資源描述：
《牛初乳中乳鐵蛋白的分離和純化》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、維普資訊http://www.cqvip.com農(nóng)品，鹽斜枝ScienceandTechnologyofFoodIndustry三藝技◆◇徐麗萍(哈爾濱商業(yè)大學(xué)食品工程學(xué)院，黑龍江哈爾濱150076)擅要：利用超濾、鹽析和層析三種方法，采用單因素實(shí)驗(yàn)和正交1材料與方法實(shí)驗(yàn)對酸牛乳清中的乳鐵蛋白進(jìn)行分離和純化，得到鹽1．1材料與設(shè)備析的最佳條件為：先以50％硫酸銨除去雜蛋白，然后在3O。C，pH8．5，8O％硫酸銨進(jìn)行鹽析。用CM—SephadexC一牛初乳國家乳品工程技術(shù)中心提供；標(biāo)準(zhǔn)乳鐵100進(jìn)行層析，進(jìn)樣量為2mL，洗脫液pH為7．4時(shí)可以得蛋白電泳級，SigmaCh
2、emicalCo．；CMSephadexC一到乳鐵蛋白純品。sDs—PAGE凝膠電泳結(jié)果表明，牛初乳中乳鐵蛋白的純度為92％，分子量大約為78000±100PharmaciaBiotech；火棉膠，磷酸二氫鈉一磷酸氫2000Da。二鈉緩沖液。關(guān)鍵啊：乳鐵蛋白，牛初乳，分離，純化，分子量電泳儀(ZY500)北京市君意機(jī)電技術(shù)公司制Abstract：Lactoferrinincolostrumwasseperatedandpurified造；數(shù)控計(jì)滴自動部分收集器(SBS一100)上海滬西bythecombinationofsuperfiltration，salting—ou
3、tandchromatography．a(chǎn)ndtheoptimalisolatingconditons分析儀器廠；小型離心機(jī)(LD5—10)北京醫(yī)用離心wereobtainedbysinglefactorando~hogonal機(jī)廠；722光柵分光光度計(jì)上海精密科學(xué)儀器有限experiments，whichwere：precipitatetheimpureproteinby50％(NH404，saltoutat30。C，pH85公司；板式超濾器北京醫(yī)用設(shè)備廠。with80％(NH4)2SO4，andeluteatpH7．4，andthepureIactoferrinwaso
4、btainedbvCM—SephadexC一1．2實(shí)驗(yàn)方法100．Theresultfr0mSDS-pAGEshowedthatthe1．2．1乳鐵蛋白粗品的制備purityofthelactoferrinwas92％．a(chǎn)ndthemolecularweightwasabout78000~2000Da．通過超濾法制備乳鐵蛋白的粗品，實(shí)驗(yàn)條件如Keywords：Iactoferrin；colostrum：seperation：purification；下，實(shí)驗(yàn)?zāi)ぃ篊A膜(醋酸纖維素)；超濾裝置：板式超molecularweight濾器；工作壓力：0．15MPa；料液溫度：4
5、0。C。取100OraL中圖分類號：TS252．42文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B牛初乳，先用截流分子量為100000Da的超濾膜進(jìn)行文章編號：l002—0306(2007)03—0170—03首次超濾，然后用截流分子量為50000Da的超濾膜對濾過液進(jìn)行第二次超濾，最后用截流分子量為乳鐵蛋白(Laetorerrin，Lf)是一種鐵結(jié)合糖蛋白，10000Da的超濾膜進(jìn)行濃縮，即得乳鐵蛋白粗品。1．2．2乳鐵蛋白的分離廣泛存在于乳汁、唾液、淚液等外分泌液或血漿、中性粒細(xì)胞中I”。Lf是一種具有多種生物學(xué)功能的蛋白1．2．2．1雜蛋白的分離分別取試管，準(zhǔn)確稱量11份質(zhì)，它能夠參與鐵的轉(zhuǎn)運(yùn)，對
6、腸中的鐵離子具有增溶含乳鐵蛋白粗品10g，加入適量磷酸鹽緩沖液作用，而且具有廣譜抗菌、抗氧化、抗癌、調(diào)節(jié)免疫系(pH8．5)，依據(jù)計(jì)算結(jié)果，緩慢滴加飽和(NH)2sO，使統(tǒng)等功能·31。由于乳鐵蛋白具有廣泛而獨(dú)特的生物上述各管中硫酸銨濃度分別達(dá)到30％，35％，40％，45％，50％，55％，60％，65％，70％，75％和8O％。于室學(xué)功能和理化特性，作為食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域的新興成員，正在受到越來越多的關(guān)注。隨著乳鐵蛋白作用、溫下靜置過夜，10000r／min下離心分離30min，將沉功能、機(jī)制的不斷闡明和開發(fā)應(yīng)用范圍的不斷擴(kuò)大，淀物用pH7．4的磷酸鹽緩沖液溶解，定容至
7、25mL，它在治療、營養(yǎng)補(bǔ)充、食品等方面將有著廣闊的應(yīng)用分別測定其在475nm處的OD值。前景，因此，非常具有開發(fā)和研究價(jià)值。本文的目的1．2．2．2乳鐵蛋白分離條件的確定根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)得出的最適硫酸銨、溫度和pH，對鹽析工藝參數(shù)采旨在研究從酸牛乳清中分離、純化乳鐵蛋白的最佳用IJ9(3)表進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，將沉淀收集，溶解，定容，條件，并對其進(jìn)行定性和定量分析。測定其在475nm處的OD值，方法同前。因素水平表見表1。收稿日期：2006—12-181．2．2．3驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)根據(jù)正交實(shí)驗(yàn)確定的鹽析的最佳作者簡介：徐麗萍，女，碩士，副教
