螺旋藻藻藍(lán)蛋白的規(guī)?；崛『蜕V純化技術(shù)研究進(jìn)展

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1、螺旋藻藻藍(lán)蛋白的規(guī)?；崛『蜕V純化技術(shù)研究進(jìn)展吳蕾，龐廣昌，陳慶森(天津市食品生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津商業(yè)大學(xué)生物工程系，天津300134)摘要：藻藍(lán)蛋白在食品、化妝品及醫(yī)學(xué)研究等領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用，螺旋藻中藻藍(lán)蛋白的含量豐富。本文綜述了國內(nèi)外螺旋藻中藻藍(lán)蛋白的規(guī)模化提取和純化技術(shù)的研究進(jìn)展，總結(jié)了螺旋藻藻藍(lán)蛋白生產(chǎn)存在的問題，展望了藻藍(lán)蛋白規(guī)模化生產(chǎn)的前景。關(guān)鍵詞：螺旋藻；藻藍(lán)蛋白；規(guī)模化；提取；純化Progress0fLa曙e-sacleEx臼．a(chǎn)ction鋤dPurificationTecllIlolog)，ofPhycoc

2、y孤infrc’mSpirIlhnaWUL商，PANGGu齟g—ch柚g，CHENQ．mg-鼢CrianjinKeyL盈b0憷自。巧ofFbod鋤dBio鼢hn0109y，n疆，ar鋤即tofBio％ginoering，Ti刪inUniv鋤塒0fcommerce，Ti觚jin300134，ClliIla)Abs岫lct：Ph煳觚inh硒晰deapplica曲姍infood，cosme啦sandmedidne峨狐．111e∞arelarge鋤眥tph煳aninin印i砒．T船revic啊givcs吐leprl睜：essofex昀cd

3、∞andp面缸撕∞technolo百骼ofphyoocy紐．m丘om印f州掃l如，舢瑚朧izesnlepmbleIminphy00cyaIlinprodllcdon舐眥印f，硼f，I如andl00bf湘礬tothefIlnl∞oflaI驢scalepfod咖of曲刪anin．Keywords：印f礎(chǔ)Z訊婦；phycocyanin；large-scalc；cxtr氍tion；purification中圖分類號：Ts201．2l文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1002，6630(2008)04-0461．03螺旋藻是極易大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)的微藻

4、類之一川。藻藍(lán)蛋白是螺旋藻細(xì)胞中重要的光合作用天然色素。藻藍(lán)蛋白可作為一種天然色素，色調(diào)為美麗的天藍(lán)色，可用于食品添加劑和化妝品中。同時(shí)還具有提高人體免疫力，促進(jìn)動物血細(xì)胞再生功能?。此外，藻藍(lán)蛋白還具有強(qiáng)烈的熒光性，在分子生物學(xué)、免疫學(xué)和細(xì)胞學(xué)等方面的研究中【3】。螺旋藻中的藻藍(lán)蛋白的應(yīng)用前景十分可觀。但由于螺旋藻藻藍(lán)蛋白的提取工藝相對復(fù)雜，穩(wěn)定性較低，限制了螺旋藻藻藍(lán)蛋白的工業(yè)化生產(chǎn)【·】。因此對螺旋藻中藻藍(lán)蛋白的規(guī)模化提取和純化的研究一直是人們研究的焦點(diǎn)，其相應(yīng)的技術(shù)也在不斷創(chuàng)新和改進(jìn)。本文就螺旋藻中的藻藍(lán)蛋白的提取和純化的

5、方面的技術(shù)進(jìn)行了綜述，以期對藻藍(lán)蛋白的深開發(fā)和規(guī)?；a(chǎn)有一定幫助。螺旋藻藻藍(lán)蛋白的提取和純化一般包括兩個階段，一個階段是粗提，第二個階段是純化精制階段。1藻藍(lán)蛋白的粗提取技術(shù)藻藍(lán)蛋白的粗提取過程主要包括細(xì)胞破碎和鹽析沉淀。其中細(xì)胞破碎是關(guān)鍵，細(xì)胞破碎方法的選擇是非常重要的。目前螺旋藻細(xì)胞破碎方法，可分為機(jī)械法和非機(jī)械法兩大類。機(jī)械法中常用的有：超聲破碎法，珠磨法、高壓均質(zhì)法。非機(jī)械法中常用的有酶溶法，化學(xué)滲透法和反復(fù)凍融法。在機(jī)械法中，超聲破碎法常用于實(shí)驗(yàn)室研究，處理量較小。而珠磨法和高壓均質(zhì)法更適于螺旋藻的規(guī)?；扑椤７菣C(jī)械法

6、中的酶溶法和化學(xué)滲透法是目前實(shí)驗(yàn)室研究也相當(dāng)活躍的方法。CamenSS【5】等人采用溶菌酶對螺旋藻的藻膽蛋白進(jìn)行了粗提。如林衛(wèi)紅等f6】采用十二烷基苯磺酸鈉對鈍頂螺旋藻進(jìn)行粗提。而反復(fù)凍融法更適于規(guī)?；?xì)胞破碎。彭衛(wèi)民等【7】、韋萍等【s睬用反復(fù)凍融的方法，然后通過離心收集上清液，得到大量的藻膽蛋白的粗品。由于螺旋藻屬單細(xì)胞微生物，細(xì)胞壁較厚，葉海輝等【9】還采用溶菌酶和高壓勻質(zhì)法結(jié)合作用的方法，得到了較好的螺旋藻細(xì)胞的破碎效果。收稿日期：2007．04．02基金項(xiàng)目：天津市科技攻關(guān)計(jì)劃重點(diǎn)專項(xiàng)項(xiàng)目(06YFGzNc04200)作

7、者簡介：吳蕾(1968．)，女，副教授，博士，研究方向?yàn)樯镂镔|(zhì)分離純化。E-mail：wulei@tjcu．edu．cn46220D8，’白f．29，ⅣD．DJ食品科學(xué)※專題論述鹽析沉淀都普遍采用硫酸銨沉淀的方法對離心后的上清液進(jìn)行沉淀。2藻藍(lán)蛋白的色譜純化技術(shù)與藻藍(lán)蛋白粗提技術(shù)相比，它的純化技術(shù)，特別是規(guī)模化純化技術(shù)更為不成熟。目前這方面的研究比較。活躍。在藻藍(lán)蛋白的規(guī)?；兓夹g(shù)中，研究最多的是色譜純化技術(shù)。因?yàn)樯V技術(shù)是當(dāng)今最有效的蛋白質(zhì)純化技術(shù)，而且其易于放大和規(guī)?；a(chǎn)。目前常用于純化藻藍(lán)蛋白的色譜純化技術(shù)主要有以下幾

8、種。2．1離子交換色譜(ion．exchangcchr0姒tography)和體積排組色譜離子交換色譜是根據(jù)荷電溶質(zhì)與離子交換劑之間靜電相互作用力的差別進(jìn)行溶質(zhì)分離的。由于藻膽蛋白帶負(fù)電，故研究者多采用陰離子交換色譜對其進(jìn)行純化。而體積排阻色譜是根