陜北白絨山羊次級毛囊周期循環(huán)關鍵基因的篩選及LHX2與miR-144的功能驗證

陜北白絨山羊次級毛囊周期循環(huán)關鍵基因的篩選及LHX2與miR-144的功能驗證

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時間:2018-09-07

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1、分類號:S826.8學校代碼:10712UDC:636.39研究生學號:2012060123密級:公開2018屆攻讀博士學位研究生學位(畢業(yè))論文陜北白絨山羊次級毛囊周期循環(huán)關鍵基因的篩選及LHX2與miR-144的功能驗證學科專業(yè)動物遺傳育種與繁殖研究方向動物遺傳資源研究研究生周光現指導教師陳玉林教授合作教師王小龍副教授完成時間2018年4月中國陜西楊凌Classificationcode:S826.8Universitycode:10712UDC:636.39Postgraduatenumber:2012060123Confidentialitylevel:Publ

2、icDissertationforDoctorDegreeNorthwestA&FUniversityin2018IDENTIFICATIONOFCRITICALGENESINSECONDARYHAIRFOLLICLECYCLINGANDFUNCTIONALANALYSISOFLHX2ANDMIR-144INDERMALPAPILLACELLSOFSHANBEICASHMEREGOATMajor:AnimalGeneticsBreedingandReproductionResearchfield:AnimalGeneticResourcesNameofPostgradu

3、ate:ZhouGuangxianAdviser:Prof.ChenYulinCo-adviser:AssociateProf.WangXiaolongDateofsubmission:2018.4YanglingShaanxiChina本研究由國家自然基金面上項目(No.31372279);國家絨毛用羊產業(yè)技術體系(CARS-39-12);農業(yè)部轉基因生物新品種培育重大專項課題(2011ZX08008-002,2014ZX08008-002);陜西省國際科技合作項目(2014KW14-01)資助完成。ThisworkwassupportedbytheNationalN

4、aturalScienceFoundationofChina(31372279),ChinaAgricultureResearchSystem(CARS-39-12),theMajorProjectsforNewVarietiesofGeneticallyModifiedOrganismsofChina(2011ZX08008-002,2014ZX08008),andtheInternationalCooperationProjectsofShaanxiprovince(2014KW14-01).陜北白絨山羊次級毛囊周期循環(huán)關鍵基因的篩選及LHX2與miR-144的功能

5、驗證摘要絨山羊絨毛是由次級毛囊產生的,具有“軟黃金”的美譽,是高檔紡織材料,并且次級毛囊是研究毛發(fā)再生循環(huán)機制的模型。本文擬通過研究陜北白絨山羊次級毛囊發(fā)育循環(huán)周期的分子機理,進而為提高絨山羊絨毛質量、增加絨毛產量提供理論基礎,同時也為毛發(fā)再生的研究提供參考。本研究旨在精確定位次級毛囊周期循環(huán)的時間節(jié)點,篩選調控毛囊周期循環(huán)的關鍵基因,揭示非編碼基因在毛囊周期循環(huán)調控中的作用。主要研究內容包括以下幾個方面:1)通過顯微測量對陜北白絨山羊全年不同月份次級毛囊長度及其毛球部寬度進行量化,揭示次級毛囊周期循環(huán)的時間節(jié)點規(guī)律;2)通過聯合分析絨山羊次級毛囊發(fā)育三個典型階段(生長

6、期、退行期和休止期)的miRNA和mRNA數據,篩選出調控毛囊周期循環(huán)關鍵的miRNAs和mRNA,并構建了miRNA-mRNA調控關系網絡;3)通過“全轉錄組學”測序技術深入分析次級毛囊從“生長期”向“退行期”轉變的分子調控機制;4)利用雙熒光素酶檢測系統驗證了miR-144-3p與LHX2的靶向調控關系,并通過miR-144腺病毒感染毛乳頭細胞及構建LHX2-/-毛乳頭細胞株進行其基因功能研究。本研究取得主要研究結果如下:1、通過對陜北白絨山羊全年皮膚樣品中次級毛囊的形態(tài)顯微測量,發(fā)現長度變化為1070.16μm至2267.61μm,次級毛囊毛球部寬度變化為44.0

7、5μm至108.61μm;根據次級毛囊在皮膚中的長度和毛球部寬度的變化規(guī)律,得出陜北白絨山羊次級毛囊發(fā)育周期規(guī)律為:5月份到10月份為次級毛囊生長期(9~10月份,旺盛期),11月份到次年2月份為次級毛囊退行期,次年3月份到次年4月份為次級毛囊休止期。2、通過對陜北白絨山羊生長期、退行期和休止期皮膚樣品中miRNAs和mRNAs表達變化聯合分析,發(fā)現“生長期與退行期”比較有104個差異的miRNAs和683個差異mRNAs參與miRNA-mRNA網絡調控構建,共構建5694條靶向網絡調控關系;“生長期與退行期”比較有92個差異的miRNA

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