色譜柱選擇與維護(hù)

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1、色譜柱的選擇與維護(hù)魏少勇paul@gzflm.com15920467889廣州菲羅門(mén)科學(xué)儀器有限公司色譜柱的選擇與維護(hù)公司簡(jiǎn)介如何選擇色譜柱A、固定相的選擇B、PH的選擇如何維護(hù)色譜柱廣州菲羅門(mén)科學(xué)儀器有限公司中國(guó)全權(quán)總代理廣州菲羅門(mén)科學(xué)儀器有限公司廣州菲羅門(mén)科學(xué)儀器有限公司我們的宗旨:以最真誠(chéng)和迅速的態(tài)度替用戶提供優(yōu)質(zhì)服務(wù),解決分析的問(wèn)題和需要1982成立于美國(guó)加州提供一系列非常完整的色譜柱極少數(shù)專門(mén)提供色譜耗材公司-液相和氣相免費(fèi)提供超過(guò)10000應(yīng)用譜圖免費(fèi)提供技術(shù)支持免費(fèi)提供技術(shù)資料2004LabvisionHPLCColumnReport2004年一月到六月La

2、bvision調(diào)查美國(guó)1200實(shí)驗(yàn)室結(jié)果使用柱子數(shù)量的比例Phenomenex25%W22.5%A7.7%S7.6%其他5%以下如何選擇適當(dāng)?shù)纳V柱理想的柱子可以適用于分析所有的化合物永遠(yuǎn)不會(huì)壞理想分離度決定峰分離度的三個(gè)要素峰保留時(shí)間選擇性(出峰的順序)柱效如何得到最理想的分析結(jié)果流動(dòng)相,被分析物,和固定相三者之間的作用影響峰保留時(shí)間和峰分離性.峰保留時(shí)間短一般峰型較好,但分離可能不理想.所以為了調(diào)節(jié)最理想的分析結(jié)果,可以改變下列的一項(xiàng)或數(shù)項(xiàng)條件:流動(dòng)相固定相pH溫度固定相的選擇疏水性的選擇極性的選擇苯基的選擇固定相疏水性考慮的要素鍵合相的種類(C18,C8,Pheny

3、l,etc)表面積鍵合相的鍵合率Luna?C18(2)–月神品質(zhì)可靠,世界暢銷的C18柱重復(fù)性高–可以同時(shí)提供3個(gè)不同的批次的柱子Luna?C18(2)GinsengRootColumn:Luna5μmC18/ODS(2)Dimensions:150x4.6mmIDElutionType:GradientEluentA:Acetonitrile/water(15:85)EluentB:Acetonitrile/water(80:20)FlowRate:1.5mL/minTemperature:25°CDetection:UV-VisAbs.–VariableWave.@2

4、05nmAppID1125Luna?C8(2)&C5減少疏水性化合物的保留時(shí)間減少分析的時(shí)間Synergi?Max-RP疏水性和C18柱類似–但這是一支C12柱提供比C18柱更尖的柱峰,尤其是分析堿性化合物Synergi?Max-RPBasicDrugsatNeutralpH疏水性的比較C18phasesC8phase300?C18phase極性選擇性的考慮首先考慮固定相的極性封尾,封端基團(tuán)分析物的極性官能基之間的作用極性選擇性如何增加極性的選擇性極性基團(tuán)封端極性基團(tuán)鑲嵌苯基極性選擇性Columns:Luna?5?mC18(2)YMC-Pack?5?mProC18Syne

5、rgi?4?mPolar-RP?(Ether-linkedPhenyl)150x4.6mmMobilephase:75:25Methanol:waterFlowrate:1mL/minComponents:1.Estrone2.Estradiol極性選擇性Luna?C18(2)Synergi?Polar-RP?YMC-Pack?ProC181+21+212SynergiMax-RP-C12SynergiHydro-RP-C18SynergiFusion-RP–C18SynergiPolar-RP–PhenylSynergi?SilicaAdvantageBalancing

6、Efficiency&BackpressureLinearVelocity(mm/sec)PlateHeight(H)5μ4μ3μFlowRate(mL/min)PressureDrop(Bar)higherefficiencieslowerbackpressuresSynergi?Synergi?Synergi?Max-RP與C18柱性能類似的C12柱Synergi?Polar-RP?保留極性和苯基化合物100%水溶液穩(wěn)定增加極性的選擇性Synergi?Hydro-RP疏水性非常強(qiáng)..極性封端100%水溶性穩(wěn)定增進(jìn)極性的選擇性SynergiHydro-RPVS.Luna

7、?C18(2)Synergi?Hydro-RPSynergiHydro-RPSynergiMax-RPMobilePhase:A:20mMKH2PO4,pH4.6B:AcetonitrileGradient:A/B(95:5)toA/B(65:35)in15minFlowrate:1.5mL/minSample:1.Morphine2.Hydromorphone3.Codeine4.Nalorphine5.OxycodoneSynergi?Hydro-RPSynergi?Fusion-RP增加極性的選擇性同時(shí)減少疏水性的分析時(shí)