韭子對(duì)老年小鼠免疫功能影響實(shí)驗(yàn)探究

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1、韭子對(duì)老年小鼠免疫功能影響實(shí)驗(yàn)探究【摘要】目的研究韭子水煎劑對(duì)老年小鼠免疫功能的影響。方法以韭子水煎劑灌胃老年小鼠30d,應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)小鼠T淋巴細(xì)胞亞群、放射免疫方法檢測(cè)血清白介素2(IL2)含量，ELISA方法檢測(cè)血清中免疫球蛋白G(IgG)的含量。結(jié)果老年組脾臟T淋巴細(xì)胞亞群比例失調(diào)，血清IL2和IgG含量下降；老年韭子水煎劑治療組脾臟T淋巴細(xì)胞亞群由失衡恢復(fù)到平衡，血清IL2和IgG含量提高。結(jié)論韭子水煎劑具有恢復(fù)老年小鼠免疫功能的作用。【關(guān)鍵詞】韭子水煎劑；老年小鼠；免疫功能中藥韭子為百合科植物韭的種

2、子，含有生物堿、揮發(fā)油、皂武、硫化物、蛋白質(zhì)、氨基酸、油脂、維生素C等成分。研究表明，中藥韭子具有補(bǔ)肝腎，暖腰膝，壯陽(yáng)，抗炎抑菌、祛痰等藥理作用〔1),并能增強(qiáng)小鼠非特異性免疫和體液免疫功能〔2〕。但對(duì)老年個(gè)體的免疫功能調(diào)節(jié)作用目前尚未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)老年小鼠T淋巴細(xì)胞亞群，IL2活性以及IgG含量，探討韭子對(duì)老年小鼠免疫功能的影響。1材料與方法11材料韭子購(gòu)于佳木斯市藥材公司?？剐∈驝D3、抗小鼠CD4、抗小鼠CD8單克隆抗體（McAb）:北京醫(yī)科大學(xué)免疫系。IL2試劑盒：解放軍總醫(yī)院科技開(kāi)發(fā)中心放免所；Ig

3、GELISA檢測(cè)試劑盒：北京邦定生物試劑公司。12對(duì)象健康昆明種小鼠來(lái)自本校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，30只，雌雄各半，青年組（2月齡）10只，體重（20±2）g,老年組（12月齡）20只，體重（50±5）go13方法131中藥制備韭子50g,按傳統(tǒng)方法水煎煮2次，合并兩次濾液后加熱濃縮制成含生藥量為1g/ml的韭子水煎液。132實(shí)驗(yàn)分組實(shí)驗(yàn)分為三組，青年組10只，老年組10只，老年韭子水煎劑治療組10只。治療組根據(jù)每鼠體重灌胃給予韭子水煎劑05ml（124g/kg）每日1次（2〕；老年組、青年組,灌服生理鹽水05ml/只，每日

4、1次。連續(xù)30d后，取小鼠眼球血，離心分離血清，凍存，待檢；小鼠斷髓處死，無(wú)菌取脾，于Hanks液中研碎，制成1X106/ml脾細(xì)胞懸液。14指標(biāo)檢測(cè)141T淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定將脾細(xì)胞懸液分別加入2個(gè)試管內(nèi)，1ml/管。第1管加入FITC標(biāo)記的抗小鼠CD3+單克隆抗體40卩1、第二管同時(shí)加入PE標(biāo)記的抗小鼠CD4+單克隆抗體和FITC標(biāo)記的抗小鼠CD8+單克隆抗體各20ul,作用30min后，加入1ml熒光洗液，2200r/min離心5min,去上清。加入1ml熒光保存液，流式細(xì)胞儀檢測(cè)106個(gè)細(xì)胞中各細(xì)胞亞群的百分率

5、。142血清IL2的檢測(cè)采用放射免疫法測(cè)定法，按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。143血清IgG檢測(cè)ELISA法，按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。15統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)各項(xiàng)指標(biāo)以x±s表示，通過(guò)SPSS100軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，組間進(jìn)行方差分析、q檢驗(yàn)。2結(jié)果21韭子水煎劑對(duì)老年小鼠T淋巴細(xì)胞亞群的影響見(jiàn)表lo老年組與青年組比較，CD4+亞群的比例、CD4+/CD8+的比值明顯降低，統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異（P<005）,說(shuō)明模型成功；應(yīng)用韭子水煎劑治療后，治療組CD4+亞群和CD4+/CD8+的比值與青年組比較無(wú)明顯差異（P>005）o表1韭子水煎劑

6、對(duì)衰老小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞亞群功能的影響（略）22韭子水煎劑對(duì)老年小鼠血清IL2和IgG含量的影響見(jiàn)表2。老年組與青年組比較，血清IL2和IgG水平明顯降低，具有顯著性差異(PV005),說(shuō)明模型成功；應(yīng)用韭子水煎劑治療后，治療組與青年組比較，血清IL2和IgG含量水平無(wú)明顯差異(P>005)o表2韭子水煎劑對(duì)小鼠血清IL2的影響(略)3討論在衰老個(gè)體，免疫器官出現(xiàn)萎縮,淋巴細(xì)胞總數(shù)下降,各亞群的功能也降低,CD4細(xì)胞和CD8細(xì)胞比例改變，表面的CD4受體和CD8受體的密度也下降；淋巴細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子如IL2的含量也

7、發(fā)生了改變，造成個(gè)體一生中第二個(gè)發(fā)病高峰〔3)。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)證明，韭子水煎劑能調(diào)整衰老個(gè)體T淋巴細(xì)胞亞群的失衡，起到了恢復(fù)細(xì)胞免疫功能的作用。并通過(guò)提高IL2和IgG水平，進(jìn)一步的調(diào)整了衰老小鼠細(xì)胞免疫功能和體液免疫功能。T細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞免疫，Th細(xì)胞(CD4+)和TS細(xì)胞(CD8+)的相互協(xié)調(diào)是調(diào)控的重要環(huán)節(jié)之一。CD4+/CD8+的比值反應(yīng)機(jī)體免疫內(nèi)環(huán)境是否穩(wěn)定的一個(gè)重要指標(biāo)，兩者平衡決定了免疫反應(yīng)的總效應(yīng)，若比值偏離正常值，說(shuō)明機(jī)體免疫功能失調(diào)〔4〕。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：老年小鼠CD4+細(xì)胞明顯降低,CD4+/CD8+

8、比值偏離正常水平,提示老年小鼠T細(xì)胞亞群的分布發(fā)生了變化，導(dǎo)致衰老小鼠細(xì)胞免疫功能低下。IL2的主要來(lái)源是Th細(xì)胞。主要促進(jìn)CTL和NK細(xì)胞增殖;促進(jìn)B細(xì)胞分化和增殖，B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)細(xì)胞增殖、抗原選擇、免疫球蛋白類型轉(zhuǎn)換和細(xì)胞表面某些標(biāo)志的改變以及體細(xì)胞突變，最終分化為漿細(xì)胞，產(chǎn)生高親和力抗體，介導(dǎo)體液免疫〔5〕。老年小鼠血清IL2和IgG較青