解脲支原體(uu)核酸擴增(pcr)熒光檢測試劑盒

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1、解脲支原體(UU)核酸擴增(PCR)熒光檢測試劑盒????深圳匹基生物工程有限公司開發(fā)的解脲支原體(UU)核酸擴增(PCR)熒光檢測試劑盒具有以下特征：?1.高靈敏度：熒光PCR方法由于其光敏感特性，靈敏度顯著高于傳統(tǒng)的PCR電泳方法。?2.高特異性：對沙眼衣原體、淋球菌、人乳頭瘤病毒等的檢測均保持良好的陰性結果。3.防污染：與電泳法等不同，該試劑盒無須PCR后處理，完全閉管擴增和檢測，同時采用了dUTP-UNG系統(tǒng)，有效地防范了PCR擴增產(chǎn)物的污染，避免假陽性結果，提高臨床診斷依據(jù)的可靠性。?4.操作簡單、耗時短：試劑盒在特定的熒光P

2、CR檢測儀上進行擴增和檢測，不需要進行電泳或雜交的操作，只需0.5-1.5小時(針對不同機型)即可完成PCR過程，有利于提高報告出具的速度。?5.使用方便：鏡檢、培養(yǎng)等方法檢測UU、NG和CT時均需采集三份樣本分別進行，由于采集部位的特殊通常給病人帶來極大的痛苦，該試劑盒只需一次采樣，同時對檢驗人員而言，只需處理一次標本，為患者和醫(yī)生都提供了方便。?6.結果客觀可靠：無需人為判斷，儀器自動收集和分析數(shù)據(jù)。適用機型：RocheLightCycler；BIO-RADicycler；PE7700；PE5700；ABI7300/7500；Lin

3、e－Gene；Rotor-gene等????解脲支原體（M.urealyticum）為脲原體屬中唯一的一個種，因生長需要尿素而得名。菌落微小，直徑僅有15～25um，須在低倍顯微鏡下觀察，故舊稱T株(tinystrain)。菌落表面有粗糙顆粒，在合適條件下可轉(zhuǎn)成典型的荷包蛋樣菌落。生長需要膽固醇和尿素，分解尿素為其代謝特征，產(chǎn)生氨氮，使培養(yǎng)基pH上升。????解脲支原體是存在于人類泌尿生殖道的一種重要的病原體，主要通過性生活傳播，多見于年輕性旺盛時期，尤多見于不潔性交后。當泌尿生殖道發(fā)生炎癥，粘膜表面受損時解脲支原體易從破損口侵入，可引

4、起泌尿生殖道感染，臨床常見癥狀為非淋性尿道炎、盆腔炎、前列腺炎、陰道炎、不育不孕癥等，也有少數(shù)無癥狀攜帶者，由于80%孕婦的生殖道內(nèi)帶有解脲支原體，因此可通過胎盤感染胎兒而導致早產(chǎn)、死胎，或在分娩時感染新生兒，引起呼吸道感染；此外，解脲支原體還可引起不孕癥，解脲支原體是近年來越來越引起臨床重視的病原體之一，并被認為是非淋球菌性尿道炎中僅次于衣原體（占50%）的重要病原體。診斷解脲支原體感染常用的實驗室方法有以下幾種：?????(一)分離培養(yǎng)方法UU在含95%氮氣和5%CO2環(huán)境中生長良好。其生長最適pH為5.5-6.5,最適溫度為36℃

5、-37℃。UU具有尿素酶，能分解尿素產(chǎn)氨，使含酚紅指示劑的UU液體培養(yǎng)基pH值上升，顏色由黃色變?yōu)榧t色。再將液體培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種到UU固體培養(yǎng)基上，能生長成具特征性油煎蛋樣集落。(1)液體培養(yǎng)基：支原體肉湯培養(yǎng)基80mL，馬血清或小牛血清10mL，酵母浸液10mL,10%尿素溶液0.5mL-1.5mL,0.4%酚紅溶液0.5mL,青霉素(使其在培養(yǎng)基中的濃度為500U/mL-2000U/mL,)用1NHCl調(diào)pH值至5.5-6.5,用小試管分裝后置冰箱中備用，每管1.5-2.0mL。(2)固體培養(yǎng)基：在100mL支原體肉湯培養(yǎng)基中，加入瓊脂1

6、.2-1.4g,,高壓滅菌后冷卻到50℃左右，逐一加入上述添加劑。搖勻，倒入無菌平皿中，待凝固后，置冰箱中備用。接種標本后，經(jīng)孵育，若培養(yǎng)基發(fā)生由黃變紅的顏色變化，透明無混濁(有別于某些細菌及真菌生長)則可初步判斷為有支原體生長。大多數(shù)UU在24h內(nèi)可獲得陽性結果。如果培養(yǎng)基發(fā)生顏色變化，但液體又有混濁，則應排除雜菌污染,可用0.45μm濾膜過濾后，作再接種觀察。進一步診斷需將液體培養(yǎng)物接種到固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),經(jīng)Dienes法染色后在低倍顯微鏡下觀察集落形態(tài)。陰性結果最好觀察５天。UU在固體培養(yǎng)基上集落核心呈粗顆粒狀,具極窄的邊，有時呈

7、油煎蛋樣。如用Dienes法染色，集落為特異的藍色。一般細菌的菌落不著色，容易鑒別。????(二)代謝抑制試驗根據(jù)特異性抗體能阻止支原體的生長和代謝這一特性，可用病人血清進行代謝抑制試驗。在加有抗血清的培養(yǎng)基中，支原體的代謝受到抑制，從而阻止了培養(yǎng)基的顏色改變。代謝抑制試驗也可用于檢測感染支原體患者血清抗體的滴度。即將血清作10倍連續(xù)稀釋后，滴入支原體培養(yǎng)液，并以不加血清的支原體試驗管和不加支原體液的培養(yǎng)基管作對照。經(jīng)37℃培養(yǎng)，不加抗血清的培養(yǎng)管支原體應生長良好，培養(yǎng)基變成紅色(Uu或Mh)，未加支原體液培養(yǎng)基管顏色不變。未發(fā)生顏色變

8、化的最高血清稀釋度為代謝抑制試驗的抗體滴度。???(三)間接血凝試驗在一定條件下，抗體和相應抗原相遇，可形成抗原抗體復合物。這種復合物分子團很小,不能形成肉眼可見的反應。用經(jīng)鞣酸處理的紅細胞作載體，將抗原吸