絨山羊皮膚毛囊生長(zhǎng)相關(guān)基因篩選方法的探索

絨山羊皮膚毛囊生長(zhǎng)相關(guān)基因篩選方法的探索

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1、分類(lèi)號(hào)S813.3學(xué)校代碼10129UDC636學(xué)號(hào)2009201016絨山羊皮膚毛囊生長(zhǎng)相關(guān)基因篩選方法的探索TheExplorationofMethodforScreeningGenesRelatedtoCashmereGoatShinandHairFollicleGrowth申請(qǐng)人:趙德超學(xué)科門(mén)類(lèi):農(nóng)學(xué)學(xué)科專(zhuān)業(yè):動(dòng)物遺傳育種與繁殖研究方向:分子遺傳學(xué)與絨山羊育種指導(dǎo)教師:張文廣教授論文提交日期:二〇一二年五月摘要絨山羊是優(yōu)秀的毛用山羊品種,其皮毛發(fā)育受多種因素調(diào)控。已證實(shí)褪黑激素能夠調(diào)控山羊皮膚毛囊的生長(zhǎng),

2、且多種基因和miRNA都參與皮膚毛囊的生長(zhǎng)發(fā)育。雖然關(guān)于皮膚毛囊發(fā)育的研究很多,但目前并沒(méi)有明確的方法來(lái)篩選與之相關(guān)的基因,本論文則是通過(guò)研究驗(yàn)證以褪黑激素和miRNA靶基因入手篩選相關(guān)基因的方法的可行性,同時(shí)檢測(cè)相關(guān)基因的表達(dá)情況,最終篩選到FGF5、KRTAP和GSDMA等重要的基因。本研究得到如下結(jié)論:1、建成信息量完備的絨山羊皮毛絨樣品庫(kù);2、利用褪黑激素和MTFP技術(shù)篩選與絨山羊皮膚毛囊發(fā)育相關(guān)基因的方法是可行的,并且操作簡(jiǎn)單方便。并且篩選到FGF5、KRTAP和GSDMA等重要的基因;3、埋植褪黑激素

3、顯著上調(diào)絨山羊皮膚FGF5的表達(dá),同時(shí)增強(qiáng)了FGF5與β-catenin、NTRK3、hairless等基因之間的相關(guān)性;褪黑激素對(duì)復(fù)雜組織和對(duì)單個(gè)細(xì)胞的作用不同;4、山羊中FGF5基因?qū)Ρ幻硇偷淖饔门c其他動(dòng)物不同;MAPK信號(hào)通路是受褪黑激素影響最大的通路;5、研究所選7個(gè)miRNA均參與皮膚和毛發(fā)的周期性發(fā)育,表達(dá)水平由高到低依次為miR-720>miR-205>miR-203>let7a>miR-199b>miR-200b>miR-25,各miRNA表達(dá)水平間顯著相關(guān)(R>0.91,P<0.0001);m

4、iRNA表達(dá)水平與靶基因個(gè)數(shù)間的相關(guān)關(guān)系為負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)為-0.43;6、7個(gè)miRNA在物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、皮毛結(jié)構(gòu)組成、基因印記、前體mRNA剪接、細(xì)胞凋亡、DNA甲基化、轉(zhuǎn)錄及延伸以及細(xì)胞結(jié)構(gòu)等方面發(fā)揮作用調(diào)控絨山羊皮膚毛囊的發(fā)育;另外經(jīng)分析我們還提出如下假設(shè):褪黑激素可能通過(guò)調(diào)節(jié)絨山羊皮膚中RORα來(lái)上調(diào)FGF5的表達(dá),F(xiàn)GF5可能通過(guò)正調(diào)控β-catenin、NTRK3、hairless和Wnt10b,同時(shí)抑制MSX2和BMP2等的功能,進(jìn)而促進(jìn)絨毛的生長(zhǎng)??傊狙芯繛榻窈蠼q山羊的研究提供了物質(zhì)和理論基礎(chǔ),同

5、時(shí)也為今后的研究提供了行的方法和思路。關(guān)鍵詞:絨山羊;樣品庫(kù);皮膚毛囊發(fā)育;褪黑激素;MTFP;方法探索TheExplorationofMethodforScreeningGenesRelatedtoCashmereGoatShinandHairFollicleGrowthAbstractCashmeregoatisanexcellentsortofgoatusedforhair,whichgrowthofskinandhairisregulatedbymanykindsoffactors.Ithasbeenco

6、nfirmedthatmelatonincanregulatethegrowthofthegoats’hairfollicleonskin,moreovermanygenesandmiRNAsallinvolveinthegrowingdevelopmentofthehairfollicleonskin.Althoughtherearelotsofresearchesonthedevelopmentofthehairfollicleonskin,noclearmethodiscarriedontofilterth

7、erelativegenes.ThisexperimentisconductedtoverifythefeasibilityofthemethodwhichstarttobeginwithmelatoninandmiRNAinordertofiltertherelativegenes,anddetecttheexpressionoftheserelativegenes,atlastsomeimportantgenes,suchasFGF5、KRTAPandGSDMAwerefiltered.Thefollowin

8、gconclusionswereobtainedfromthestudy.1、Establishingasamplebankofdownproducinggoats’skin,hairandcashmerewhichinformationcontentiscomplete.2、ThemethodusingthemelatoninandMTFPtofilterthegene

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