《hiv檢測方法》word版

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1、HIV實驗室診斷人類免疫缺陷病毒(humanimmunodeficiencyvirus,HIV)及其相關(guān)標志的檢測是預(yù)防HIV感染和艾滋病臨床治療中重要的環(huán)節(jié)，在艾滋病的防治工作中具有重要作用，如艾滋病的診斷、HIV感染的診斷、血源及器官供體的篩選、流行病學調(diào)查、艾滋病病人及HIV感染者的病情動態(tài)觀察、臨床治療療效考核以及HIV疫苗的安全性和效果鑒定等。HIV感染標志分為病毒標志、免疫標志和相關(guān)標志三大類。病毒標志是指直接從HIV感染者體內(nèi)分離出病毒或檢出HIV組成成分(抗原或核酸)。免疫標志是指HIV感染所產(chǎn)生的HIV抗原、抗體等免疫物質(zhì)。相關(guān)標

2、志是指HIV感染后與艾滋病病情進展有密切關(guān)系的某些標志，如CD4細胞、CD8細胞，β2微球蛋白、有關(guān)細胞因子等。這些標志的測定可為HIV感染及臨床療效的考核提供極為重要的診斷、治療和預(yù)后指征。目前HIV抗體的檢測是艾滋病實驗室檢測中最常用的方法，因為HIV抗體是患者感染HIV后最容易檢出并且持續(xù)時間最長的免疫學標志，而且抗體的檢測方法大多簡便、經(jīng)濟，易于推廣應(yīng)用。在介紹各種HIV實驗室診斷方法之前，為了使實驗室工作人員能夠有效地確保結(jié)果準確、可靠、優(yōu)質(zhì)，我們必須對作為一種感染因子的HIV以及由它所導致的致命性危害有基本的認識。實驗室工作人員應(yīng)特別注

3、意病毒的結(jié)構(gòu)、抗原組成，人體的免疫反應(yīng)，診斷試驗的基本原理、試驗結(jié)果的解釋，以及為了準確而有效地提供實驗診斷所必需的質(zhì)量保證措施。如果由于缺乏技術(shù)專長或基本知識而造成不正確的試驗結(jié)果是不可原諒的?，F(xiàn)將有關(guān)內(nèi)容扼要介紹如下：一、人類免疫缺陷病毒(HIV)概述（一）艾滋病病原體的發(fā)現(xiàn)和命名年份事由命名1981美國首先在洛杉磯男性同性戀中發(fā)現(xiàn)5例以往很罕見的卡氏肺囊蟲肺炎和26例卡波濟氏肉瘤患者，這些病人均表現(xiàn)有嚴重的免疫缺陷，但原因不明。1982年將這種新的疾病命名為“獲得性免疫缺陷綜合征”AcquiredImmunoDeficiencySyndrom

4、e，AIDS，即艾滋病1983從艾滋病流行學資料分析很可能是由病毒引起的。法國巴斯德研究所Montagnier等首先從多發(fā)性淋巴結(jié)病綜合癥病人分離到一種新的逆轉(zhuǎn)錄病毒淋巴結(jié)病相關(guān)病毒LymphadenopathyAssociatedVirus，LAV1984美國國立癌癥研究所RobertGallo等報道從艾滋病病人活檢組織分離到一種新的逆轉(zhuǎn)錄病毒與其以前發(fā)現(xiàn)的HTLV-1和HTLV-Ⅱ不同。人類嗜T淋巴細胞Ⅲ型病毒HumanT-cellLymphatropicVirustypeⅢ，HTLV-Ⅲ1984美國加州大學分離出艾滋病相關(guān)病毒AIDSRela

5、tedVirus，ARV111986國際病毒分類委員會將上述病毒統(tǒng)一命名為人類免疫缺陷病毒HumanImmunodeficiencyVirus，HIV1986Montagnier等又從西非病人體內(nèi)分離出一種具有相似生物學特性，而致病性、抗原性及分子生物學特征有明顯差別的新病毒。新發(fā)現(xiàn)的病毒命名為HIV-2，原來發(fā)現(xiàn)且已廣泛流行的HIV稱HIV-1。(二)HIV病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)、分類和分型HIV病毒是帶有包膜的RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒，在分類上屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科中的慢病毒亞科。目前發(fā)現(xiàn)有HIV-1和HIV-2兩型?，F(xiàn)已將HIV-1分為M組，共10個亞型(A-J)

6、和O組，HIV-2也至少有6個亞型（A-F）。在我國流行的是HIV-1，檢測到的亞型有8種之多，其中B亞型幾乎見于我國各個地區(qū)，而C亞型主要見于我國西南和西北地區(qū)，E亞型則多見于東南沿海和西南邊境地區(qū)。HIV病毒呈球形或卵圓形顆粒，直徑100-140mm，具有包膜。包膜是在病毒出芽釋放過程中獲得的。從脂質(zhì)膜上延伸出來的刺和園頭是糖蛋白(gp)。病毒顆粒內(nèi)部為核心，具有蛋白質(zhì)衣殼，里面有兩個相同拷貝的核酸(RNA)和病毒的三種酶：逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)、整合酶和蛋白酶。HIV基因組(RNA)含有9個基因，可分為結(jié)構(gòu)基因和調(diào)節(jié)基因。結(jié)構(gòu)基因包括gag、pol

7、和env3個，皆為調(diào)節(jié)基因。(三)與診斷技術(shù)密切相關(guān)的HIV抗原由三個結(jié)構(gòu)基因編碼的HIV-1抗原如下：1、gag蛋白：位于病毒顆粒內(nèi)核心部位，主要有分子量為55000道爾頓的蛋白質(zhì)(P)，稱P55。P55抗原是前體蛋白，在感染過程的早期產(chǎn)生，爾后裂解成其他核蛋白，包括P24、P17和P15等。2、env(包膜)糖蛋白：包膜抗原皆為糖蛋白(gp)，根據(jù)分子量分別稱為gp160、gp120和gp41。gp160是前體蛋白，是在感染過程中產(chǎn)生的一種成份，隨后裂解成gp120和gp41。gp120是外膜蛋白，組成外膜的72個刺突和園頭。gp41為跨膜蛋白

8、。二者共同參與病毒與突主細胞CD4分子的粘附。3、pol(聚合酶)蛋白質(zhì)：包括P66(RT)、P51和P31(整合酶或核酸