冰凍機(jī)采血小板制備、儲(chǔ)存、解凍過程中的質(zhì)量控制

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1、冰凍機(jī)采血小板制備、儲(chǔ)存、解凍過程中的質(zhì)量控制作者：邱玉霞,趙彥燕,李渝????作者單位：(焦作市中心血站考核信息科,河南焦作454000)?加入收藏夾【摘要】?目的：提高冰凍機(jī)采血小板在制備、冰凍儲(chǔ)存、解凍復(fù)蘇、運(yùn)輸過程中的質(zhì)量,避免出現(xiàn)不必要的報(bào)廢。方法：分析探討我站2082袋冰凍血小板在制備、冰凍、儲(chǔ)存、解凍和運(yùn)輸過程中各個(gè)環(huán)節(jié)與融化后出現(xiàn)絮狀物的關(guān)系。結(jié)果：冰凍儲(chǔ)存溫度控制在(-80±4)℃,絮狀物發(fā)生率為0.3%;融化溫度在42℃,融化時(shí)間不超過5min,絮狀物發(fā)生率為0.11%,與冰凍儲(chǔ)存溫度>-75℃、融化時(shí)間>5min比較差異均

2、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論：通過制訂有效措施,加強(qiáng)制備、冰凍、儲(chǔ)存、解凍復(fù)蘇、運(yùn)輸過程中各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制,使解凍復(fù)蘇后的冰凍血小板符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),在融化中或融化后不會(huì)出現(xiàn)大批絮狀物析出,減少了不必要的經(jīng)濟(jì)損失,為臨床搶救危重患者贏得了寶貴的時(shí)間?！娟P(guān)鍵詞】?冰凍機(jī)采血小板;融化;絮狀物析出;質(zhì)量控制　　血小板的深低溫冰凍儲(chǔ)存及復(fù)蘇研究工作至今已經(jīng)歷了五十多年的漫長歷程,與新鮮血小板相比,有保存期長、可大量儲(chǔ)存、無需預(yù)約、供應(yīng)及時(shí)等優(yōu)點(diǎn),近十年來,臨床普遍應(yīng)用的冰凍機(jī)采血小板為加入終濃度為5%的二甲基亞砜(DMSO)，-80℃保存的機(jī)采血

3、小板。冰凍機(jī)采血小板廣泛應(yīng)用于外科、婦產(chǎn)科手術(shù)，各類急性出血性疾病(如肝癌、肝硬化引起上消化道與門靜脈高壓大出血,腫瘤患者放、化療前后血小板減少性出血等)的防治[12]。輸入冰凍血小板后雖然血小板計(jì)數(shù)增加不明顯,不如新鮮血小板,但出血癥狀改善明顯,止血效果優(yōu)于新鮮血小板[34]。我站于2002年初開展冰凍機(jī)采血小板的制備工作,發(fā)現(xiàn)融化時(shí)或融化后有少量絮狀物析出的情況,經(jīng)過反復(fù)試驗(yàn)、分析,找出了質(zhì)量控制關(guān)鍵,現(xiàn)總結(jié)如下?！　?制備過程中的質(zhì)量控制　　1.1冰凍原材料機(jī)采血小板的質(zhì)量控制　　在采集過程中,血細(xì)胞分離機(jī)應(yīng)運(yùn)行正常,無沖紅、脂漿出現(xiàn)

4、,采血順利,采集的血小板應(yīng)外觀呈淡黃色云霧狀,無纖維蛋白析出、黃疸、氣泡,無重度乳糜,容量250ml左右,血小板含量≥2.5×1011·(袋)-1。　　1.2DMSO的濃度和加藥速度　　精確計(jì)算DMSO注入量,一般控制在5%終濃度為宜。因?yàn)镈MSO含量過高將增加其對(duì)血小板的毒性作用,同時(shí)增加病人的生理代謝負(fù)擔(dān);含量不足達(dá)不到抑制冰晶形成的作用。加藥前,盡量排盡袋內(nèi)空氣,加藥時(shí)的振蕩會(huì)使殘余的空氣形成大量氣泡,氣泡破裂產(chǎn)生碎片易激活凝血系統(tǒng),導(dǎo)致絮狀物出現(xiàn)。在加入DMSO過程中,水合作用會(huì)釋放大量熱能,所以應(yīng)嚴(yán)格控制加藥速度,以1ml·min-1

5、為宜,一邊加藥一邊不停地輕輕搖動(dòng)使之混勻,避免局部瞬間高熱導(dǎo)致血漿蛋白和血小板膜蛋白變性。locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame　　2冰凍及儲(chǔ)存過程中的質(zhì)量控制　　血小板冰凍儲(chǔ)存過程中溫度

6、變化與絮狀物出現(xiàn)的關(guān)系見表1。深低溫冰凍保存血小板的作用是減低細(xì)胞生物酶活性,從而使細(xì)胞的代謝處于基本停止?fàn)顟B(tài),DMSO分子量小,易透過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),對(duì)細(xì)胞膜起到保護(hù)作用。冰凍血小板儲(chǔ)存過程中,溫度波動(dòng)范圍在(-80±4)℃是安全的,不會(huì)引起大批血小板融化后出現(xiàn)絮狀物[5],而溫度波動(dòng)范圍越大、時(shí)間越長,出現(xiàn)表1冰凍血小板冰凍儲(chǔ)存過程中溫度變化與絮狀物出現(xiàn)的關(guān)系　　工作中我們應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：　　(1)加入DMSO的機(jī)采血小板外觀檢查合格后,應(yīng)平整放于外包裝盒中,迅速放入-80℃以下深低溫冰箱中進(jìn)行速凍。一臺(tái)冰箱內(nèi)一次放入1～2袋,單袋擺平,

7、不可兩袋重疊,避免一次放入過多而引起冰箱溫度升高,達(dá)不到速凍效果?！　?2)冰凍血小板在儲(chǔ)存過程中不得隨意更改儲(chǔ)存溫度,否則將會(huì)因水分子在不同低溫條件下改變分子排列,使結(jié)晶體發(fā)生變化,還可能造成對(duì)細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)的破壞,導(dǎo)致解凍復(fù)蘇后的血小板懸液內(nèi)有絮狀物析出[7]。若儲(chǔ)存溫度波動(dòng)范圍較大,血小板內(nèi)冰晶反復(fù)形成,對(duì)血小板可造成機(jī)械性損傷,同時(shí),因細(xì)胞內(nèi)外滲透壓的迅速變化也可造成血小板胞膜化學(xué)損傷,導(dǎo)致融化時(shí)絮狀物的出現(xiàn)[8]。因此,儲(chǔ)存冰凍血小板的低溫冰箱溫度應(yīng)恒定在(-80±4)℃。如遇冰箱除霜時(shí),應(yīng)將冰凍血小板放入另一臺(tái)-80℃低溫冰箱中,不

8、應(yīng)放入-50℃或-30℃冰箱中;如遇停電,應(yīng)立即啟用備用電源。　　(3)速凍與儲(chǔ)存應(yīng)分開處置,避免頻繁打開低溫冰箱門。在打開前低溫冰箱的溫度一定降至-