味中藥提取物對無乳鏈球菌的體外抗菌活性研究

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1、畢業(yè)論文（設計）題目5味中藥提取物對無乳鏈球菌的體外抗菌活性研究選題類型基礎型課題來源自選項目學院動物醫(yī)學院專業(yè)藥學（中獸藥學方向）指導教師殷中瓊職稱教授姓名陳蘋年級2010學號20101699開題報告（立題依據(jù)、研究的主要內(nèi)容及預期目標、研究方案、論文進度安排、主要參考文獻）1立題依據(jù)1.1無乳鏈球菌形態(tài)特點無乳鏈球菌是鏈球菌屬的一個種，按Lancefied氏血清分類，劃歸B群，所以又可以稱為B群鏈球菌。革蘭氏染色呈陽性，當用陳舊培養(yǎng)物培養(yǎng)時，有時也為革蘭氏陰性。為直徑0.6μm~1.2μm大小的圓形或卵圓形菌體，單個、成雙、鏈狀排列，長短不一。在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)時，一般形成較長的

2、鏈。無鞭毛，無芽孢。需氧或兼性厭氧，在5%血液瓊脂生長良好。最適生長溫度為36℃~37℃，10℃和45℃均不生長。在35℃血瓊脂上培養(yǎng)18~24h可形成灰白色、濕潤、表面光滑、有乳光、圓形的菌落，大多數(shù)可產(chǎn)生β溶血，但溶血環(huán)較窄。也有部分菌株不會產(chǎn)生β溶血環(huán)。1.2無乳鏈球菌的致病作用及危害無乳鏈球菌是乳腺炎的病原體，常寄生于乳牛的皮膚、乳頭及乳房內(nèi)，通過擠乳機械或擠乳人員的手以及蠅類攜帶而傳播。這種鏈球菌引起乳房炎后不產(chǎn)生明顯免疫力，目前尚無可靠的多價菌苗。在全國各地，?；忌先橄傺椎膱蟮辣缺冉允?。而當?；忌狭巳橄傺字?，人類可通過食入被污染的奶制品而被感染，可見乳腺炎乳汁中的有害病

3、菌既能引起乳房炎又能使人患病。2008年2月中山大學附屬東華醫(yī)院報道了由無乳鏈球菌引起的四例新生兒敗血癥,2009年3月13日醫(yī)學經(jīng)濟報報道了1例無乳鏈球菌引起的新生兒敗血癥，北京兒童醫(yī)院新生兒病房在肺炎、敗血癥、腦膜炎等患105例中確定無乳鏈球菌感染27例。本病主要病理變化在乳房部位,切開患病乳房可見:乳腺淋巴結水腫,切面多汁,質(zhì)地脆弱,有點狀出血,乳腺的實質(zhì)部分有水腫現(xiàn)象,腺泡、腺小管腫脹明顯,內(nèi)含稀薄的乳汁,毛細血管充血,有的血管破裂,血液混入腺泡和腺小管內(nèi)的乳汁中,因而分泌出“血乳”。在乳腺的間質(zhì)部分,可見乳腺的葉間組織和小葉間組織具有不同程度的腫脹,整個結締組織變?yōu)榈S色。

4、在干乳期時,整個乳腺部分,包括間質(zhì)和實質(zhì),都變?yōu)辄S色,尤以脂肪組織黃染嚴重,質(zhì)地變硬,乳腺腺泡和腺小管萎縮,萎縮的葉間組織和小葉間組織壓縮在一起,整個乳腺組織的萎縮,成為一個硬結,乳腺分泌機能閉塞或完全閉塞。有的病例在乳池內(nèi)有極少量的滴狀的濃稠性的蠟黃色乳腺分泌物[1]。1.3防治措施無乳鏈球菌主要引發(fā)乳腺炎，特別是牛乳腺炎，主要發(fā)病原因跟牛舍的管理和環(huán)境有關。圈舍的設計和管理直接影響到乳腺內(nèi)感染的發(fā)生與否。擠乳操作的規(guī)范也是感染與否的原因之一。在防治方面主要以治為主，殺滅細菌，并防止病原菌的侵入，減輕乳房的炎性癥狀。治療時，歷來采用抗生素，也有用磺胺和呋喃類的。但是傳統(tǒng)抗生素治療存

5、在許多不利因素，比如，易產(chǎn)生耐藥性和抗藥性；單一藥物抗菌譜不夠廣，混合幾種抗生素使用花費又較高；易產(chǎn)生副作用等等。最主要的是容易造成牛乳中殘留藥物的蓄積，直接導致乳牛發(fā)病，甚至還能危害人類的健康[2]。1.4研究的目的意義從上可以看出，雖然現(xiàn)階段人們對無乳鏈球菌的認識和預防已經(jīng)比較全面，但是對于治療無乳鏈球菌還是不夠，雖然也有過不少研究者研究了用西藥抗生素作為主要治療手段，但是效果卻不是那么理想，所以，本研究擬通過前期抗菌中獸藥的篩選，最終選擇黃連，茵陳，烏梅，蒲公英，板藍根五味抗菌效果較好的中藥作為研究對象，通過體外抑菌試驗和聯(lián)合抑菌實驗，篩選體外對無乳鏈球菌具有較好抗菌活性的中藥

6、復方。下面為每種中藥的相關研究，特別是有關其抗菌活性及其活性成分或活性部位的相關文獻研究。黃連，毛莨科植物黃連(CoptisChinesisFranch)、三角葉黃連(CoptisdeltoideaC.Y.ChengetHisao)或云連(CoptisteetaWall)的干燥根莖。以上3種分別習稱“味連”、“雅連”、“云連”。三種黃連均含有多種生物堿[3]。黃連自古以來就是作為一種抗菌藥來使用，臨床上常用于降熱鎮(zhèn)痛、抗腸道細菌感染，近年來發(fā)現(xiàn)黃連還有抗心律失常、降血脂、降血糖、抗血小板聚集等藥理作用。目前研究[4]證實黃連對金黃色葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌、霍亂弧菌、炭疽桿菌均有較

7、強的抗菌作用，因此其是研究中藥體外抗菌活性的理想實驗藥物。茵陳為菊科植物濱蒿ArtemisiascopariaWaldst.etKit.或茵陳蒿ArtemisiacapillarisThunb.的幼苗[5]?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，茵陳具有抗病原微生物，增強免疫，鎮(zhèn)痛消炎等作用。除此外，茵陳還是無污染、無抗藥性、無有害物質(zhì)殘留并且價廉優(yōu)質(zhì)的無公害綠色飼料和飼料添加劑。烏梅,別名酸梅、黑梅，由薔薇科植物梅Prunusmume(Sieb1)Sieb1etZucc1(Ar