人乳頭瘤病毒hpv核酸檢測(cè)對(duì)比分析課件

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1、人乳頭瘤病毒(HPV)核酸檢測(cè)內(nèi)容HPV與宮頸癌宮頸癌檢測(cè)方法比較HPV核酸檢測(cè)方法學(xué)比較臨床使用宮頸癌婦科第二大癌癥每年約有20余萬(wàn)婦女死于宮頸癌新發(fā)病:全球---50萬(wàn)/年我國(guó)---13.2萬(wàn)/年姓名：哈拉爾德·楚爾·豪森國(guó)籍：德國(guó)民族：日耳曼課題：發(fā)現(xiàn)人乳頭瘤病毒（HPV）引發(fā)宮頸癌成績(jī)：獲得2008年度諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)HaraldzurHausen宮頸癌什么是HPV？HumanPapillomavirus人乳頭瘤病毒雙鏈DNA無(wú)包膜病毒廣泛分布于高等脊椎動(dòng)物定向感染皮膚及粘膜的復(fù)層鱗狀上皮HPV病毒電鏡照片HPV感染HPV感染的途徑和危險(xiǎn)因素性傳播直接皮膚接觸母嬰傳播性行為

2、混亂免疫抑制吸煙其他STD協(xié)同感染口服避孕藥HPV感染率與發(fā)病率HPV感染與宮頸癌發(fā)病率變化圖，IntJCancer1993,53:919HPV感染的不同階段宮頸癌的癌前病變(CIN)CIN=CervicalIntraepithelialNeoplasia宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變CIN宮頸不典型增生宮頸原位癌：宮頸上皮細(xì)胞發(fā)生癌變，但癌變未突破基底膜、間質(zhì)無(wú)浸潤(rùn)。輕度（CINⅠ級(jí)）：病變局限在上皮層的1／3內(nèi)中度（CINⅡ級(jí)）：病變局限在上皮層的下2／3重度（CINⅢ級(jí)）：病變幾乎累及全部上皮層，僅剩1－2層表面的正常鱗狀上皮宮頸上皮細(xì)胞部分或大部分被不同程度異型細(xì)胞所替代定義宮頸癌的癌前病

3、變(CIN)專(zhuān)家共識(shí)宮頸癌的“元兇”就是高危型HPV感染高危型HPV感染是宮頸癌的必要條件沒(méi)有HPV感染，就沒(méi)有宮頸癌防治HPV感染，就是防治宮頸癌1995年，國(guó)際癌癥研究協(xié)會(huì)認(rèn)為高危固定價(jià)HPV的持續(xù)性感染是宮頸癌的主要病因?qū)m頸癌感染HPV病毒?CIN?早期浸潤(rùn)癌唯一知道病因的癌癥唯一可以通過(guò)早期干預(yù)阻斷的癌癥5-15年內(nèi)容HPV與宮頸癌宮頸癌檢測(cè)方法比較HPV核酸檢測(cè)方法學(xué)比較臨床使用分子水平細(xì)胞水平組織水平宮頸癌檢測(cè)方法學(xué)發(fā)展過(guò)程1982年醋酸、碘液肉眼檢測(cè)靈敏度為70.9%特異度為74.3%1996年新柏氏TCT靈敏度為80.8%特異度為51-60%2000年HPV核酸檢測(cè)靈敏

4、度為98.6%特異度為99%巴氏涂片靈敏度為50%以下特異度為？%1941年宮頸癌篩查發(fā)展史組織學(xué)檢測(cè)肉眼觀察陰道鏡觀察組織檢查優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，價(jià)格低廉，適宜作初步篩查；缺點(diǎn)：準(zhǔn)確率低，人員素質(zhì)要求高，病人痛苦程度大。細(xì)胞學(xué)檢測(cè)傳統(tǒng)巴氏涂片液基細(xì)胞學(xué)傳統(tǒng)巴氏涂片（CV）液基薄層細(xì)胞學(xué)技術(shù)(TCT)自動(dòng)細(xì)胞學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)（LCT）計(jì)算機(jī)輔助細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)（CCT）細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的假陰性液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)假陰性結(jié)果高達(dá)20%水平差的地方更高原因分析：1、視野局限2、人為因素1）取標(biāo)本、片子制備2）技術(shù)差異3）耐心、責(zé)任心細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的假陽(yáng)性1、凹空細(xì)胞是HPV感染的主要形態(tài)學(xué)改變，但不是特異性改變2、HP

5、V正在清除階段細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的性?xún)r(jià)比低TCT陰性要求每年做同樣的檢查HPV陰性可以把篩查時(shí)間延長(zhǎng)到3-5年HPV檢測(cè)TCT檢查衛(wèi)生部《宮頸癌篩查及早診早治指南》核酸檢測(cè)直接檢查導(dǎo)致宮頸癌的元兇---HPV病毒靈敏度高，特異性好操作簡(jiǎn)便，可作為療效評(píng)估和監(jiān)測(cè)指標(biāo)宮頸癌篩查三方案最佳方案：HPV核酸檢測(cè)+液基細(xì)胞基本方案：醋酸白實(shí)驗(yàn)一般方案：HPV核酸檢測(cè)+傳統(tǒng)巴氏涂片中國(guó)癌癥研究協(xié)會(huì)推薦方法內(nèi)容HPV與宮頸癌宮頸癌檢測(cè)方法比較HPV核酸檢測(cè)方法學(xué)比較臨床使用HPV第一代核酸檢測(cè)產(chǎn)品產(chǎn)品：HC2、港龍13型原理：雜交捕獲技術(shù)特點(diǎn)：檢測(cè)核酸、不分型、不能科學(xué)定量、檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)計(jì)算機(jī)判讀15minD

6、NA-RNA雜交60min抗體捕獲60min化學(xué)發(fā)光檢測(cè)30minDNA分解45minHPV核酸第二代檢測(cè)產(chǎn)品產(chǎn)品：凱普21型、亞能23型、透景26型、達(dá)安19型、港龍29型原理：膜條雜交、液相雜交特點(diǎn)：可以分型，而且高低危都能做需要雜交、時(shí)間長(zhǎng)。5-10個(gè)小時(shí)不等。開(kāi)放式雜交、極易導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室生物污染。結(jié)果需肉眼判讀，增加人為誤差。不能定量HPV核酸第三代檢測(cè)方法產(chǎn)品：上海之江13型分型檢測(cè)試劑原理：分別采用HPV13種型別的特異性引物及熒光探針，應(yīng)用PCR+Taqman技術(shù)，對(duì)HPV13種型的特異性核酸片段進(jìn)行分型定量檢測(cè)。特點(diǎn)：分型、定量、快捷、安全優(yōu)勢(shì)一：分型HPV59IC高危1

7、3型：16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68優(yōu)勢(shì)二：快捷上機(jī)檢測(cè)抽提DNA30min60min標(biāo)本采集30min2小時(shí)！加樣加試劑優(yōu)勢(shì)三：安全之江：封閉式實(shí)時(shí)熒光PCR無(wú)需洗滌減少污染傳統(tǒng)膜條雜交：反復(fù)洗滌操作繁瑣污染幾率增加優(yōu)勢(shì)四：定量（唯一）3、便于文章的發(fā)表。1、宮頸病毒載量和CIN分期呈正相關(guān)。2、用于對(duì)病程的觀察和療效的評(píng)估。正常hpv正常HPV正常正常hpv正常HPV5萬(wàn)IU1萬(wàn)IU傳統(tǒng)方法為什