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《槐米中蘆丁的提取和精制(2010)實(shí)驗(yàn)報(bào)告》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、實(shí)驗(yàn)一、槐米中蘆丁的提取、精制和鑒定（一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?.制備蘆丁，供藥用。2.通過蘆丁的制備，掌握黃酮類化合物的提取分離的原理和操作。3.熟悉重結(jié)晶技巧。4.了解和掌握黃酮類化合物的一些主要性質(zhì)和鑒定方法。（二）實(shí)驗(yàn)的基本原理1.蘆丁的提取原理利用蘆丁結(jié)構(gòu)中含有多個(gè)酚羥基，呈酚酸性，能在堿水中溶解的性質(zhì)，可用堿性溶劑進(jìn)行提取，提取液加酸后可沉淀析出（堿溶酸沉法）。也可利用蘆丁在冷水中溶解度小，在熱水中溶解度大的性質(zhì)進(jìn)行提取。2.蘆丁的分離原理利用蘆丁結(jié)構(gòu)在冷乙醇中溶解度小，在熱乙醇中溶解度大，以及在熱水中溶解度大，在冷水中溶解度小的性質(zhì)分離。蘆丁用溶劑加熱
2、溶解后，趁熱抽濾，濾液放冷后能析出而達(dá)到分離的目的（如不純可再重復(fù)操作進(jìn)行分離）。也可采用醇溶水沉法進(jìn)行精制。3.蘆丁的鑒定原理（1）利用吸附薄層色譜的分離原理，蘆丁與蘆丁對(duì)照品在同一條件下進(jìn)行展開，顯色，以達(dá)到鑒定蘆丁的目的。（2）通過專屬的化學(xué)顯色反應(yīng)（如三氯化鋁顯色反應(yīng)），確定蘆丁的成分類型（黃酮類）。(三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1.用堿提法、水提法、醇提法提取槐米中蘆丁。2.用酸沉法和冷卻過飽和法分離蘆丁。3.溶劑重結(jié)晶精制蘆丁。4.薄層色譜法和顯色反應(yīng)鑒定蘆丁(四)實(shí)驗(yàn)藥材儀器與試劑1.實(shí)驗(yàn)藥材槐米20g。2.儀器：磁力加熱攪拌器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、粉碎機(jī)、500ml
3、燒杯，1000ml燒杯，50ml燒杯，250ml園底燒瓶、500ml園底燒瓶、100ml量筒、50ml量筒、100ml錐形瓶、50ml錐形瓶、研缽、移液管、減壓過濾裝置，布氏漏斗，抽濾瓶、層析缸等。3.試劑：硼砂、氧化鈣、HCI、三氯化鋁、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、甲酸、濾紙、PH試紙等。（五）實(shí)驗(yàn)步驟1.提?。ㄋ崛》ǎ┓Q取槐米粗粉20g，在研缽中研碎后放入500ml燒瓶中，加水200ml，用磁力加熱攪拌器加熱煮沸30min，趁熱過濾。殘?jiān)ú僮饕淮?，合并兩次濾液，放置冰箱中析晶，待全部析出后，減壓抽濾，用少量蒸餾水洗滌蘆丁結(jié)晶，抽干，得粗制蘆丁，干燥，稱
4、重，計(jì)算得率。2.精制（醇-水重結(jié)晶法）取粗制蘆丁1g，置于250ml園底燒瓶中，加80%乙醇30ml加熱回流15分鐘，趁熱抽濾。濾液置250ml燒杯中，向?yàn)V液中加蒸餾水（約3~4倍量）至溶液呈明顯混濁，室溫放置，抽濾得精致蘆丁。用少量蒸餾水洗滌蘆丁結(jié)晶，晾干，稱重。8(六)過程與現(xiàn)象記錄Day1（2011-05-07）1.提?、俜Q取研碎的粗槐米20.02g，組裝儀器。②原料放入500mL燒瓶中加水200mL（1-2），磁力攪拌加熱。燒瓶中為咖啡色懸浮液，有甘苦氣味，沸騰前不斷產(chǎn)生小氣泡上，液體中有明顯漩渦（1-3）。102℃沸騰，產(chǎn)生大量氣泡，藥渣翻滾，漩
5、渦被氣泡遮蓋（1-4）。加熱過程中時(shí)常停止沸騰，續(xù)略升溫2~3℃。隨著時(shí)間的延長，液體顏色加深。煮沸規(guī)程中應(yīng)控制液量，過少難以提出藥品，過多容易噴出瓶口。③最初用抽濾法分離殘?jiān)?-5），但是溶液很稠且含糖分較多，難以流下（1-6），并且易阻塞和沖破濾紙，還漸漸冷卻。后改用離心法，5000r,15min(1-7)，效果略好，但是溶液還是冷卻，溶解的提取物較少。濾液為深黃色色，粘稠，氣味濃厚甘甜。④再次將濾渣至于放入500mL燒瓶中加水200mL磁力攪拌加熱30min，液體顏色略比第一次深。⑤將兩次得到的浸液（約300mL）收集放入冰箱備用。Day2（2011
6、-05-08）2．精制1.將粗提物抽濾（1-7）（1-8）（1-9），干燥得粗制蘆?。?-10）。2.取粗制蘆丁1.008g，置于250ml園底燒瓶中，加80%乙醇30ml，加熱回流15分鐘（1-11），加熱前沒有充分分散固體粗提物，趁熱抽濾（1-12），得到黃色油狀液體（1-13）。2.另旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)粗提物的濾液（1-14），沒有產(chǎn)物。Day3（2011-05-14）3.鑒定（1）點(diǎn)滴顯色反應(yīng)從放置一周的粗提物中取蘆丁的甲醇溶液（供試液）分別點(diǎn)在濾紙上，揮去溶劑，紫外照射，光吸收明顯（1-15），然后分別添加供試液蘆丁的甲醇溶液和顯色劑2%三氯化鋁乙醇溶液，顯
7、黃色（1-16），在紫外燈下λ365nm觀察有明顯亮斑（1-17）。8（2）薄層色譜鑒定吸附劑：硅膠GF254薄層板（5.0cmX10.0cm）。樣品：自制蘆?。ㄓ眉状既芙?，濃度約1mg/ml）對(duì)照品：蘆丁對(duì)照品的甲醇溶液。展開劑：三氯甲烷-甲醇-甲酸（7∶3∶0.5）顯色：a.先在可見光下觀察，然后在紫外光下觀察，有明顯紫外吸收。（365nm紫外燈下觀察）b.遮擋硅膠板左側(cè)噴三氯化鋁試劑（1-18），365nm紫外燈下觀察，右側(cè)有顯色劑呈黃色，左側(cè)有明顯紫外吸收（1-19）。4.注意事項(xiàng)(1)硼砂因能與蘆丁中的鄰二酚羥基結(jié)合，起保護(hù)鄰二酚羥基，不被氧化破壞
8、的作用。實(shí)驗(yàn)證明，提取時(shí)加入硼砂，產(chǎn)品的質(zhì)量會(huì)好些。
