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《解脲支原體(uu)核酸擴(kuò)增(pcr)熒光檢測試劑盒》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、解脲支原體(UU)核酸擴(kuò)增(PCR)熒光檢測試劑盒????深圳匹基生物工程有限公司開發(fā)的解脲支原體(UU)核酸擴(kuò)增(PCR)熒光檢測試劑盒具有以下特征:?1.高靈敏度:熒光PCR方法由于其光敏感特性,靈敏度顯著高于傳統(tǒng)的PCR電泳方法。?2.高特異性:對沙眼衣原體、淋球菌、人乳頭瘤病毒等的檢測均保持良好的陰性結(jié)果。3.防污染:與電泳法等不同,該試劑盒無須PCR后處理,完全閉管擴(kuò)增和檢測,同時(shí)采用了dUTP-UNG系統(tǒng),有效地防范了PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的污染,避免假陽性結(jié)果,提高臨床診斷依據(jù)的可靠性。?4.操作簡單、耗時(shí)短:試劑盒在特定的熒光PCR檢測儀上進(jìn)行擴(kuò)增和檢測,不需要進(jìn)行電泳或雜交的
2、操作,只需0.5-1.5小時(shí)(針對不同機(jī)型)即可完成PCR過程,有利于提高報(bào)告出具的速度。?5.使用方便:鏡檢、培養(yǎng)等方法檢測UU、NG和CT時(shí)均需采集三份樣本分別進(jìn)行,由于采集部位的特殊通常給病人帶來極大的痛苦,該試劑盒只需一次采樣,同時(shí)對檢驗(yàn)人員而言,只需處理一次標(biāo)本,為患者和醫(yī)生都提供了方便。?6.結(jié)果客觀可靠:無需人為判斷,儀器自動(dòng)收集和分析數(shù)據(jù)。適用機(jī)型:RocheLightCycler;BIO-RADicycler;PE7700;PE5700;ABI7300/7500;Line-Gene;Rotor-gene等????解脲支原體(M.urealyticum)為脲原體屬中唯一
3、的一個(gè)種,因生長需要尿素而得名。菌落微小,直徑僅有15~25um,須在低倍顯微鏡下觀察,故舊稱T株(tinystrain)locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame。菌落表面有粗糙顆粒,在合適條件下可轉(zhuǎn)成典型的荷包蛋樣菌落。生長需要膽
4、固醇和尿素,分解尿素為其代謝特征,產(chǎn)生氨氮,使培養(yǎng)基pH上升。????解脲支原體是存在于人類泌尿生殖道的一種重要的病原體,主要通過性生活傳播,多見于年輕性旺盛時(shí)期,尤多見于不潔性交后。當(dāng)泌尿生殖道發(fā)生炎癥,粘膜表面受損時(shí)解脲支原體易從破損口侵入,可引起泌尿生殖道感染,臨床常見癥狀為非淋性尿道炎、盆腔炎、前列腺炎、陰道炎、不育不孕癥等,也有少數(shù)無癥狀攜帶者,由于80%孕婦的生殖道內(nèi)帶有解脲支原體,因此可通過胎盤感染胎兒而導(dǎo)致早產(chǎn)、死胎,或在分娩時(shí)感染新生兒,引起呼吸道感染;此外,解脲支原體還可引起不孕癥,解脲支原體是近年來越來越引起臨床重視的病原體之一,并被認(rèn)為是非淋球菌性尿道炎中僅次于
5、衣原體(占50%)的重要病原體。診斷解脲支原體感染常用的實(shí)驗(yàn)室方法有以下幾種:?????(一)分離培養(yǎng)方法UU在含95%氮?dú)夂?%CO2環(huán)境中生長良好。其生長最適pH為5.5-6.5,最適溫度為36℃-37℃。UU具有尿素酶,能分解尿素產(chǎn)氨,使含酚紅指示劑的UU液體培養(yǎng)基pH值上升,顏色由黃色變?yōu)榧t色。再將液體培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種到UU固體培養(yǎng)基上,能生長成具特征性油煎蛋樣集落。(1)液體培養(yǎng)基:支原體肉湯培養(yǎng)基80mL,馬血清或小牛血清10mL,酵母浸液10mL,10%尿素溶液0.5mL-1.5mL,0.4%酚紅溶液0.5mL,青霉素(使其在培養(yǎng)基中的濃度為500U/mL-2000U/mL,)
6、用1NHCl調(diào)pH值至5.5-6.5,用小試管分裝后置冰箱中備用,每管1.5-2.0mL。(2)固體培養(yǎng)基:在100mL支原體肉湯培養(yǎng)基中,加入瓊脂1.2-1.4g,,高壓滅菌后冷卻到50℃左右,逐一加入上述添加劑。搖勻,倒入無菌平皿locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomiss
7、edfatal,whennightcame中,待凝固后,置冰箱中備用。接種標(biāo)本后,經(jīng)孵育,若培養(yǎng)基發(fā)生由黃變紅的顏色變化,透明無混濁(有別于某些細(xì)菌及真菌生長)則可初步判斷為有支原體生長。大多數(shù)UU在24h內(nèi)可獲得陽性結(jié)果。如果培養(yǎng)基發(fā)生顏色變化,但液體又有混濁,則應(yīng)排除雜菌污染,可用0.45μm濾膜過濾后,作再接種觀察。進(jìn)一步診斷需將液體培養(yǎng)物接種到固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),經(jīng)Dienes法染色后在低倍顯微鏡下觀察集落形態(tài)。陰性結(jié)果最好觀察5天。UU