艾滋病(hiv)檢測(cè)方法匯總

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1、艾滋病（HIV）檢測(cè)方法匯總一、艾滋病簡(jiǎn)介　　艾滋病日的概念來(lái)源于1988年，全球衛(wèi)生部大臣關(guān)于艾滋病預(yù)防計(jì)劃的高峰會(huì)議上(WorldSummitofMinistersofHealthonProgrammesforAIDSPrevention)提出的。從此，這個(gè)概念被全球各國(guó)政府、國(guó)際組織和慈善機(jī)構(gòu)采納。從此，這個(gè)概念被全球各國(guó)政府、國(guó)際組織和慈善機(jī)構(gòu)采納。　自1981年世界第一例艾滋病病毒感染者發(fā)現(xiàn)至今，短短20多年間，艾滋病在全球肆虐流行，已成為重大的公共衛(wèi)生問(wèn)題和社會(huì)問(wèn)題，引起世界衛(wèi)生組織及各國(guó)政府的高度重視。為號(hào)召全世界人民行動(dòng)起來(lái)，團(tuán)結(jié)一致共同對(duì)抗艾滋病，1988年1月

2、，世界衛(wèi)生組織在倫敦召開(kāi)了一個(gè)有100多個(gè)國(guó)家參加的“全球預(yù)防艾滋病”部長(zhǎng)級(jí)高級(jí)會(huì)議，會(huì)上宣布每年的12月1日為“世界艾滋病日”(WorldAidsDay);1996年1月，聯(lián)合國(guó)艾滋病規(guī)劃署(UNAIDS)在日內(nèi)瓦成立;1997年聯(lián)合國(guó)艾滋病規(guī)劃署將“世界艾滋病日”更名為“世界艾滋病防治宣傳運(yùn)動(dòng)”，使艾滋病防治宣傳貫穿全年。二、艾滋?。℉IV）檢測(cè)方法　　(一)抗體檢測(cè)　　主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)和免疫熒光試驗(yàn)(IFA)。ELISA用去污劑裂解HIV或感染細(xì)胞液提取物作抗原，IFA用感染細(xì)胞涂片作抗原進(jìn)行抗體檢測(cè)，如果發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性標(biāo)本應(yīng)重復(fù)一次。為防止假陽(yáng)性，可做Wes

3、ternblot(WB，蛋白印跡法)進(jìn)一步確證?！　B法是用聚丙烯酰胺凝膠電泳將HIV蛋白進(jìn)行分離，再經(jīng)傳移電泳將不同蛋白條帶轉(zhuǎn)移于硝酸纖維膜上，加入病人血清孵育后，用抗人球蛋白酶標(biāo)抗體染色，就能測(cè)出針對(duì)不同結(jié)構(gòu)蛋白抗體，如抗gp120、gp41、P24抗體，特異性較高?！　】焖贆z測(cè)法，也稱為金標(biāo)法，也是抗體檢測(cè)的一種方法，根據(jù)免疫層析法的原理，用于HIV抗體檢測(cè)的定性檢測(cè)?！　?二)抗原檢測(cè)　　用ELISA檢測(cè)P24抗原,在HIV感染早期尚未出現(xiàn)抗體時(shí),血中就有該抗原存在.由于P24量太少,陽(yáng)性率通常較低。現(xiàn)有用解離免疫復(fù)合物法或濃縮P24抗原，來(lái)提高敏感性。theprovi

4、sionsofelectricpowerconstructionengineeringqualitysupervisionandquality...2.4.1.1theunitworksacceptancerateof100%,thequalityevaluationofatotalscoreof95orabove;2.4.1.2regulatedWeldingNDTinspection100%,regulatedweldingapassingrateof>99%,andweldbeadappearance;2.4.1.3boilerhydraulic　　(三)核酸檢測(cè)　　用PC

5、R法檢測(cè)HIV基因，具有快速、高效、敏感和特異等優(yōu)點(diǎn)，目前該法已被應(yīng)用于HIV感染早期診斷及艾滋病的研究中?！　?四)病毒分離　　常用方法為共培養(yǎng)法，即用正常人外周血液分離單個(gè)核細(xì)胞，加PHA刺激并培養(yǎng)后，加入病人單個(gè)核細(xì)胞診斷及艾滋病的研究中。一、艾滋?。℉IV）抗體、抗原檢測(cè)　　HIV抗體一般在人感染后幾周逐漸出現(xiàn),可延續(xù)至終生[15]，血清學(xué)試驗(yàn)分為初篩和確認(rèn)試驗(yàn)。最常用的初篩試驗(yàn)和確認(rèn)試驗(yàn)分別是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和免疫印跡試驗(yàn)(WB)。常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、免疫印跡試驗(yàn)(WestBlot)、間接免疫熒光法(IFA)?？焖贆z測(cè)方法：明膠顆粒凝集試驗(yàn)、斑點(diǎn)免疫結(jié)合試驗(yàn)

6、、P24抗原的檢測(cè)、分子生物學(xué)方法、RT?PCR檢測(cè)法、熒光實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)技術(shù)、支鏈DNA(bDNA)、連接酶酶促鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(LCR)、核酸序列依賴性擴(kuò)增(NASBA)、轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的擴(kuò)增(TMA)　　1、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)　　ELISA法的基本原理是免疫反應(yīng)物通過(guò)化學(xué)或免疫學(xué)的方法形成酶結(jié)合物，酶結(jié)合物能與待檢樣品中相應(yīng)的抗原或抗體結(jié)合成為免疫復(fù)合物,然后加入酶底物,經(jīng)酶的催化或水解作用,無(wú)色底物產(chǎn)生顏色,用肉眼、分光光度計(jì)觀察結(jié)果。初篩用的HIVELISA試劑目前已經(jīng)發(fā)展到第四代檢測(cè)試劑。第一代試劑主要以病毒裂解物或部分純化的病毒抗原包被反應(yīng)板,以檢測(cè)血清中的抗體。由于包被的抗原不很

7、純,假陽(yáng)性率較高。第二代試劑使用基因工程方法得到的重組抗原和合成肽包被反應(yīng)板，由于純化抗原的使用,特異性有了很大提高。第三代試劑使用雙抗原夾心法檢測(cè)抗體,進(jìn)一步提高了敏感性。第四代試劑則在第三代的基礎(chǔ)上進(jìn)一步增加了P24抗原的檢測(cè),把HIV抗原和抗P24的抗體同時(shí)包被反應(yīng)板,可同時(shí)檢測(cè)血清中的HIV抗體和P24抗原?！　?、免疫印跡試驗(yàn)　　免疫印跡試驗(yàn)主要用于確認(rèn)試驗(yàn)，基本原理是HIV全病毒抗原經(jīng)過(guò)SDS?PAGE電泳,將分子量大小不等的蛋白帶分離開(kāi)來(lái),然后再把這些已經(jīng)分離的不同