墨旱蓮水煎劑對致衰老小鼠肝臟中SOD、MDA、GSHPx的影響.doc

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1、墨旱蓮水煎劑對致衰老小鼠肝臟中SOD、MDA、GSHPx的影響作者：石變?nèi)A莊曉燕白秀珍【摘要】目的：研究墨旱蓮對D半乳糖致衰老小鼠肝臟中SOD、MDA、GSHPx的影響。方法：通過測定小鼠肝臟SOD、GSHPx的活性及MDA的含量的變化，研究墨旱蓮水煎劑的延緩衰老功效。結(jié)果：墨旱蓮水煎劑會顯著增強SOD、GSHPx的活性，降低MDA的含量。結(jié)論：墨旱蓮水煎劑有顯著的延緩衰老作用。【關(guān)鍵詞】墨旱蓮；D半乳糖；衰老；肝臟　　中藥墨旱蓮為菊科植物鱧腸（EcliptaprostrataL）的全草。其性味甘、酸、涼，入肝、腎、胃、小腸、大腸五

2、經(jīng)，對臨床很多疾病有很好的治療效果。墨旱蓮具有免疫調(diào)節(jié)、擴血管、抗誘變、抗炎等藥理作用。本實驗以D半乳糖致衰老小鼠為研究對象，探討墨旱蓮的延緩衰老作用?！　?材料和方法　　11材料　　111藥品與試劑墨旱蓮購自錦州大德堂藥房；MDA、SOD、GSHPx測定試劑盒購自南京建成生物工程研究所；其余試劑均為國產(chǎn)分析純試劑?！　?12實驗動物昆明系小鼠，3月齡，25～30g，雌雄各半。由遼寧醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供?！　?13墨旱蓮水煎劑的制備①制備前準(zhǔn)備：墨旱蓮干品蒸餾水漂洗3次，烘箱干燥后用粉碎機粉碎，過100目篩；②水煎劑的制備：

3、將過篩的墨旱蓮以蒸餾水浸泡半小時，加熱至沸騰，文火煮1小時，如此反復(fù)3次，將3次所得的煎出液混合后減壓濃縮，干燥后待用；③用藥前準(zhǔn)備：將提取物以蒸餾水溶解，配制成每毫升相當(dāng)于生藥1.0g的溶液?！　?2方法　　121實驗動物分組及用藥取昆明系小鼠50只，隨機分成5組，每組10只。Ⅰ組空白對照組，Ⅱ組半乳糖致衰組，Ⅲ組低劑量用藥組，Ⅳ組中劑量用藥組，Ⅴ組高劑量用藥組。Ⅰ組每日灌胃生理鹽水，Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組每日皮下注射D半乳糖1mg/10g鼠重，同時灌胃墨旱蓮水煎劑分別為6mg/g、12mg/g、24mg/g鼠重。連續(xù)42天，第43天

4、取材檢測。3　　122肝組織SOD、MDA和GSHPx的測定按照試劑盒說明書測定。　　123數(shù)據(jù)處理實驗數(shù)據(jù)采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件處理，計算均值及標(biāo)準(zhǔn)差均采用t檢驗?！　?結(jié)果　　Ⅱ組與Ⅰ組比較血清和肝臟SOD、GSHPx的活性降低且MDA的含量升高；Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組中肝臟SOD、GSHPx的活性與Ⅱ組比較均有不同程度的升高且MDA的含量有不同程度的降低，即墨旱蓮由于劑量不同表現(xiàn)出不同程度的延緩衰老作用。其中尤以Ⅴ組的作用最顯著。見表1?！　”?墨旱蓮水煎劑對肝的延緩衰老作用（略）　　注：與正常組相比，*P＜0.01;與D

5、半乳糖組相比，#P＜0.05,##P＜0.01。　　3討論　　正常機體的自由基氧化作用與抗氧化防御作用處于動態(tài)平衡狀態(tài)。當(dāng)清除自由基的酶和非酶系統(tǒng)的防御功能減退時，這種動態(tài)平衡失調(diào)，導(dǎo)致生物體老化［1］。D半乳糖亞急性中毒動物是國內(nèi)外近年常用的衰老模型［2］，已證明D半乳糖可產(chǎn)生擬衰老反應(yīng)，對氧自由基代謝的損傷與人體衰老的改變基本一致［3］。本實驗D半乳糖致小鼠衰老，實驗結(jié)果顯示Ⅱ組小鼠SOD、GSHPx的活性及MDA的含量與Ⅰ組比較有顯著差異(P<0.01)，證明本實驗D半乳糖致衰老模型成功。國內(nèi)已有實驗證實墨旱蓮黃酮類提取物

6、有延緩衰老的作用［4］。本實驗利用D半乳糖制造小鼠衰老模型，給小鼠口服不同劑量的墨旱蓮水煎劑。從表1中可看出，Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組中SOD、GSHPx的活性高于Ⅱ組及MDA的含量低于Ⅱ組，且呈劑量依賴性，說明墨旱蓮水煎劑對D半乳糖致衰老小鼠有顯著延緩衰老作用。細胞線粒體是氧自由基損傷的主要靶位，也是細胞內(nèi)源性氧自由基的主要來源［4］。線粒體的老化是細胞衰老的重要原因之一［5］。脂質(zhì)過氧化（LPO）產(chǎn)物MDA的水平往往可反映活性氧損傷程度?？寡趸窼OD和GSHPx活性是反映機體抗氧化能力的重要指標(biāo)。所以認(rèn)為墨旱蓮的延緩衰老的作用機理可能是保

7、護線粒體免受自由基損害。墨旱蓮延緩衰老作用的有效成分可能是黃酮類成分［6］，具體還有待于進一步研究?！緟⒖嘉墨I】　　1NohlH.Involvementoffreeradicalsinageing:aconsequenceorcauseofsenescence.BriMedBull,1993，49(3):653　　2龔國清,徐黻本.小鼠衰老模型的研究.中國藥科大學(xué)學(xué)報,1991,22:101~103.　　3張熙，李文彬.D半乳糖亞急性中毒大鼠擬衰老生化改變.中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志，1990，4（4）：3093　　4許春富.自由基清除劑對腦

8、缺血的保護作用.國外醫(yī)學(xué)腦血管病分冊，1994，2：213　　5劉永海,吳麗娟,陳清棠.線粒體形態(tài)結(jié)構(gòu)隨增齡的變化.中華老年醫(yī)學(xué)雜志，1996，15