不同產(chǎn)地白花蛇舌草中多糖含量比較

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1、不同產(chǎn)地白花蛇舌草中多糖含量比較作者:劉志剛,顏仁梁,羅佳波【摘要】目的建立快速、穩(wěn)定、科學(xué)的測定白花蛇舌草中多糖含量的方法,并對(duì)不同產(chǎn)地白花蛇舌草中多糖含量差異進(jìn)行初步研究。方法采用苯酚硫酸法測定江西、廣東、廣西白花蛇舌草中多糖的含量,檢測波長為486nm。結(jié)果江西產(chǎn)白花蛇舌草中多糖含量略高于廣東、廣西產(chǎn)藥材。結(jié)論不同產(chǎn)地白花蛇舌草藥材多糖含量基本一致?!娟P(guān)鍵詞】白花蛇舌草;多糖;產(chǎn)地現(xiàn)代研究資料表明,白花蛇舌草提取物具有明顯的抗腫瘤活性,且具有增強(qiáng)非特異性免疫作用。本試驗(yàn)建立了快速、穩(wěn)定、科學(xué)的測定白花蛇舌草中多糖含量的方

2、法,并進(jìn)行了不同產(chǎn)地藥材中多糖含量差異初步研究,現(xiàn)報(bào)道如下?;萜誙V-8453型可見-紫外分光光度計(jì);賽多利斯CP3245型電子天平。白花蛇舌草(采自廣東、廣西、江西)經(jīng)廣東食品藥品職業(yè)學(xué)院中藥與生物系顏仁梁老師鑒定為茜草科草本植物白花蛇舌草Oldenlandiadiffusa(Willd.)Roxb.的干燥全草,粉碎并過60目篩。葡萄糖、苯酚、硫酸、碳酸氫鈉均為分析純。71材料惠普UV-8453型可見-紫外分光光度計(jì);賽多利斯CP3245型電子天平。白花蛇舌草(采自廣東、廣西、江西)經(jīng)廣東食品藥品職業(yè)學(xué)院中藥與生物系顏仁梁老

3、師鑒定為茜草科草本植物白花蛇舌草Oldenlandiadiffusa(Willd.)Roxb.的干燥全草,粉碎并過60目篩。葡萄糖、苯酚、硫酸、碳酸氫鈉均為分析純。2方法與結(jié)果2.1對(duì)照品溶液的配制取105℃干燥至恒重的葡萄糖適量,精密稱定,加水溶解,配制成濃度為0.10mg/mL的葡萄糖對(duì)照品溶液,冷藏備用?! ?.2供試品溶液的配制稱取藥材樣品約50mg,精密稱定,置100mL量瓶中,加水80mL,搖勻,沸水浴浸提1h,冷卻至室溫,加水稀釋至刻度,搖勻,濾過,收集續(xù)濾液備用?! ?.3最大吸收波長的選擇7  精密移取對(duì)照品

4、溶液和供試品溶液各1.0mL,以苯酚硫酸法顯色,在380~700nm波長范圍內(nèi)掃描,對(duì)照品與供試品溶液吸收曲線λmax均為486nm?! ?.4顯色條件的選擇[1]  2.4.1硫酸用量的選擇  精密移取上述對(duì)照品溶液1.0mL5份,各加苯酚溶液1.0mL,快速加入濃硫酸2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL,于486nm處測定吸光度值。當(dāng)濃硫酸用量低于4mL時(shí),顯色反應(yīng)幾乎不發(fā)生或很弱。本試驗(yàn)中濃硫酸用量達(dá)6.0mL時(shí)吸光度值最大,因此選擇濃硫酸用量為6.0mL。  2.4.2反應(yīng)溫度的選擇  文獻(xiàn)中關(guān)于反應(yīng)溫度有室溫至

5、沸水浴不等,故本試驗(yàn)以室溫(30℃)、40、60、80℃、沸水浴為考察水平。精密移取上述對(duì)照品溶液1.0mL5份,固定其他因素,規(guī)定水浴溫度顯色后,于486nm處測定吸光度值。結(jié)果顯示,反應(yīng)溫度對(duì)顯色結(jié)果影響較小,室溫放置即可達(dá)到顯色目的,故選擇室溫作為反應(yīng)溫度。7  2.4.3反應(yīng)時(shí)間的選擇  精密移取上述對(duì)照品溶液1.0mL4份,固定其他因素,分別于室溫反應(yīng)10、20、30、40min,于486nm處測定吸光度值。結(jié)果在所選定的反應(yīng)時(shí)間范圍內(nèi),各吸光度值幾乎無差異,20min時(shí)最大,故選擇反應(yīng)時(shí)間為20min?! ?.5線

6、性關(guān)系  精密稱取上述葡萄糖對(duì)照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL,照上述顯色條件顯色,于486nm處測定吸光度值。以吸光度值(Abs)為縱坐標(biāo),多糖量(C,mg)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程為:Y=0.10493X,r=0.9998,表明葡萄糖在0.02140~0.1070mg范圍內(nèi)具有良好線性關(guān)系。  2.6藥材處理  2.6.1沸水浸提法  稱取藥材樣品約50mg,精密稱定,置100mL量瓶中,加水80mL,搖勻,沸水浴浸提1h,取出,放至室溫,加水稀釋至刻度,搖勻,濾過,收集續(xù)濾液,為供試品溶液,

7、備用。結(jié)果見表1。表17不同提取方法比較(略)  2.6.2超聲提取法  稱取藥材樣品約50mg,精密稱定,置100mL量瓶中,加水80mL,搖勻,超聲30min,取出,放至室溫,加水稀釋至刻度,搖勻,濾過,收集續(xù)濾液,為供試品溶液,備用(見表1)。結(jié)果沸水浸提法效果優(yōu)于超聲提取法,因此,選擇沸水浸提法為供試品提取方法?! ?.7提取時(shí)間的選擇稱取藥材樣品約50mg,4份,精密稱定,置100mL量瓶中,加水80mL,搖勻,分別置沸水浴浸提0.5、1.0、1.5、2.0h,取出,放至室溫,依法顯色,測定486nm處吸光度值,結(jié)果

8、沸水浸提1.0h后測得多糖含量趨于穩(wěn)定,選擇沸水浸提1.0h。  2.8精密度試驗(yàn)精密移取提取時(shí)間項(xiàng)下1.0h供試品溶液1.0mL,依法顯色,重復(fù)測定486nm波長處吸光度值5次,RSD=0.59%,表明方法精密度良好。  2.9重復(fù)性試驗(yàn)稱取藥材樣品約50mg,5份,依法顯

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