第三章生物制品課件

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1、第三章滅活劑、保護(hù)劑、與免疫增強(qiáng)劑第一節(jié)滅活劑一、滅活與滅活劑（一）滅活：殺死病原微生物，但不影響免疫原性；其次是破壞血清的補(bǔ)體，以免干擾血清學(xué)反應(yīng)結(jié)果。滅活劑：滅活微生物的化學(xué)試劑。滅活方法：物理滅活：加熱、及射線滅活微生物，此方法免疫原性易破壞，現(xiàn)很少使用（血清56°C半小時(shí)滅活補(bǔ)體用此方法）?；瘜W(xué)滅活：用化學(xué)試劑將病原微生物殺死，此方法經(jīng)常使用。二、常用的滅活劑種類和原理（一）甲醛：是最古老常用的滅活劑，現(xiàn)在我國用的26種滅活疫苗，均以甲醛為滅活劑。性質(zhì)：甲醛為刺鼻的氣體，水溶液叫福爾馬林，濃度為36%-40%。10°C以下易聚合成三聚甲

2、醛或多聚甲醛，為白色沉淀。原理：甲醛的醛基起滅活作用，可使蛋白質(zhì)的氨基→羥甲基胺羧基→亞甲基二醇單酯羥基→羥甲基酚巰基→硫代亞甲基二醇濃度：需氧菌甲醛濃度到0、1%--0、2%.厭氧菌0、4%--0、8%.病毒0、05%--0、4%.原則是濃度低，時(shí)間短，溫度低可以滅活細(xì)菌，盡量減少破壞抗原（通常加入量，以福爾馬林量計(jì)算，不再折合甲醛濃度）。（二）烷化劑：將烷基引入，形成烷基取代物，使微生物變性死亡。原理：主要破壞病毒的核酸，作用于A：G堿基，引起DNA單鏈斷裂或雙鏈鉸連。此類常用于病毒滅活，種類有AEI—N-乙酰乙烯亞胺，加入濃度到0、05%

3、。BEI—二乙烯亞胺，濃度0、02%；EEI—2—乙基乙烯亞胺，GDA—縮水甘油醛。滅活后加硫代硫酸鈉可終止滅活，防止抗原損失。保存：AEI，0--4°C一年，--20°C二年；BEI0--4°C保存一個(gè)月。（三）苯酚（石碳酸）人類用的第一個(gè)消毒藥，具有特殊氣味的無色結(jié)晶，易潮解成水溶液，與光、氧后顏色變紫色。原理：蛋白質(zhì)變性以及抑制氧化脫氫酶，芽孢和病毒對(duì)它抵抗力強(qiáng)。滅活濃度：抑菌作用是0、2—0、5%（血清防腐），殺菌是1%，殺葡萄球菌是3%。消毒常用它的衍生物，來蘇兒（甲酚皂）3—5%濃度，特殊氣味，覆蓋其他氣味，也是醫(yī)院常用的。(Jos

4、ephLister,1827~1912)首創(chuàng)用石炭酸噴灑手術(shù)室和煮沸手術(shù)用具以防術(shù)后感染，為防腐、消毒，以及無菌操作奠定了基礎(chǔ)。（四）結(jié)晶紫（龍膽紫），也叫紫藥水，堿性染料，也叫甲紫或甲基青蓮，化學(xué)名，六甲基副玫瑰苯胺。原理：堿性陽離子可結(jié)合細(xì)菌陰離子羧基；干擾細(xì)胞壁粘肽合成；常作用于革蘭氏陽性菌。生物制品的應(yīng)用有豬瘟結(jié)晶紫疫苗，雞白痢染色抗原。（五）β—丙酰內(nèi)酯良好病毒滅活劑，性狀是無色有氣味液體，易潮解和高溫失效，5°C密封保存好，現(xiàn)主要用于狂犬滅活苗。三、影響滅活作用的因素（一）藥物的特異性：酚類不能殺滅真菌和病毒，陽離子的結(jié)晶紫，主要作

5、用于G+菌。（二）微生物的種類和特異性：G+菌和G-菌對(duì)藥物敏感不一樣，繁殖體和芽孢對(duì)藥物敏感也不一樣。（三）藥物濃度：濃度愈大，滅活越快，抗原也損失大；但是，95%酒精沒75%酒精殺滅細(xì)菌好。（四）溫度：溫度與滅活成正比，每升高10度，金屬類殺菌作用增加2—5倍。但高溫超過40°C，抗原也損失大。（五）時(shí)間：滅活時(shí)間與溫度和濃度成反比，即滅活殺菌長，溫度舊低，濃度也低，就可以殺滅細(xì)菌。（六）pH：堿性快，酸性慢，酸性環(huán)境對(duì)抗原保護(hù)好。（七）有機(jī)物存在：環(huán)境的有機(jī)物減低滅活的效果，微生物也是有機(jī)物。四、滅活疫苗時(shí)的注意事項(xiàng)2人參加滅活，注意藥品

6、名和量，滅活后標(biāo)記。37°C滅活一天后，接種適宜培養(yǎng)基—無菌檢查。動(dòng)物試驗(yàn)，滅活苗制成后，注射小白鼠0、2ml，兩只，觀察3天。使用試驗(yàn)：用戶可先注射1-2頭，觀察1—2天，看有無過敏，應(yīng)激等反應(yīng)，證明安全，才全群使用。思考題：什么叫滅活和滅火劑？滅活劑的種類有哪些？影響滅活的因素是什么？滅活的注意事項(xiàng)有哪些？第二節(jié)保護(hù)劑保護(hù)劑也叫穩(wěn)定劑，是防止微生物在凍干過程中受到破壞。按作用原理分兩類：滲透劑：能滲入細(xì)胞，使胞內(nèi)外滲透壓平衡，防止慢凍時(shí)損傷細(xì)胞。有甘油，蔗糖，二甲基亞砜。非滲透劑：防止細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)交換在速凍時(shí)保護(hù)細(xì)胞。有蛋白質(zhì)，聚乙烯吡咯酮

7、。按保護(hù)劑分子量分類：低分子量保護(hù)劑：糖、氨基酸類。高分子量保護(hù)劑：脫脂牛奶、明膠。按化學(xué)性質(zhì)分類：復(fù)合物：脫脂牛奶，血清。糖類：蔗糖、乳糖。鹽類：乳酸鈣、谷氨酸鈉。醇類：甘油，山梨醇，甘露醇。酸類：檸檬酸，氨基酸。聚合物：葡聚糖，聚乙烯吡咯酮。一、凍干保護(hù)劑的組成和作用按組成將保護(hù)劑分為營養(yǎng)液，賦形劑，抗氧化劑。營養(yǎng)液：使受損細(xì)胞修復(fù)：脫脂牛奶，蛋白質(zhì)，氨基酸，糖類。賦形劑：骨架作用，制品形成網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)，易溶解----蔗糖，乳糖?？寡趸瘎罕Ｗo(hù)酶類，防止氧化—VC，VE，硫代硫酸鈉。保護(hù)劑的作用：防止細(xì)胞內(nèi)水結(jié)晶和細(xì)胞失去水分。平衡細(xì)胞內(nèi)外滲透

8、壓，防止細(xì)胞破裂。助于細(xì)胞修復(fù)以及凍干后復(fù)蘇。二、影響保護(hù)劑效果的因素判斷保護(hù)劑的好壞，從凍干后的存活率，以及生物制品的保質(zhì)期研究。然后對(duì)不同物質(zhì)篩選