延胡索有效部位提取工藝研究

《延胡索有效部位提取工藝研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。

1、延胡索有效部位提取工藝研究【摘要】目的：改進(jìn)延胡索總生物堿的提取方法，尋找延胡索總堿最佳提取工藝。方法：采用正交優(yōu)選法，以延胡索乙素為檢測(cè)指標(biāo)，采用高效液相色譜法測(cè)定延胡索乙素含量。結(jié)果：酸堿度對(duì)延胡索乙素的得率有極顯著的影響。結(jié)論：采用堿性甲醇提取最佳。【關(guān)鍵詞】延胡索；延胡索乙素；HPLC；提取工藝；含量測(cè)定　　延胡索CorydalisyanhusuoW.T.Wang.具有活血化瘀、理氣止痛功效，其主要活性成分為生物堿，其中以延胡索甲、乙、丑素等為主［1］。延胡索甲、乙、丑素等有較好的鎮(zhèn)痛作用

2、，以乙素作用最強(qiáng)［2］，其總生物堿具有抗?jié)儭⒁种莆杆岱置?、解痙及增加冠脈血流量，抗心律失常等作用［3］。控制延胡索的質(zhì)量，多以延胡索乙素作為首選成分。本文采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，經(jīng)高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定延胡索浸膏中延胡索乙素的含量，選出提取延胡索的最佳工藝條件。　　1儀器與試藥　　　　日本Shimadzu公司LC6A高效液相色譜儀,CR6A數(shù)據(jù)處理儀，日本Shimadzu公司AUE210電子天平(1/10000);所用試劑均為色譜純，水為自制超純水；延胡索乙素對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定

3、所)，延胡索藥材由天津市中藥飲片廠提供。6　　2方法與結(jié)果　　2.1正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選延胡索醇提工藝根據(jù)延胡索總堿的理化性質(zhì)，考察提取溶媒及提取溶劑的酸堿度等因素，設(shè)計(jì)了2因素3水平的正交實(shí)驗(yàn)，以考察延胡索最佳提取工藝，因素水平見(jiàn)表1。正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2?！　”?因素水平表（略）　　與對(duì)照組比較##P＜0.01　　表2正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果（略）　　注：由試驗(yàn)結(jié)果看出：A3B3為最佳提取工藝參數(shù)?！　?.2樣品制備［4-5］稱取延胡索150g，加提取溶媒(1500mL，3h；1200mL，2h)回流提取，過(guò)濾(

4、100目)，濾液合并，減壓濃縮至稠膏，水浴蒸干?！　?.3各樣品中延胡索乙素的含量測(cè)定6　　2.3.1測(cè)定條件［6-7］色譜柱：SpherisorbC18柱(250mm×4.6mm，10μm)，流動(dòng)相：甲醇∶水(乙二胺調(diào)pH9.5)為65∶35，流速：1mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)：280nnm，進(jìn)樣量：15μL?！　?.3.2對(duì)照品溶液的制備精密稱取干燥至恒重的延胡索乙素對(duì)照品2mg至50mL容量瓶中，甲醇溶解定容，搖勻，制成0.04mg/mL的對(duì)照品溶液?！　?.3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線制備分別吸取對(duì)照品溶液

5、3，6，9，12，15μL按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以對(duì)照品量為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得回歸方程y=254.2+295155x，r=0.9999，表明延胡索乙素在0.12-0.6μg間呈良好線性關(guān)系?！　?.3.4精密度試驗(yàn)精密吸取對(duì)照品溶液20μL重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)峰面積，結(jié)果RSD為0.89%?！　?.3.5重復(fù)性試驗(yàn)精密稱取樣品0.5g，按樣品含量測(cè)定方法處理，在相同條件下測(cè)定同一批號(hào)6份，計(jì)算含量，結(jié)果RSD為2.25%。　　2.3.6穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取延胡索乙素對(duì)照品，在0，0

6、.5，1，3，5，7和24h分別測(cè)定，結(jié)果RSD為1.20%，表明樣品在24h內(nèi)穩(wěn)定。6　　2.3.7加樣回收率試驗(yàn)采用加樣回收法，精密稱取已知含量的延胡索樣品1g，分別精密加入適量延胡索乙素對(duì)照品溶液，按2.3項(xiàng)下操作，結(jié)果平均回收率為99.00%，RSD=0.50%。　　2.3.8樣品的含量測(cè)定精密稱取樣品0.5g，置錐形瓶中，加入苯20mL，乙二胺1滴，超聲處理20min，過(guò)濾，揮干溶媒，殘?jiān)尤?.1mol/LHCl10mL溶解，0.45μm微孔濾膜過(guò)濾，精密吸取濾液15μL注入色譜儀，3

7、次測(cè)定結(jié)果平均值為0.09812%?！　?討論　　3.1酸堿度、溶媒對(duì)延胡索乙素得率的影響本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，溶媒的酸堿度對(duì)延胡索總堿中延胡索乙素含量的影響有極顯著的意義，延胡索總堿的最佳提取方法為堿性甲醇提取?！　?.2流動(dòng)相中添加劑的加入對(duì)分離的影響實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，流動(dòng)相中加入乙二胺可以控制延胡索乙素的拖尾，并提高柱效和分離度，提示當(dāng)實(shí)驗(yàn)分析生物堿成分拖尾較嚴(yán)重且柱效不高的色譜柱時(shí)，可以通過(guò)加入少量胺來(lái)改變峰的色譜行為?！　?.3提取溶劑的選擇以甲醇、乙醇、苯、乙醚為溶劑分別超聲處理20，30，40mi

8、n，結(jié)果表明，以堿化后的苯為溶劑，超聲處理20min，揮干苯，再用0.1N6HCL溶解，可以去除大部分極性較大的雜質(zhì)，而且提取率較高，色譜峰形良好?！　?.4色譜柱的選擇本文考慮色譜柱及流動(dòng)相等的檢測(cè)成本，采用了ODSC18色譜柱?！　?.5外界條件對(duì)延胡索乙素的影響延胡索乙素在空氣中不穩(wěn)定，易受陽(yáng)光照射和溫度影響，受光熱作用易分解，脫氫氧化為結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的巴馬汀，制劑回收率低的原因可能是提取時(shí)(50℃)延胡索乙素部分分解所致。在實(shí)驗(yàn)操作當(dāng)中應(yīng)盡量避免受熱?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】　　［1］黃康