豬偽狂犬病血清抗體gb-elisa檢測方法的建立

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1、豬偽狂犬病血清抗體gB-ELISA檢測方法的建立?10?中國獸藥雜志2011,45(7):10~13/羅飛,等豬偽狂犬病血清抗體gB—ELISA檢測方法的建立羅飛,李宇琴,陳義平,周潔(1.中國動物衛(wèi)生與流行病學中心診斷液研究室,山東青島226032;2.揚州大學獸醫(yī)學院,江蘇揚州225009;3.湖南九鼎科技(集團)有限公司,湖南岳陽414000)[收稿日期]2011—04—25[文獻標識碼]A[文章編號】1002—1280(2011)07—0010—04[中圖分類號]$852.65[摘要]用純化的豬偽狂犬病病毒gB重組蛋白為抗原,建立了檢測豬偽狂犬病血清

2、抗體的gB—ELISA方法.最佳反應條件為:抗原包被濃度為3.15Ixg/mL,待檢血清稀釋度為1:40.該方法對豬圓環(huán)病毒病,豬瘟,豬細小病毒病,豬繁殖與呼吸綜合征(豬藍耳病),豬乙型腦炎,豬布氏桿菌病5種疾病陽性血清和SPF豬陰性血清檢測呈陰性反應.批間,批內試驗變異系數均不超過8%.用該方法與HerdChekELISA試劑盒同時對119份血清進行了平行檢測,其相對敏感性,特異性和符合率分別為:75%,80.7%和79%.試驗結果表明:豬偽狂犬病血清抗體gB—ELISA檢測方法具有較高的敏感性和特異性,且重復性好,可用于豬偽狂犬病毒血清抗體檢測.[關鍵詞

3、]豬偽狂犬病毒;抗體;gB—ELISAEstablishmentoftheIndirectELISAfortheDetectionofViralGlycoproteinBAntibodiesagainstSwinePseudorabiesLU0Fei,LIYu—qin,CHENYi—ping,ZHOUJie'(1.DiagnosticReagentLaboratory,ChinaAnimalHealthandEpidemiologyCenter,Qingdao,Shandong266032,China;2.CollegeofVeterinaryMedicin

4、e,YangzhouUniversity,Yangzhou,Jiangsu225009,China;3.HunanJiudingTechnology(Group)Co.,Ltd,Yueyang,Hunan414000,China)Abstract:ThegB—ELISAwasestablishedbyusingthepurifiedrecombinantproteinasantigenfordetectingPRVantibodiesinpigsera.AllreactionconditionsofthisgB—ELISAwereexplored.Theop

5、timalcoatingconcentrationofantigenis3.15mL,theserumsamplewasdilutedto1:40.TheresultsarenegativewhentheantiserumagainstPCV,PPV,HCV,JEVandPRRSweredetectedbythisgB—ELISA.TheCVbetweenandwithinbatchesofdetectionwerelessthan8%.119pigserasamplesweresimultaneouslydetectedbythisindirectgB—E

6、LISAandHerdChekgBELISAkit.TherelativesensitivityandspecificityofindirectgB—ELISAestablishedinthestudywere75%and80.7%.ThecoincidenceratebetweenthesetwoELISAwas79%.Allresultsshowedthatthisassayhadagoodsensitivity,specificityandrepeatability,itcouldbeusedfordetectionofPRVantibodyinpig

7、sera.Keywords:swinepseudorabiesvirus;antibody;gB—ELISA偽狂犬病毒(Pseudorabiesvirus,PRV)是皰疹病毒科(Herpesviridae)皰疹病毒亞科的成員,可引起豬,牛,羊及野生動物的偽狂犬病,豬是其主要宿主.偽狂犬病給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經濟損基金項目:"十一五"國家科技支撐項目(2006BAD6A13)作者簡介:羅飛(1984年一),男,湖南人,碩士,研究方向為豬病綜合防控.E—mail:12032004@163.con通訊作者:陳義平,研究員,動物疫病診斷試劑研發(fā).2011,45(7)

8、:10~13/羅飛,等中國獸藥雜志失j.為了加強對該

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