(cè)出轉(zhuǎn)基因耐除草劑棉花LLcotton25轉(zhuǎn)化體成分,檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性;2.SadⅠ內(nèi)標(biāo)基因擴(kuò)增出與預(yù)期片段大小一致的條帶,而LLcotton25轉(zhuǎn)化體特異性序列未得到擴(kuò)增,則為:樣品中未檢測(cè)出轉(zhuǎn)基因耐除草劑棉花LLcotton25轉(zhuǎn)化體成分,檢測(cè)結(jié)果為陰性;3.SadⅠ內(nèi)標(biāo)基因未得到擴(kuò)增,或擴(kuò)增片段與預(yù)期片段大小不一致,表明樣品中未檢出SadⅠ基因,則為:樣品中未檢出棉花成分,檢測(cè)結(jié)果
6、為陰性。LLcotton25轉(zhuǎn)化體特異性序列外源0.1%定性PCRBt外源農(nóng)業(yè)部1485號(hào)公告-11-2010轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分檢測(cè)抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)Bt基因棉花定性PCR方法0.1%定性PCR1.SadⅠ內(nèi)標(biāo)基因和Bt基因均得到擴(kuò)增,且擴(kuò)增片段大小與預(yù)期片段大小一致,則為:樣品中檢測(cè)出抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)Bt基因棉花成分,檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性;2.SadⅠ內(nèi)標(biāo)基因擴(kuò)增出與預(yù)期片段大小一致的條帶,而B(niǎo)t基因未得到擴(kuò)增,則為:樣品中未檢測(cè)出抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)Bt基因棉花成分,檢測(cè)結(jié)果為陰性;3.SadⅠ內(nèi)標(biāo)基因未得到擴(kuò)增,或擴(kuò)增片段與預(yù)期片段大小不一致,表明樣品中未
7、檢出SadⅠ基因,則為:樣品中未檢出棉花成分,檢測(cè)結(jié)果為陰性。MON88913轉(zhuǎn)化體特異性序列外源農(nóng)業(yè)部1485號(hào)公告-12-2010轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分檢測(cè)耐除草劑棉花MON88913及其衍生品種定性PCR方法0.1%定性PCR1.SadⅠ內(nèi)標(biāo)基因和MON88913轉(zhuǎn)化體特異性序列轉(zhuǎn)化體特異性序列均得到擴(kuò)增,且擴(kuò)增片段大小與預(yù)期片段大小一致,則為:樣品中檢測(cè)出轉(zhuǎn)基因耐除草劑棉花MON88913轉(zhuǎn)化體特異性序列轉(zhuǎn)化體成分,檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性;2.SadⅠ內(nèi)標(biāo)基因擴(kuò)增出與預(yù)期片段大小一致的條帶,而MON88913轉(zhuǎn)化體特異性序列
8、轉(zhuǎn)化體特異性序列未得到擴(kuò)增,則為:樣品中未檢測(cè)出轉(zhuǎn)基因耐除草劑棉花MON88913轉(zhuǎn)化體特異性序列轉(zhuǎn)化體成分,檢測(cè)結(jié)果為陰性;3.SadⅠ內(nèi)標(biāo)基因未得到擴(kuò)增,或擴(kuò)增片段與預(yù)期片段大小不一致,表明樣品中未檢出SadⅠ基因,則為:樣品中未檢出棉花成分,檢測(cè)結(jié)果為陰性。地址:山東省青島市城陽(yáng)區(qū)長(zhǎng)