正交試驗(yàn)法優(yōu)化香附總黃酮提取工藝

正交試驗(yàn)法優(yōu)化香附總黃酮提取工藝

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1、正交試驗(yàn)法優(yōu)化香附總黃酮提取工藝 Abstract:ObjectiveTooptimizetheextractiontechnologyoftotalflavonoidsfromCyperusRotundus.MethodsOrthogonalexperimentaterialandsolvent,extractingtimeandfrequencyasfactors.ResultsTheoptimalextractiontechnologyaterialtosolventof1∶15,extractingfor45minand2times.Conc

2、lusionTheextractiontechnologyissteadyandsuitableforextractingtotalflavonoidsfromCyperusRotundus.  Keyent;extractiontechnology  香附為莎草科多年生草本莎草(CyperusrotundusL.)的干燥根莖,性辛、微苦、微甘、平,歸肝、三焦經(jīng),具有疏肝理氣、調(diào)經(jīng)止痛的功效[1]。香附主要含有揮發(fā)油、黃酮類化合物、三萜類化合物、甾醇類、生物堿、糖類、酚類等化學(xué)成分[2]。現(xiàn)有研究已證明黃酮類化合物在治療冠心病、老年性癡呆、腦血栓、神

3、經(jīng)系統(tǒng)疾病等方面有顯著效果,還具有抑菌、抗癌等作用,且無副作用,已開發(fā)出許多種藥品和保健食品[3-5]。已有的文獻(xiàn)資料未見有關(guān)香附黃酮類物質(zhì)提取工藝的研究報(bào)道,故本試驗(yàn)對(duì)香附總黃酮的提取工藝以及含量進(jìn)行初步研究,為香附總黃酮的進(jìn)一步研究開發(fā)提供資料。  1儀器與試藥  1.1儀器  Agilent8453E型紫外-可見分光光度計(jì)(美國(guó)安捷倫公司);BP211D電子分析天平(德國(guó)Sartorius);KQ-500超聲儀(昆明市超聲儀器有限公司,功率500×14cm)?! ?.2試藥  香附藥材購自安徽亳州藥材市場(chǎng),經(jīng)湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬人民醫(yī)院藥學(xué)部雷龍副

4、教授鑒定為莎草科植物(CyperusrotundusL.)的干燥根莖;蘆丁對(duì)照品(批號(hào):10080-200306)購自中國(guó)藥品生物制品檢定所;聚酰胺(30~60目,浙江省臺(tái)州市路橋四甲生化塑料廠);水為重蒸水;其余試劑均為分析純?! ?方法與結(jié)果  2.1供試品溶液的制備  取香附粉末(過2號(hào)篩)3.0g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,加石油醚(60~90℃)50mL,超聲提取30min,棄去石油醚液,待樣品中殘留的石油醚全部揮去后,按實(shí)驗(yàn)要求加入不同體積乙醇(不同體積分?jǐn)?shù))超聲提取不同時(shí)間、次數(shù),放涼后濾過,濾液置80℃水浴鍋上濃縮至適量。稱取聚酰胺3

5、g,以樣品溶液拌樣后置80℃水浴鍋上加熱至無醇味,裝入層析柱中。用蒸餾水100mL、20%(體積分?jǐn)?shù))乙醇50mL、60%(體積分?jǐn)?shù))乙醇300mL依次進(jìn)行洗脫,收集60%(體積分?jǐn)?shù))乙醇洗脫液,置水浴鍋上濃縮,用60%(體積分?jǐn)?shù))乙醇定容至25mL,即得?! ?.2對(duì)照品溶液的制備  精密稱取已干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品20.08mg,置10mL容量瓶中,加60%(體積分?jǐn)?shù))乙醇溶解至刻度,搖勻,即得。  2.3測(cè)定波長(zhǎng)的選擇  取供試品溶液和對(duì)照品溶液各1mL,置于10mL容量瓶中,加入5%(質(zhì)量濃度)NaNO2溶液0.3mL,搖勻,放置6min,再

6、加入10%(質(zhì)量濃度)Al(NO3)3溶液0.3mL,搖勻,再放置6min,加入4%(質(zhì)量濃度)NaOH溶液4mL,加60%(體積分?jǐn)?shù))乙醇定容到10mL,放置15min,即得。用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行掃描,結(jié)果兩者在499.9nm處均有最大吸收,故選擇500nm作為測(cè)定波長(zhǎng)?! ?.5單因素考察  以乙醇體積分?jǐn)?shù)、料液比、提取時(shí)間為考察因素,考察其對(duì)總黃酮提取率的影響。結(jié)果見圖1。[PSa6381〗A.乙醇體積分?jǐn)?shù);B.料液比;C.提取時(shí)間圖13個(gè)因素對(duì)總黃酮提取率的影響Figure1Theeffectontheextractionyieldof3fa

7、ctors由圖1可知,乙醇體積分?jǐn)?shù)在80%時(shí)香附總黃酮提取率最高,當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)繼續(xù)提高,總黃酮提取率反而下降;總黃酮提取率隨著料液比的增大而升高,當(dāng)料液比為1∶15時(shí)達(dá)到最大值;提取時(shí)間為40min時(shí)總黃酮提取率最高。  2.6正交試驗(yàn)  在單因素考察的基礎(chǔ)上,選擇乙醇體積分?jǐn)?shù)(A)、料液比(B)、提取時(shí)間(C)、提取次數(shù)(D)4個(gè)因素為考察因素,以總黃酮提取率為指標(biāo),采用L9(34)正交試驗(yàn)表安排試驗(yàn),確定香附總黃酮的最佳提取工藝。結(jié)果見表1-3。由表2、3可知,各個(gè)因素對(duì)香附總黃酮提取率影響程度從大到小依次為:乙醇體積分?jǐn)?shù)>提取次數(shù)>

8、;提取時(shí)間>料液比,4個(gè)因素對(duì)提取率的影響均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)合實(shí)際生產(chǎn)的需要,選擇最佳提取工藝條件為A

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