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《醫(yī)藥學(xué)醫(yī)學(xué)畢業(yè)論文 葛根素對(duì)肝硬化大鼠肝臟缺血再灌注損傷保護(hù)作用及其保護(hù)機(jī)制的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、湖南師范大學(xué)本科畢業(yè)論文考籍號(hào)：XXXXXXXXX姓名：XXX專業(yè)：醫(yī)藥學(xué)醫(yī)學(xué)論文題目：葛根素對(duì)肝硬化大鼠肝臟缺血再灌注損傷保護(hù)作用及其保護(hù)機(jī)制的研究指導(dǎo)老師：XXX二〇一一年十二月十日孫鵬，李五生，張楠，周小娜，劉金龍【摘要】目的觀察葛根素（Pue）對(duì)肝硬化大鼠肝臟缺血再灌注損傷是否具有保護(hù)作用，及其保護(hù)機(jī)制。方法首先建立大鼠肝硬化動(dòng)物模型，在此模型基礎(chǔ)上建立大鼠全肝缺血再灌注模型，比較用Pue預(yù)處理對(duì)缺血再灌注后，肝組織光鏡下的形態(tài)學(xué)改變；血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（
2、AST）和氧化亞氮（NO）、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性，及肝組織中NO、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、MDA含量、SOD活性變化。結(jié)果Pue預(yù)處理可使大鼠血清NO含量、肝組織NO含量及SOD活性明顯增高；而血清ALT、AST、MDA含量及肝組織TNF-α、MDA含量明顯降低；肝組織形態(tài)損傷也有所減輕。結(jié)論葛根素對(duì)肝硬化大鼠肝缺血再灌注損傷有顯著的保護(hù)作用，其主要機(jī)制是減少NO的降低、擴(kuò)張血管、改善微循環(huán)；清除氧自由基、減輕脂質(zhì)過(guò)氧化?！娟P(guān)鍵詞】葛根素；藥物預(yù)處理；缺血再灌注
3、損傷；肝硬化；大鼠現(xiàn)代肝膽外科中避免術(shù)中過(guò)多的出血，及時(shí)而有效地控制出血是手術(shù)成功的關(guān)鍵之一，阻斷肝血流技術(shù)在肝切除術(shù)中被廣泛應(yīng)用。許多肝臟疾病患者往往伴有肝硬化，其硬化肝臟對(duì)缺血的耐受性較差，長(zhǎng)時(shí)間阻斷入肝血流或術(shù)中大出血均可引起I/R損傷而加重處于代償邊緣的肝臟負(fù)擔(dān)，導(dǎo)致術(shù)后發(fā)生肝功能衰竭的可能性增大。因此尋找一種對(duì)肝硬化肝臟缺血及再灌注具有保護(hù)作用的藥物及方法具有重要臨床意義。以往采用的缺血預(yù)處理的方法有其缺陷并在臨床應(yīng)用中受到限制，故尋找一種藥物預(yù)處理來(lái)保護(hù)肝組織、減輕I/R損傷具有重要的
4、臨床價(jià)值。以往試驗(yàn)證明葛根素對(duì)正常肝臟及其他多個(gè)組織器官的I/R損傷具有良好的保護(hù)作用。本次試驗(yàn)通過(guò)葛根素預(yù)處理及缺血預(yù)處理對(duì)肝硬化大鼠肝臟I/R損傷保護(hù)作用的對(duì)比，探討葛根素是否對(duì)肝硬化大鼠肝臟的I/R損傷具有保護(hù)作用，并進(jìn)一步研究其作用機(jī)制。1材料與方法1.1動(dòng)物Wastar大鼠200只，體重200～220g，雌雄各半。1.2儀器與試劑奧林巴斯2700全自動(dòng)生化分析儀、DY89-1全自動(dòng)玻璃勻漿機(jī)、ArthosHTⅡ酶標(biāo)儀、SANYOMDF-330型-70℃低溫冰箱、HH21-600型恒溫水浴
5、箱、722分光光度計(jì)。CCl4，瀘州市鑫達(dá)化工有限公司提供，批號(hào)20050713；食用酒，瀘州市食品廠提供；葛根素注射液哈爾濱三聯(lián)藥業(yè)有限公司提供，批號(hào)050102B；SOD測(cè)定試劑盒，南京建成生物工程研究所提供，黃嘌呤氧化酶法測(cè)定，批號(hào)20050716；MDA測(cè)定試劑盒，南京建成生物工程研究所提供；TBA法測(cè)定，批號(hào)20050716；NO測(cè)定試劑盒，南京建成生物工程研究所提供，亞硝酸鹽法測(cè)定，批號(hào)20050719；TNF-α測(cè)定試劑盒，上海森雄科技實(shí)業(yè)有限公司，雙抗體夾心ABC-ELISA法測(cè)定
6、，批號(hào)20050719。1.3模型制備及試驗(yàn)方法1.3.1大鼠肝硬化模型制備經(jīng)大鼠腹部皮下注射CCl4大豆油溶液，前4次劑量為0.5ml/100g體重60%CCl4大豆油溶液，每隔3天1次，第4次后間隔7天注射第5次（可減少大鼠死亡率），第5次起劑量改為0.3ml/100g體重40%CCl4大豆油溶液，每隔3天1次，共13次；除注射CCl4當(dāng)日外，每日1次60%食用酒灌胃，乙醇劑量0.4g/100g體重；給予正常飲水；以高脂低蛋白飼料喂養(yǎng)。上述操作第6周末停止，繼續(xù)觀察至8周末大鼠肝硬化模型制備成
7、功并趨于穩(wěn)定。第2周起每周末行B超定位肝穿刺病理檢查，8周末挑選肝硬化程度趨于同一水平大鼠128只，繼續(xù)進(jìn)行下面試驗(yàn)。1.3.2動(dòng)物分組按隨機(jī)數(shù)字表法，將128只大鼠隨機(jī)分為4組，每組再分為4個(gè)時(shí)間亞組，每亞組8只大鼠。4組分別為A組：假手術(shù)組；B組：?jiǎn)渭內(nèi)毖俟嘧⒔M；C組：缺血預(yù)處理組；D組：葛根素預(yù)處理組。4個(gè)時(shí)間亞組分別為a亞組：缺血前時(shí)間亞組；b亞組：缺血再灌注后1h時(shí)間亞組；c亞組：缺血再灌注2h時(shí)間亞組；d亞組：缺血再灌注6h時(shí)間亞組。1.3.3缺血再灌注模型的制備術(shù)前禁食12h，自由
8、飲水。以戊巴比妥鈉3mg/100g體重腹腔注射麻醉后開腹并充分顯露肝門，游離門靜脈及肝固有動(dòng)脈，用無(wú)損傷動(dòng)脈鉗給予鉗夾，30min后移去動(dòng)脈鉗復(fù)灌60min，形成全肝I/R模型。C組于缺血前反復(fù)3次缺血5min再灌注5min形成缺血預(yù)處理模型及術(shù)前D組12h、1h分別2次分別給予Pue10mg/100g體重，其他各組給予等量生理鹽水，再行缺血30min，再灌注60min，D組形成葛根素預(yù)處理模型。1.3.4標(biāo)本采集B、C、D組動(dòng)物在再灌注0h（即缺血前）、再灌注1h、2h、6h后分
