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1、ELISA法與金標層析法檢測HIV抗體的適用性探討【摘要】目的將金標層析法與ELISA法檢測HIV-Ab的結果進行分析比對，以探討兩種方法檢測HIV抗體在日常工作中的適用性。方法對1208例血液樣本用金標層析法與ELISA法檢測其HIV抗體。結果兩種方法檢測HIV抗體的結果差異無顯著性，ELISA法的特異性高于金標層析法。結論兩種方法均可適用于醫(yī)學檢測，金標層析法適合于急診、流動采血點、基層單位的推廣使用，而ELISA法適合于大中型醫(yī)院HIV抗體篩查和艾滋病流行病學監(jiān)測等?！娟P鍵詞】HIV抗體；金標層析法；ELISA法；適用性6目前，檢測H
2、IV抗體常用的初篩方法有金標層析法和ELISA法。由于ELISA法實驗時間較長，對設備、工作環(huán)境、實驗人員素質要求相對較高，因此中、小型以及偏遠地區(qū)的實驗室難以全面開展，而金標層析法具有操作簡單、快速等優(yōu)點已被很多醫(yī)療單位用來進行HIV抗體初篩。但筆者在工作中發(fā)現(xiàn)，由于HIV抗體初篩結果與確認結果不符而引發(fā)的醫(yī)療糾紛時有發(fā)生，因此根據不同的醫(yī)療環(huán)境和單位選擇合適的檢測方法十分重要。本文對用兩種方法檢測HIV抗體初篩陽性的結果與確認結果進行分析比較，旨在探討金標層析法與ELISA法檢測HIV抗體在實際工作中的適用性，為合理選擇實驗方法提供理論
3、基礎。1資料與方法1.1一般資料所有血液樣本均來自醫(yī)院2005年門診和住院病人，共1208例，其中男648例，女560例，年齡0.5～90歲，平均39歲。用ELISA法和金標層析法同時檢測其HIV抗體，所有樣本均在采樣后4h內檢測完畢。1.2方法1.2.1金標層析法采用雙抗原夾心法原理，10～30min內觀察結果。1.2.2ELISA法利用雙抗原夾心法，操作步驟嚴格按試劑盒說明書進行。1.3試劑兩種方法均使用廈門新創(chuàng)公司生產的試劑，該試劑經國家藥檢所批，批檢合格，且都在有效期內（ELISA法試劑批號分別為：2005036601、200505
4、6602、2004126608，金標層析法試劑批號分別為：2005040304、2005052501、2005011905）。61.4儀器洗板機Anth.sFludo；酶標儀Anth.s2010。1.5統(tǒng)計學分析檢測結果采用χ2檢驗進行數(shù)據處理，以P<0.05為差異有顯著性。 2結果兩種方法檢測結果見表1。表1金標層析法與ELISA法檢測結果比較（略）注：*ELISA法初篩陽性的7例標本包含于金標層析法11例初篩陽性標本中。ELISA法與金標層析法檢測HIV抗體的結果經統(tǒng)計顯示差異無顯著性（χ2=0.65；P>0.05）3討論
5、自1985年我國報道第一例艾滋病以來［1］，艾滋病在我國的流行趨勢日趨嚴峻，近幾年更是進入一個快速增長期［2］。到目前為止，艾滋病尚無有效的治療措施，因此，對可疑人群的篩查顯得尤為重要。6近年，艾滋病的檢測手段被不斷更新和利用。自20世紀70年代，F(xiàn)anlk等建立了ELISA技術后［3］，該技術便廣泛用于臨床免疫檢測。用于檢測艾滋病的ELISA法第三代試劑，采取雙抗原夾心法原理，利用酶催化底物反應的放大作用［3］，用來提高特異性抗原抗體反應的敏感性。其特點為特異性和靈敏度高、準確性好。而金標層析法是繼ELISA法之后發(fā)展起來的一種膜固相免疫
6、測定，其以膠體金作為標記物，利用層析作用來檢測抗原或抗體［4］。用于檢測HIV抗體金標層析法現(xiàn)在已廣泛使用于臨床和各醫(yī)療機構。該方法操作簡便、快速，無需特殊設備，從本文表1中看出，兩種方法均有較高的靈敏度，金標法陽性的11例標本用ELISA法檢測有4份標本陰性、7份標本陽性，但兩者差異無顯著性（P>0.05），均可適用于醫(yī)學檢測。然而筆者在工作中發(fā)現(xiàn)，選用HIV抗體初篩試劑時，應視不同情況而定。本文表1中，11例金標法初篩陽性的樣本，經省CDC確認7例為陽性，7例ELISA法檢測陽性的樣本經省CDC確認均為陽性。可見，ELISA法的特
7、異性高于金標層析法，有較高的陽性預期值。而金標層析法存在較高的假陽性率，其產生的原因多數(shù)還不清楚，排除技術因素外，可能主要是因為金標法受實驗條件和時間的限制，與ELISA試劑在制作技術上還存在一定的差異，還有一些針對HLA抗原的抗體、患者自身免疫性疾病、寄生蟲、其他病毒以及高丙種球蛋白癥病人的血清標本也常容易出現(xiàn)假陽性反應［1］。6在醫(yī)院就診的過程中，因HIV-Ab初篩陽性而確認實驗陰性導致的醫(yī)療糾紛時有發(fā)生。因患者不理解或醫(yī)患之間溝通不夠，勢必給醫(yī)院的醫(yī)療服務質量和醫(yī)療形象造成負面影響，也給受檢者造成巨大的精神壓力和恐慌心理。因此選用一種
8、特異性高、有較高的陽性預期感、能最大限度保證發(fā)現(xiàn)真正HIV感染者的試劑尤為重要，ELISA試劑即具有以上優(yōu)點。所以大、中型醫(yī)院在進行HIV-Ab初篩時，除急需手術或輸血的病人用金
