沙利度胺對于m7細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究

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1、沙利度胺對于M7細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研宄馮林瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院血液科四川瀘州646000【摘要】目的：研究沙利度胺對于M7細(xì)胞（巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞）的作用。方法：用Sigma公司生產(chǎn)的沙利度胺原料藥。以0.1%DMSO（二甲基亞砜）為陰性對照組，以M7細(xì)胞為空白組，以不同濃度的沙利度胺作用于M7細(xì)胞,用CCK-8方法（細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒方法）觀察不同濃度不同時(shí)間沙利度胺對于M7細(xì)胞的增值抑制作用；以不同濃度沙利度胺分別作用M7細(xì)胞24h,48h,72h后,用ELISA方法檢測上清液中VEGF（血管內(nèi)皮生長因子）的濃度；以不同濃度沙利度胺分別作用M7細(xì)胞24h,48h,72h后，經(jīng)HE及DAP

2、I（二脒基苯基吲哚）染色后，用光學(xué)顯微鏡及熒光顯微鏡觀察M7細(xì)胞形態(tài)變化，并應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果：沙利度胺可明顯抑制M7細(xì)胞分泌VEGF，并且抑制作用隨著沙利度胺濃度及作用時(shí)間而增強(qiáng)；在CCK-8實(shí)驗(yàn)中，各組M7細(xì)胞與空白組相比，發(fā)現(xiàn)沙利度胺對M7細(xì)胞無明顯抑制作用；光學(xué)顯微鏡觀察不同時(shí)間段不同組，各組M7細(xì)胞與空白組相比較，細(xì)胞生長較好，呈圓形，細(xì)胞核大，核膜清晰。熒光顯微鏡下，未見明顯凋亡小體。結(jié)論：1.沙利度胺能夠明顯抑制M7細(xì)胞分泌VEGF,并且呈時(shí)間濃度依賴性。2.沙利度胺對于M7細(xì)胞沒有明顯抗增殖效應(yīng)及誘導(dǎo)其凋亡的作用?！娟P(guān)鍵詞】沙利度胺；VEGF；M7細(xì)胞；凋

3、亡小體；DAPI染色【中圖分類號】R52.5【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B【文章編號】1674-8999（2015）9-0566-02[Abstract]Objective：ToresearchontheimpactofthalidomideonM7cellline.Methods：ThalidomideusedascrudedrugwasboughtfromSigmacompany.Take0.1%DMSOasthenegetivecontrolgroup,andM7cellsasblankgroup,totreatM7cellwiththalidomideofdifferentconcent

4、rationandchecktheproliferativeinhibitionrateofM7cellbyCCK-8;totreatM7cellwiththalidomideofdifferentconcentrationfor24hr,48hrand72hrrespectivelyandchecktheVEGFconcentrationofsupernatantbyElisa;totreatM7cellwiththalidomideofdifferentconcentrationfor24hr,48hrand72hrrespectivelyandchecktheformsand

5、apoptoticstateofM7cellsbylightmicroscopeandfluorescentmicroscopeandanalyzetheexperimentresultsbystatistics.Results：ThalidomidecanremarkablelyinhibittheVEGFsecretedbyM7cellandtheinhibitionincreasesasthetimeandconcentrationgoby.InCCK-8test,tocompareeachsubjectgroupwithblankgroup,wefindthalidomid

6、ehasnoremarkableinhibitoryactiononM7cell.Tocompareeachsubjectgroupofdifferenttimeswithblankgroupbylightmicroscopeandfluorescentmicroscope,wefindcellsgrowwellwithroundshape,largenucleusandlimpidnuclearmembranewithHEstainingandthereisnoapparenteapoptoticbodywithDAPIstaining.Discussion：l.Thalidom

7、idecanremarkablelyinhibitVEGFsecretionbyM7cell,andtheinhibitionistimeandconcentrationdependent.2.Thalidomidehasnonotableanti-proliferativeandapoptosis-inducedeffectsonM7cell.【Keywords】ThalidomideVEGFM7cellApoptiticbodyDAPIstaining急性巨核細(xì)胞