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《冰凍機采血小板制備、儲存、解凍過程中質量控制》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、冰凍機采血小板制備、儲存、解凍過程中的質量控制作者:邱玉霞,趙彥燕,李渝????作者單位:(焦作市中心血站考核信息科,河南焦作454000)?加入收藏夾【摘要】?目的:提高冰凍機采血小板在制備、冰凍儲存、解凍復蘇、運輸過程中的質量,避免出現(xiàn)不必要的報廢。方法:分析探討我站2082袋冰凍血小板在制備、冰凍、儲存、解凍和運輸過程中各個環(huán)節(jié)與融化后出現(xiàn)絮狀物的關系。結果:冰凍儲存溫度控制在(-80±4)℃,絮狀物發(fā)生率為0.3%;融化溫度在42℃,融化時間不超過5min,絮狀物發(fā)生率為0.11%,與冰凍儲存溫度>-75℃、
2、融化時間>5min比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論:通過制訂有效措施,加強制備、冰凍、儲存、解凍復蘇、運輸過程中各個環(huán)節(jié)的質量控制,使解凍復蘇后的冰凍血小板符合質量標準,在融化中或融化后不會出現(xiàn)大批絮狀物析出,減少了不必要的經濟損失,為臨床搶救危重患者贏得了寶貴的時間?!娟P鍵詞】?冰凍機采血小板;融化;絮狀物析出;質量控制 血小板的深低溫冰凍儲存及復蘇研究工作至今已經歷了五十多年的漫長歷程,與新鮮血小板相比,有保存期長、可大量儲存、無需預約、供應及時等優(yōu)點,近十年來,臨床普遍應用的冰凍機采血小板為加入終
3、濃度為5%的二甲基亞砜(DMSO),-80℃保存的機采血小板。冰凍機采血小板廣泛應用于外科、婦產科手術,各類急性出血性疾病(如肝癌、肝硬化引起上消化道與門靜脈高壓大出血,腫瘤患者放、化療前后血小板減少性出血等)的防治[12]。輸入冰凍血小板后雖然血小板計數(shù)增加不明顯,不如新鮮血小板,但出血癥狀改善明顯,止血效果優(yōu)于新鮮血小板[34]。我站于2002年初開展冰凍機采血小板的制備工作,發(fā)現(xiàn)融化時或融化后有少量絮狀物析出的情況,經過反復試驗、分析,找出了質量控制關鍵,現(xiàn)總結如下?! ?制備過程中的質量控制 1.1冰凍
4、原材料機采血小板的質量控制 在采集過程中,血細胞分離機應運行正常,無沖紅、脂漿出現(xiàn),采血順利,采集的血小板應外觀呈淡黃色云霧狀,無纖維蛋白析出、黃疸、氣泡,無重度乳糜,容量250ml左右,血小板含量≥2.5×1011·(袋)-1。 1.2DMSO的濃度和加藥速度 精確計算DMSO注入量,一般控制在5%終濃度為宜。因為DMSO含量過高將增加其對血小板的毒性作用,同時增加病人的生理代謝負擔;含量不足達不到抑制冰晶形成的作用。加藥前,盡量排盡袋內空氣,加藥時的振蕩會使殘余的空氣形成大量氣泡,氣泡破裂產生碎片易激活凝血
5、系統(tǒng),導致絮狀物出現(xiàn)。在加入DMSO過程中,水合作用會釋放大量熱能,所以應嚴格控制加藥速度,以1ml·min-1為宜,一邊加藥一邊不停地輕輕搖動使之混勻,避免局部瞬間高熱導致血漿蛋白和血小板膜蛋白變性。 2冰凍及儲存過程中的質量控制 血小板冰凍儲存過程中溫度變化與絮狀物出現(xiàn)的關系見表1。深低溫冰凍保存血小板的作用是減低細胞生物酶活性,從而使細胞的代謝處于基本停止狀態(tài),DMSO分子量小,易透過細胞膜進入細胞內,對細胞膜起到保護作用。冰凍血小板儲存過程中,溫度波動范圍在(-80±4)℃是安全的,不會引起大批血小板融化
6、后出現(xiàn)絮狀物[5],而溫度波動范圍越大、時間越長,出現(xiàn)表1冰凍血小板冰凍儲存過程中溫度變化與絮狀物出現(xiàn)的關系 工作中我們應注意以下幾點: (1)加入DMSO的機采血小板外觀檢查合格后,應平整放于外包裝盒中,迅速放入-80℃以下深低溫冰箱中進行速凍。一臺冰箱內一次放入1~2袋,單袋擺平,不可兩袋重疊,避免一次放入過多而引起冰箱溫度升高,達不到速凍效果?! ?2)冰凍血小板在儲存過程中不得隨意更改儲存溫度,否則將會因水分子在不同低溫條件下改變分子排列,使結晶體發(fā)生變化,還可能造成對細胞膜和細胞質的破壞,導致解凍復蘇后
7、的血小板懸液內有絮狀物析出[7]。若儲存溫度波動范圍較大,血小板內冰晶反復形成,對血小板可造成機械性損傷,同時,因細胞內外滲透壓的迅速變化也可造成血小板胞膜化學損傷,導致融化時絮狀物的出現(xiàn)[8]。因此,儲存冰凍血小板的低溫冰箱溫度應恒定在(-80±4)℃。如遇冰箱除霜時,應將冰凍血小板放入另一臺-80℃低溫冰箱中,不應放入-50℃或-30℃冰箱中;如遇停電,應立即啟用備用電源?! ?3)速凍與儲存應分開處置,避免頻繁打開低溫冰箱門。在打開前低溫冰箱的溫度一定降至-80℃以下,特別是新置入低溫冰箱的血小板必須降至-80
8、℃以下方可再開冰箱出入物品?! ?解凍復蘇過程中的質量控制 冰凍血小板不同融化時間與絮狀物出現(xiàn)的關系見表2。解凍是保存的最后步驟,不正確的解凍方法同樣會對血小板造成損傷。融化過程中,從-80℃以下低表2冰凍血小板不同融化時間與絮狀物出現(xiàn)的關系 溫冰箱中取出冰凍血小板后迅速放入42℃恒溫水浴箱內進行解凍復蘇,邊融化邊輕輕搖動,水要浸沒血小板保