雪蓮果塊莖中綠原酸及總酚酸的含量測(cè)定

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1、·230·JournalofChineseMedicinalMaterials第32卷第2期2009年2月雪蓮果塊莖中綠原酸及總酚酸的含量測(cè)定3石晉,欒雨時(shí),趙寧(大連理工大學(xué)環(huán)境與生命學(xué)院,遼寧大連116023)摘要目的:測(cè)定雪蓮果塊莖中有效成分綠原酸及總酚酸的含量。方法:綠原酸的測(cè)定分析采用高效液相色TM譜法。色譜柱:WatersSunFireC18(150mm×416mm,5μm);流動(dòng)相:甲醇21%乙酸水溶液,二元梯度程序洗脫;流速:018mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):326nm?？偡铀岬臏y(cè)定采用分光光度法,以沒食子酸為對(duì)照品,在7

2、25nm波長(zhǎng)處進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果:綠原酸含量在014～418μg范圍時(shí)與峰面積呈良好線性關(guān)系(r=019990),加樣回收率為97128%;RSD為1142%?？偡铀岬木€性范圍為0102～0110mg/mL(r=019990),加樣回收率為96181%;RSD為1164%。結(jié)論:方法靈敏準(zhǔn)確,適用于雪蓮果塊莖中綠原酸及總酚酸的測(cè)定。關(guān)鍵詞HPLC;雪蓮果;綠原酸;總酚酸中圖分類號(hào):R28411/R28412文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):100124454(2009)0220230203雪蓮果(Smallanthussonchifolius)系菊

3、科向日(B),二元梯度洗脫程序(0～5min內(nèi),A的濃度為葵屬多年生草本植物,又稱雪蓮薯、雪蓮子、亞龍果、23%,5～12min內(nèi),A的濃度降為18%,12～30min亞貢,是一種純生態(tài)型地下水果。其食用部位為地內(nèi),A的濃度降為10%),流速018mL/min,檢測(cè)波下塊莖,味甘,性平,有降壓降糖、保護(hù)肝臟、滋陰補(bǔ)長(zhǎng)326nm。此色譜條件下,綠原酸與其他組分峰分〔1〕腎、增強(qiáng)機(jī)體免疫力等作用,并表現(xiàn)出很高的抗離良好,見圖1?！?〕〔3〕氧化性及自由基清除能力。Simonovska等曾用TLC法將雪蓮果萃取物及酸解產(chǎn)物進(jìn)行分離,再通過H

4、PLC/MS分析鑒定,發(fā)現(xiàn)其中含有綠原酸、咖啡〔4〕酸、阿魏酸等多種酚酸。Takenaka等也從中分離并鑒定了5種水溶性酚酸衍生物,分別為綠原酸及〔5〕四種咖啡酸二聚體。Yan等在測(cè)定雪蓮果抗氧化能力的同時(shí),用NMR和MS鑒定了其中主要的酚酸,確定其為綠原酸。探索簡(jiǎn)便易行的測(cè)定方法、掌握雪蓮果中各部位的綠原酸及總酚酸的含量,對(duì)其藥用質(zhì)量評(píng)價(jià)及更好的開發(fā)利用這一資源具有重要的意義。1儀器與材料Waters600高效液相色譜儀:2487雙波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器;600E四元泵;Empower色譜工作站;JASCOV2560分光光度儀;FA1604

5、s電子天平;Millipore超純水儀。雪蓮果由大連旅順園藝試驗(yàn)場(chǎng)提供并鑒定。綠原酸及沒食子酸對(duì)照品購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所;甲醇、冰醋酸為色譜純;其余試劑均為分析純。圖1對(duì)照品及供試品的HPLC色譜圖A1對(duì)照品B1雪蓮果樣品11綠原酸2方法與結(jié)果211綠原酸的HPLC測(cè)定21112線性關(guān)系考察:精密稱取綠原酸對(duì)照品1021111色譜分析條件:色譜柱:十八烷基硅烷鍵合mg,用80%的甲醇水溶液(含1%鹽酸)溶解并定容TM硅膠為填充劑,WatersSunFireC18(150mm×416至10mL,搖勻,得對(duì)照品儲(chǔ)備液,再將其分別稀釋

6、mm,5μm),流動(dòng)相為甲醇(A),1%乙酸水溶液至20、40、80、180、240μg/mL。取上述溶液20μL收稿日期:2008208212作者簡(jiǎn)介:石晉(19832),女,碩士研究生,主要從事植物化學(xué)成分分析方面的研究。3通訊作者:欒雨時(shí),E2mail:luanyushi@yahoo1com1cn。JournalofChineseMedicinalMaterials第32卷第2期2009年2月·231·注入高效液相色譜儀,按色譜條件測(cè)定色譜峰面0104、0106、0108、0110mg/mL,按“21211”項(xiàng)下的方積,以峰面積

7、為縱坐標(biāo)(Y),對(duì)照品進(jìn)樣量(μg)為法測(cè)定吸光度。以吸光度A為縱坐標(biāo)、對(duì)照品溶液橫坐標(biāo)(X),進(jìn)行分析,得線性回歸方程:Y=1171×濃度C為橫坐標(biāo),得回歸方程A=6157C(r=106X(r=019990)。綠原酸對(duì)照品在014～418μg019990)。表明總酚酸含量在0102～0110μg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。范圍內(nèi),呈現(xiàn)良好線性關(guān)系。21113供試品溶液的制備:取雪蓮果塊莖經(jīng)自然21213精密度試驗(yàn):取沒食子酸對(duì)照品溶液50風(fēng)干后粉碎,稱取1g,置于100mL三角瓶中,用μL,按方法“21211”項(xiàng)下測(cè)定5次

8、,吸光度A的RSD80%的甲醇水溶液(含1%鹽酸)50mL超聲浸提3為1125%,表明精密度良好。次,每次30min。5000r/min離心后45℃下減壓旋21214穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一供試品溶液按上述方轉(zhuǎn)蒸干。殘留物溶于