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《瀘州山銀花中綠原酸和總綠原酸的含量測定 》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、瀘州山銀花中綠原酸和總綠原酸的含量測定彭鋒王勇王河川陳君馮文宇何兵【摘要】 目的建立瀘州山銀花中綠原酸和總綠原酸的含量測定方法。方法采用高效液相色譜（HPLC）法測定綠原酸，并采用UV法測定總綠原酸。色譜柱為DikmaKromasilC18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動相為乙腈-0.4％磷酸溶液（12∶88）；流速0.8ml·min-1；檢測波長326nm；柱溫30℃；進(jìn)樣量10μl。結(jié)果綠原酸在0.16～1.6μg范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系（r＝0.9999），平均回收率為98.75％，RSD為0.29％。結(jié)論該方法操作簡便、快速、有效
2、、靈敏、準(zhǔn)確、具有良好的重復(fù)性和回收率，可作為山銀花中綠原酸和總綠原酸的含量測定方法?！娟P(guān)鍵詞】高效液相色譜山銀花總綠原酸高效液相色譜 Abstract：ObjectiveToestablishthemethodforcontentdeterminationofChlorogenicAcidandtotalChlorogenicAcidinFlosLonicerae.MethodsThecontentofchlorogenicacidaKromasilC18column（250mm×4.6mm，5μm）．Themobilephasel·min-1，
3、thedetection，thecolumntemperatureplesizeethodissimple，rapid，efficient，sensitive，accurateandethodforthispreparation． KeyacranthoidesHand.-Mazz.，紅腺忍冬LonicerahypoglaucaMiq.或華南忍冬LoniceraconfuseDC.的干燥花蕾或帶初開的花，具有抗菌消炎、清熱解毒、涼散風(fēng)熱的功效，主要用于治療癰腫疔瘡、喉痹、丹毒、熱毒血痢、風(fēng)熱感冒、溫?zé)岚l(fā)病等疾病〔1〕。其主要有效成分為有機(jī)酸類（綠原
4、酸和異綠原酸）。綠原酸含量高低是山銀花內(nèi)在質(zhì)量的標(biāo)志，與藥用價值和臨床療效密切相關(guān)。山銀花分布廣泛，而產(chǎn)地不同，綠原酸的含量存在著較大的差異〔2~3〕。四川瀘州山銀花作為川銀花的一個重要來源，其綠原酸含量測定尚未見報道。為全面了解本地區(qū)山銀花綠原酸的變化及差異，我們采用HPLC首次對瀘州四縣不同產(chǎn)區(qū)采摘的山銀花中所含的綠原酸和總綠原酸進(jìn)行了含量測定，為開發(fā)利用本地區(qū)的山銀花提供科學(xué)依據(jù)。 1儀器與試藥 1.1儀器戴安高效液相色譜儀（P680A四元低壓梯度泵，PDA-100二極管陣列檢測器，TCC-100柱溫箱，Chromeleon色譜工作站）；瑞
5、士Precisa電子天平（XR205SM-DR）；CQX25-06超聲波清洗器（上海必能信超聲有限公司，功率250azz.?！ ?方法與結(jié)果 2.1綠原酸的含量測定 2.1.1色譜條件色譜柱為DikmaKromasilC18（250mm×4.6mm，5μm），流動相為乙腈-0.4％磷酸溶液（12∶88），流速0.8ml/min，柱溫30℃，檢測波長326nm?！ ?.1.2對照品溶液的制備取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥至恒重的綠原酸對照品4.0mg，精密稱定，置50ml棕色量瓶中，加50％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（每毫升含綠原酸80μg）?！ ?
6、.1.3供試品溶液的制備取山銀花適量，50℃烘約5h，粉碎為細(xì)粉（過4號篩）。取約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50％甲醇50ml，稱定重量，超聲處理45min，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，過濾，精密取續(xù)濾液5ml，置25ml棕色量瓶中，加50％甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得?！ ?.1.4系統(tǒng)適應(yīng)性實驗分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果見圖1。從圖1中可見，綠原酸的保留時間約為10min，綠原酸峰與其前后色譜峰的分離度分別為12.60，3.34，均大于1.5，拖尾因子
7、為1.03，理論塔板數(shù)以綠原酸峰計為15417，綠原酸峰純度因子為1000。 圖1山銀花HPLC色譜圖（略） 2.1.5線性關(guān)系考察分別精密吸取綠原酸對照品溶液（80μg·ml-1）2，4，6，8，10，15，20μl，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積，以峰面積A對進(jìn)樣量C（μg）進(jìn)行回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：A＝34.8152C+0.2685，r＝0.9999。結(jié)果表明，綠原酸在0.16～1.6μg范圍內(nèi)，峰面積與進(jìn)樣量有良好的線性關(guān)系?！ ?.1.6精密度實驗精密吸取同一供試品溶液10μl，按上述色譜條件連續(xù)進(jìn)樣5次，測得綠原酸峰面積RS
8、D為0.46％。表明儀器精密度良好?！ ?.1.7重復(fù)性實驗取同一批山銀花（批號050701），按供試品溶液
