不同產(chǎn)地白花蛇舌草中多糖含量比較論文

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1、不同產(chǎn)地白花蛇舌草中多糖含量比較論文.freel。結(jié)果江西產(chǎn)白花蛇舌草中多糖含量略高于廣東、廣西產(chǎn)藥材。結(jié)論不同產(chǎn)地白花蛇舌草藥材多糖含量基本一致?！娟P(guān)鍵詞】白花蛇舌草；多糖；產(chǎn)地現(xiàn)代研究資料表明,白花蛇舌草提取物具有明顯的抗腫瘤活性,且具有增強非特異性免疫作用。本試驗建立了快速、穩(wěn)定、科學(xué)的測定白花蛇舌草中多糖含量的方法,并進行了不同產(chǎn)地藥材中多糖含量差異初步研究,現(xiàn)報道如下?；萜誙V-8453型可見-紫外分光光度計；賽多利斯CP3245型電子天平。白花蛇舌草(采自廣東、廣西、江西)經(jīng)廣東食品藥品職

2、業(yè)學(xué)院中藥與生物系顏仁梁老師鑒定為茜草科草本植物白花蛇舌草Oldenlandiadiffusa(L的葡萄糖對照品溶液,冷藏備用。2.2供試品溶液的配制稱取藥材樣品約50mg,精密稱定,置100mL量瓶中,加水80mL,搖勻,沸水浴浸提1h,冷卻至室溫,加水稀釋至刻度,搖勻,濾過,收集續(xù)濾液備用。2.3最大吸收波長的選擇精密移取對照品溶液和供試品溶液各1.0mL,以苯酚硫酸法顯色,在380～700nm波長范圍內(nèi)掃描,對照品與供試品溶液吸收曲線λmax均為486nm。2.4顯色條件的選擇12.4.1硫酸用

3、量的選擇精密移取上述對照品溶液1.0mL5份,各加苯酚溶液1.0mL,快速加入濃硫酸2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL,于486nm處測定吸光度值。當(dāng)濃硫酸用量低于4mL時,顯色反應(yīng)幾乎不發(fā)生或很弱。本試驗中濃硫酸用量達6.0mL時吸光度值最大,因此選擇濃硫酸用量為6.0mL。2.4.2反應(yīng)溫度的選擇文獻中關(guān)于反應(yīng)溫度有室溫至沸水浴不等,故本試驗以室溫(30℃)、40、60、80℃、沸水浴為考察水平。精密移取上述對照品溶液1.0mL5份,固定其他因素,規(guī)定水浴溫度顯色后,于486nm處測定吸光

4、度值。結(jié)果顯示,反應(yīng)溫度對顯色結(jié)果影響較小,室溫放置即可達到顯色目的,故選擇室溫作為反應(yīng)溫度。2.4.3反應(yīng)時間的選擇精密移取上述對照品溶液1.0mL4份,固定其他因素,分別于室溫反應(yīng)10、20、30、40min,于486nm處測定吸光度值。結(jié)果在所選定的反應(yīng)時間范圍內(nèi),各吸光度值幾乎無差異,20min時最大,故選擇反應(yīng)時間為20min。2.5線性關(guān)系精密稱取上述葡萄糖對照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL,照上述顯色條件顯色,于486nm處測定吸光度值。以吸光度值(Abs)為縱坐標(biāo)

5、,多糖量(C,mg)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程為：Y＝0.10493X,r＝0.9998,表明葡萄糖在0.02140～0.1070mg范圍內(nèi)具有良好線性關(guān)系。2.6藥材處理2.6.1沸水浸提法稱取藥材樣品約50mg,精密稱定,置100mL量瓶中,加水80mL,搖勻,沸水浴浸提1h,取出,放至室溫,加水稀釋至刻度,搖勻,濾過,收集續(xù)濾液,為供試品溶液,備用。結(jié)果見表1。表1不同提取方法比較（略）2.6.2超聲提取法稱取藥材樣品約50mg,精密稱定,置100mL量瓶中,加水80mL,搖勻,超聲30m

6、in,取出,放至室溫,加水稀釋至刻度,搖勻,濾過,收集續(xù)濾液,為供試品溶液,備用(見表1)。結(jié)果沸水浸提法效果優(yōu)于超聲提取法,因此,選擇沸水浸提法為供試品提取方法。2.7提取時間的選擇稱取藥材樣品約50mg,4份,精密稱定,置100mL量瓶中,加水80mL,搖勻,分別置沸水浴浸提0.5、1.0、1.5、2.0h,取出,放至室溫,依法顯色,測定486nm處吸光度值,結(jié)果沸水浸提1.0h后測得多糖含量趨于穩(wěn)定,選擇沸水浸提1.0h。2.8精密度試驗精密移取提取時間項下1.0h供試品溶液1.0mL,依法顯色

7、,重復(fù)測定486nm波長處吸光度值5次,RSD＝0.59%,表明方法精密度良好。2.9重復(fù)性試驗稱取藥材樣品約50mg,5份,依法顯色,測定486nm處吸光度值,平均含量為11.76%,RSD＝0.15%,表明方法重復(fù)性好。2.10加樣回收率試驗稱取藥材樣品約50mg,6份,精密稱定,置100mL量瓶中,精密移入葡萄糖儲備液2.0mL(含葡萄糖2.0327mg),依法顯色,測定486nm波長處吸光度值,計算平均回收率＝99.91%,RSD＝1.39%。2.11穩(wěn)定性試驗取加樣回收率項下5號樣品,自首次

8、測定后10、30、60min測定吸光度值,4次測定結(jié)果RSD＝0.57%,說明樣品顯色后1h內(nèi)穩(wěn)定性良好,可以滿足測定需要。2.12樣品測定稱取藥材樣品各約50mg,依法顯色,測定486nm處吸光度值。按對照品回歸方程計算供試品中多糖含量。結(jié)果見表2。表2樣品測定結(jié)果(略)3討論硫酸在本反應(yīng)中的作用是促進多糖水解產(chǎn)生單糖,高溫環(huán)境中脫水并與苯酚反應(yīng)產(chǎn)生棕紅色物質(zhì)進行比色2。若硫酸用量過小,則多糖水解不完全,故吸光度值受硫酸用量影響顯著。反應(yīng)溫度對顯色結(jié)果