醫(yī)藥學臨床醫(yī)學畢業(yè)論文 韭子對老年小鼠免疫功能影響的實驗研究

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1、湖南師范大學本科畢業(yè)論文考籍號：XXXXXXXXX姓名：XXX專業(yè)：醫(yī)藥學臨床醫(yī)學論文題目：韭子對老年小鼠免疫功能影響的實驗研究指導老師：XXX二〇一一年十二月十日【摘要】目的研究韭子水煎劑對老年小鼠免疫功能的影響。方法以韭子水煎劑灌胃老年小鼠30d，應用流式細胞技術檢測小鼠T淋巴細胞亞群、放射免疫方法檢測血清白介素2（IL2）含量，ELISA方法檢測血清中免疫球蛋白G（IgG）的含量。結果　老年組脾臟T淋巴細胞亞群比例失調，血清IL2和IgG含量下降；老年韭子水煎劑治療組脾臟T淋巴細胞亞群由失衡恢復到平衡，血清IL2和IgG含量提高

2、。結論韭子水煎劑具有恢復老年小鼠免疫功能的作用?！娟P鍵詞】韭子水煎劑；老年小鼠；免疫功能　中藥韭子為百合科植物韭的種子，含有生物堿、揮發(fā)油、皂甙、硫化物、蛋白質、氨基酸、油脂、維生素C等成分。研究表明，中藥韭子具有補肝腎，暖腰膝，壯陽，抗炎抑菌、祛痰等藥理作用〔1〕，并能增強小鼠非特異性免疫和體液免疫功能〔2〕。但對老年個體的免疫功能調節(jié)作用目前尚未見報道。本實驗通過檢測老年小鼠T淋巴細胞亞群，IL2活性以及IgG含量，探討韭子對老年小鼠免疫功能的影響?！　?材料與方法　　11　材料　　韭子購于佳木斯市藥材公司。抗小鼠CD3、抗小鼠CD4

3、、抗小鼠CD8單克隆抗體（McAb）：北京醫(yī)科大學免疫系。IL2試劑盒：解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免所；IgGELISA檢測試劑盒：北京邦定生物試劑公司?！　?2對象　　健康昆明種小鼠來自本校實驗動物中心，30只,雌雄各半，青年組(2月齡)10只,體重（20±2）g,老年組(12月齡)20只,體重(50±5）g。　　13方法　　131中藥制備　　韭子50g，按傳統(tǒng)方法水煎煮2次，合并兩次濾液后加熱濃縮制成含生藥量為1g/ml的韭子水煎液。　　132實驗分組　　實驗分為三組,青年組10只，老年組10只,老年韭子水煎劑治療組10只。

4、治療組根據每鼠體重灌胃給予韭子水煎劑05ml（124g/kg）每日1次〔2〕;老年組、青年組,灌服生理鹽水05ml/只，每日1次。連續(xù)30d后，取小鼠眼球血，離心分離血清，凍存，待檢；小鼠斷髓處死，無菌取脾，于Hanks液中研碎，制成1×106/ml脾細胞懸液?！　?4指標檢測　　141T淋巴細胞亞群測定　　將脾細胞懸液分別加入2個試管內，1ml/管。第1管加入FITC標記的抗小鼠CD3+單克隆抗體40μl、第二管同時加入PE標記的抗小鼠CD4+單克隆抗體和FITC標記的抗小鼠CD8+單克隆抗體各20μl，作用30min后，加入1

5、ml熒光洗液，2200r/min離心5min，去上清。加入1ml熒光保存液，流式細胞儀檢測106個細胞中各細胞亞群的百分率。　　142血清IL2的檢測　　采用放射免疫法測定法，按試劑盒說明書操作?！　?43血清IgG檢測　　ELISA法，按試劑盒說明書操作?！　?5統(tǒng)計學處理　　實驗各項指標以x±s表示，通過SPSS100軟件進行統(tǒng)計學處理，組間進行方差分析、q檢驗。　　2結果　　21韭子水煎劑對老年小鼠T淋巴細胞亞群的影響　　見表1。老年組與青年組比較，CD4+亞群的比例、CD4+/CD8+的比值明顯降低，統(tǒng)計學有顯著性差異

6、（P＜005），說明模型成功；應用韭子水煎劑治療后，治療組CD4+亞群和CD4+/CD8+的比值與青年組比較無明顯差異（P＞005）。表1韭子水煎劑對衰老小鼠脾臟T淋巴細胞亞群功能的影響(略)　　22韭子水煎劑對老年小鼠血清IL2和IgG含量的影響　　見表2。老年組與青年組比較，血清IL2和IgG水平明顯降低，具有顯著性差異（P＜005），說明模型成功；應用韭子水煎劑治療后，治療組與青年組比較，血清IL2和IgG含量水平無明顯差異（P＞005）。表2韭子水煎劑對小鼠血清IL2的影響(略)　　3討論　　在衰老個體，免疫器官出現萎縮,淋巴

7、細胞總數下降,各亞群的功能也降低,CD4細胞和CD8細胞比例改變,表面的CD4受體和CD8受體的密度也下降；淋巴細胞分泌的細胞因子如IL2的含量也發(fā)生了改變，造成個體一生中第二個發(fā)病高峰〔3〕。通過本實驗證明,韭子水煎劑能調整衰老個體T淋巴細胞亞群的失衡，起到了恢復細胞免疫功能的作用。并通過提高IL2和IgG水平，進一步的調整了衰老小鼠細胞免疫功能和體液免疫功能。T細胞介導細胞免疫，Th細胞(CD4+)和TS細胞(CD8+)的相互協(xié)調是調控的重要環(huán)節(jié)之一。　　CD4+/CD8+的比值反應機體免疫內環(huán)境是否穩(wěn)定的一個重要指標,兩者平衡決定了

8、免疫反應的總效應,若比值偏離正常值,說明機體免疫功能失調〔4〕。本實驗結果表明：老年小鼠CD4+細胞明顯降低，CD4+/CD8+比值偏離正常水平，提示老年小鼠T細胞