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《瀘州山銀花中綠原酸和總綠原酸的含量測定》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、瀘州山銀花中綠原酸和總綠原酸的含量測定作者：彭鋒王勇王河川陳君馮文宇何兵【摘要】 目的建立瀘州山銀花中綠原酸和總綠原酸的含量測定方法。方法采用高效液相色譜（HPLC）法測定綠原酸，并采用UV法測定總綠原酸。色譜柱為DikmaKromasilC18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動相為乙腈-0.4％磷酸溶液（12∶88）；流速0.8ml·min-1；檢測波長326nm；柱溫30℃；進樣量10μl。結(jié)果綠原酸在0.16～1.6μg范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系（r＝0.9999），平均回收率為98.75％，RSD為0.29％。結(jié)論該方法操作簡便、快速、有效、靈敏、準確、具
2、有良好的重復性和回收率，可作為山銀花中綠原酸和總綠原酸的含量測定方法?！娟P(guān)鍵詞】高效液相色譜山銀花總綠原酸高效液相色譜 Abstract：ObjectiveToestablishthemethodforcontentdeterminationofChlorogenicAcidandtotalChlorogenicAcidinFlosLonicerae.MethodsThecontentofchlorogenicacidaKromasilC18column（250mm×4.6mm，5μm）．Themobilephasel·min-1，thedetection，thecol
3、umntemperatureplesizeethodissimple，rapid，efficient，sensitive，accurateandethodforthispreparation． KeyacranthoidesHand.-Mazz.，紅腺忍冬LonicerahypoglaucaMiq.或華南忍冬LoniceraconfuseDC.的干燥花蕾或帶初開的花，具有抗菌消炎、清熱解毒、涼散風熱的功效，主要用于治療癰腫疔瘡、喉痹、丹毒、熱毒血痢、風熱感冒、溫熱發(fā)病等疾?。?］。其主要有效成分為有機酸類（綠原酸和異綠原酸）。綠原酸含量高低是山銀花內(nèi)在質(zhì)量的標志，與藥用
4、價值和臨床療效密切相關(guān)。山銀花分布廣泛，而產(chǎn)地不同，綠原酸的含量存在著較大的差異［2~3］。四川瀘州山銀花作為川銀花的一個重要來源，其綠原酸含量測定尚未見報道。為全面了解本地區(qū)山銀花綠原酸的變化及差異，我們采用HPLC首次對瀘州四縣不同產(chǎn)區(qū)采摘的山銀花中所含的綠原酸和總綠原酸進行了含量測定，為開發(fā)利用本地區(qū)的山銀花提供科學依據(jù)?！ ?儀器與試藥 1.1儀器戴安高效液相色譜儀（P680A四元低壓梯度泵，PDA-100二極管陣列檢測器，TCC-100柱溫箱，Chromeleon色譜工作站）；瑞士Precisa電子天平（XR205SM-DR）；CQX25-06超聲波清洗器（上
5、海必能信超聲有限公司，功率250azz.?！ ?方法與結(jié)果 2.1綠原酸的含量測定 2.1.1色譜條件色譜柱為DikmaKromasilC18（250mm×4.6mm，5μm），流動相為乙腈-0.4％磷酸溶液（12∶88），流速0.8ml/min，柱溫30℃，檢測波長326nm?！ ?.1.2對照品溶液的制備取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥至恒重的綠原酸對照品4.0mg，精密稱定，置50ml棕色量瓶中，加50％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（每毫升含綠原酸80μg）?！ ?.1.3供試品溶液的制備取山銀花適量，50℃烘約5h，粉碎為細粉（過4號篩）。取約0.5g，精密稱定，置
6、具塞錐形瓶中，精密加入50％甲醇50ml，稱定重量，超聲處理45min，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補足減失的重量，搖勻，過濾，精密取續(xù)濾液5ml，置25ml棕色量瓶中，加50％甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得?！ ?.1.4系統(tǒng)適應(yīng)性實驗分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果見圖1。從圖1中可見，綠原酸的保留時間約為10min，綠原酸峰與其前后色譜峰的分離度分別為12.60，3.34，均大于1.5，拖尾因子為1.03，理論塔板數(shù)以綠原酸峰計為15417，綠原酸峰純度因子為1000。 圖1山銀花HPLC色譜圖（略） 2.1.5線
7、性關(guān)系考察分別精密吸取綠原酸對照品溶液（80μg·ml-1）2，4，6，8，10，15，20μl，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積，以峰面積A對進樣量C（μg）進行回歸，得標準曲線方程：A＝34.8152C+0.2685，r＝0.9999。結(jié)果表明，綠原酸在0.16～1.6μg范圍內(nèi)，峰面積與進樣量有良好的線性關(guān)系?！ ?.1.6精密度實驗精密吸取同一供試品溶液10μl，按上述色譜條件連續(xù)進樣5次，測得綠原酸峰面積RSD為0.46％。表明儀器精密度良好。 2.1.7重復性實驗取同一批山銀花（批號050701），按供試
