大黃蟲丸抗實驗性肝纖維化的功效組分研究.doc

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1、大黃蟲丸抗實驗性肝纖維化的功效組分研究作者:賴景紹,蔡紅兵,陳文倩,劉強,陳育堯,呂志平【摘要】目的觀察大黃蟲丸各功效組分對大鼠實驗性肝纖維化的作用。方法建立肝纖維化大鼠模型。全自動生化分析儀測定ALT、AST、TP、ALB,放免法測定HA、LN、CIV、PCIII,光鏡下觀察肝組織形態(tài)學及膠原纖維增生情況。結(jié)果各功效組分均能一定程度上改善肝功能及降低肝纖維化血清指標,光鏡下可見各藥物組肝纖維化程度與模型組相比差異顯著。其中活血化淤組在降低ALT、AST及肝纖維血清指標方面效果較好,而滋陰養(yǎng)血組能更有效地升高TP及ALBo結(jié)論大黃蟲丸各功效組分均有一定的抗肝纖維

2、化作用,其中活血化淤組作用更為明顯?!娟P(guān)鍵詞】肝纖維化;大黃蟲丸;肝功能;病理Abstract:ObjectiveToobservetheeffectsofdividedfunctionof1(DR-DZP)onexperimisinrats.Methodslnalhepaticfibrosis,alanalyzerwasusedtAlb,radioimmunoassDahuangZhechongPi1entalhepaticfibrosratswithexperimentautomaticbiochemicodetectALT,AST,TP,aywasused

3、todetectHA,LN,CIV,PCIll,andpathologicalchangesunderalightmicroscopewerewiththemodelcPcouldimprovetheliserummarkersof1iveHepaticFibrosis;ill;Liverfunction;ontrol,alltheDR-DZverfunction,reducerfibrosis(PKeywordsDahuangZhechongPPathology肝纖維化(Hepaticfibrosis,HF)是指肝臟內(nèi)細胞外基質(zhì)(ECM)的合成大于降解,導致纖

4、維結(jié)締組織異常過度沉積。肝纖維化是肝硬化形成的早期階段和必經(jīng)階段,也是唯一在一定情況下可被逆轉(zhuǎn)的階段。如病因持續(xù)存在,肝纖維化逐漸加重,肝小葉及血管等逐漸被改建,肝臟的正常結(jié)構(gòu)遭到破壞,中心靜脈區(qū)和匯管區(qū)出現(xiàn)間隔、假小葉形成,即發(fā)展為不可逆轉(zhuǎn)的肝硬化[1]。大黃蟲丸出自張仲景所著《金匱要略》,由大黃、蟲、水蛭、虻蟲、蠐螬、桃仁、干漆、生地黃、芍藥、黃芩、杏仁、甘草12味藥材組成,具有疏通經(jīng)絡、破淤生新、緩中補虛、清熱潤燥、滋陰養(yǎng)血之功效,是袪淤生新的代表方劑,攻補兼施,主治五勞虛極,淤血內(nèi)停之干血勞;動物實驗及臨床觀察表明大黃蟲丸對各種原因引起的肝纖維化均有良好

5、的治療作用[2?6]。本研究的目的是在全方有效的基礎(chǔ)上,按照大黃蟲丸的功效組成進行拆方研究,進一步探討大黃蟲丸抗肝纖維化有效的功效組分,為深入研究其組方規(guī)律及作用機制奠定基礎(chǔ)。1材料與儀器動物健康Wistar大鼠58只,雄性,體質(zhì)量180?220g,由南方醫(yī)科大學實驗動物中心提供(合格證號:SCXK粵XX-0015)。試劑二甲基亞硝胺,購自天津化學試劑研究所,批號060523。藥物大黃蟲丸按功效將全方諸藥拆分為3部分,分別為:活血化淤組,由水蛭60g,蟲30g,虻蟲45g,蠐螬45g,桃仁120g,干漆30g組成;清熱潤燥組,由大黃300g,黃芩60g,杏仁12

6、0g組成;滋陰養(yǎng)血組,由生地黃300g,芍藥120g,甘草90g組成[7]。12味中藥藥材由南方醫(yī)科大學中藥制劑教研室提供,將12味中藥分別制成超微粉劑,臨用前按照全方的劑量比配制成混懸液使用。儀器AU5400全自動生化分析儀;普通光學顯微鏡;超薄石蠟切片機,模型組及各藥物組大鼠以10mg/(kg?d)%D麗溶液腹腔注射,每周連續(xù)3d,共4周[8]。造模的第1天開始灌胃給藥,大黃蟲丸全方組每日給藥劑量為g/kg、活血化淤組g/kg、清熱潤燥組g/kg、滋陰養(yǎng)血組g/kg,連續(xù)灌胃28d。在整個實驗過程中,以普通飼料喂養(yǎng)大鼠,自由飲用自來水。指標檢測實驗期滿后,動

7、物禁食不禁水12h,用10%水合氯醛腹腔麻醉,腹主動脈采血,真空負壓采血管收集,室溫靜置h,2500r/min離心15min,取上層血清,分裝于離心管中,用AU5400全自動生化分析儀測定血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB),拭劑盒為南京建成生物工程公司產(chǎn)品;放免法測定血清透明質(zhì)酸(HA)、層粘蛋白(LN)、IV型膠原(CIV)、III前膠原(PCIII),試劑盒來自上海海研生物醫(yī)學技術(shù)有限公司。病理學觀察大鼠予10%水合氯醛腹腔麻醉后,仰臥位定,打開腹腔,取cmXcmXcm大小肝組織,40g/L中性甲醒液固定,24h

8、后逐級酒精脫水,二甲苯透

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