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1、梅毒——檢查、診斷與治療一、實(shí)驗(yàn)室檢查梅毒螺旋體（TP）直接檢查梅毒血清學(xué)試驗(yàn)?zāi)X脊液檢查影像學(xué)檢查組織病理學(xué)檢查1、梅毒螺旋體直接檢查暗視野顯微鏡鍍銀染色吉姆薩染色直接免疫熒光暗視野顯微鏡檢查標(biāo)本類型：梅毒硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損的滲出液、淋巴結(jié)穿刺液方法：暗視野顯微鏡下查找梅毒螺旋體。結(jié)果：典型的梅毒螺旋體呈白色發(fā)光,其螺旋較密而均勻。運(yùn)動(dòng)方式：①伸縮其螺旋間距離而移動(dòng)（主要方式）②蛇行式③旋轉(zhuǎn)式暗視野顯微鏡下的梅毒螺旋體暗視野顯微鏡檢查結(jié)果解釋1、暗視野顯微鏡查陽性，臨床上可確診梅毒。特別對(duì)一期梅毒硬下疳，腫大淋巴
2、結(jié)，二期梅毒皮膚粘膜損的診斷有重要價(jià)值，尤其使用于早期梅毒血清學(xué)陰性時(shí)。暗視野顯微鏡檢查結(jié)果解釋2、陰性結(jié)果不能排除梅毒，可能是：螺旋體數(shù)量不足已用過抗生素或某些外用藥損害接近自然消退②鍍銀染色基本原理：梅毒螺旋體具有親銀性，可被銀溶液染色，從而可以在鏡下觀察到梅毒螺旋體結(jié)果：棕褐色的梅毒螺旋體2、梅毒血清學(xué)試驗(yàn)是梅毒主要的檢查方法和確診的主要依據(jù)原理人體感染梅毒螺旋體后可產(chǎn)生多種抗體：一方面，在組織破壞過程中可釋放一種具有抗原性的類脂質(zhì)（心磷脂），能刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，為非特異性的，稱為反應(yīng)素。另一方面，機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)梅
3、毒螺旋體的抗體，為特異性的。非特異性試驗(yàn)（PRP、TRUST、VDRL）梅毒血清學(xué)試驗(yàn)特異性試驗(yàn)（TPHA、TPPA、FTA-ABS）非特異性：PRP原理：梅毒螺旋體感染后，破壞人體組織，釋放抗原性心磷脂，刺激機(jī)體產(chǎn)生反應(yīng)素。方法：（定性試驗(yàn)）在紙卡圓圈中加入50μL待檢血清，涂滿整個(gè)圓圈使用滴管和專用針頭（60滴/mL），加1滴抗原懸液旋轉(zhuǎn)100rpm，8min立即判斷結(jié)果非特異性：PRP結(jié)果判斷陽性：在圓圈中見不規(guī)則大小黑色凝集塊陰性：在圓圈中無黑色凝集塊，僅見均勻的無凝集現(xiàn)象或黑色顆粒集中在圓圈中心中等至大的凝塊為陽性
4、（圈4和7）有明確但很小的凝塊為弱陽性（圈2和3）顆粒均勻分布（圈1,5,8-10）或稍粗糙（圈6）為陰性非特異性：PRP臨床意義可用于療效觀察、判定復(fù)發(fā)及再感染適用于普查、婚檢、產(chǎn)前檢查及其它健康體檢可能有生物學(xué)假陽性(滴度常<1:8）:急性發(fā)熱性傳染病，妊娠，吸毒，膠原性疾?。⊿LE，類風(fēng)關(guān)）非特異性：TRUSTTRUST（甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)）基本原理：在心磷脂、卵磷脂和膽固醇等組成的抗原中加入甲苯胺紅，與待檢血清中的反應(yīng)素結(jié)合，形成肉眼可見的紅色絮狀物。凝集反應(yīng)強(qiáng)度分級(jí)：3+～4+：圓圈內(nèi)出現(xiàn)中到大的紅色絮狀物，液
5、體清亮。2+：圓圈內(nèi)出現(xiàn)小到大的紅色絮狀物，液體較清亮。1+：圓圈內(nèi)出現(xiàn)小的紅色絮狀物，液體渾濁。—：圓圈內(nèi)僅見紅色集中于中央一點(diǎn)或均勻分散。四種非特異性試驗(yàn)方法比較非特異性血清試驗(yàn)的假陰性：1）有25%~40%的未治梅毒在晚期隱性期可自然逆轉(zhuǎn)為陰性，約30%的心血管和神經(jīng)梅毒呈陰性。2）前帶現(xiàn)象（theprozonphenomenon）,即為抗原抗體量比例不適，抑制陽性反應(yīng)。一般易發(fā)生在滴度在1：500以上的標(biāo)本中。1%的II期梅毒會(huì)出現(xiàn)前帶現(xiàn)象。3）操作人員應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)的溫度，試劑盒從冰箱取出后應(yīng)恢復(fù)至室溫，室溫過低（〈1
6、0℃）可能出現(xiàn)假陰性或結(jié)果不準(zhǔn)確。非特異性血清試驗(yàn)生物學(xué)假陽性0.25%~0.86%陽性標(biāo)本為生物學(xué)假陽性，主要出現(xiàn)在自身免疫疾?。ㄋ蠦FP反應(yīng)的14%）的患者、其它病原體感染（病毒性肺炎、惡性腫瘤和麻風(fēng)）、妊娠婦女。應(yīng)排除技術(shù)性、生理性和生物學(xué)假陽性，并用特異性試驗(yàn)來證實(shí)。特異性：TPPA基本原理：用超聲裂解梅毒螺旋體制備抗原，致敏明膠顆粒，其致敏粒子與待檢血清中的抗梅毒螺旋體特異性抗體結(jié)合，產(chǎn)生肉眼可見的凝集。步驟：1.試劑準(zhǔn)備：試驗(yàn)前將試劑和待檢標(biāo)本恢復(fù)到室溫。2.加稀釋液：每份樣本做4孔，加標(biāo)本稀釋液加至微量反應(yīng)板
7、孔內(nèi)，第1孔100微升，第2～4孔各25微升。3.樣本稀釋：取血清25微升加至第1孔，混勻后取25微升至第2孔，混勻后取25微升至第3孔，混勻后取25微升至第4孔，混勻后棄去25微升。4.加對(duì)照液：第3孔加未致敏顆粒25微升，第4孔加致敏顆粒25微升。5.混合：將反應(yīng)板置振蕩器振蕩30秒。6.反應(yīng)：置有蓋濕盒，孵育2h，或放4℃冰箱過夜觀察結(jié)果。特異性：TPPA結(jié)果判定1.觀察加未致敏顆粒的第3孔，不出現(xiàn)凝集為有效試驗(yàn)。2.觀察凝集反應(yīng)強(qiáng)度：分級(jí)如下。4+：顆粒光滑覆蓋整個(gè)孔底，有時(shí)邊緣有折疊。3+：顆粒光滑覆蓋大部分孔底。
8、2+：顆粒光滑集聚覆蓋孔底，周圍有一顆粒環(huán)。1+：?顆粒光滑集聚覆蓋孔底，周圍有一明顯顆粒環(huán)?！溃侯w粒沉集孔底，中央形成一小點(diǎn)。 ??一：顆粒緊密沉積孔底中央。特異性：TPPA臨床意義敏感性和特異性高，是梅毒的確診試驗(yàn)。對(duì)未經(jīng)治療的梅毒的敏感性：一期76％，二期100％，潛伏97％，晚期9
