骨碎補(bǔ)總黃酮對(duì)實(shí)驗(yàn)性兔膝骨性關(guān)節(jié)炎軟骨及滑膜的影

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1、骨碎補(bǔ)總黃酮對(duì)實(shí)驗(yàn)性兔膝骨性關(guān)節(jié)炎軟骨及滑膜的影【摘要】目的研究骨碎補(bǔ)總黃酮對(duì)兔膝骨性關(guān)節(jié)炎的治療效果,探討其防治骨性關(guān)節(jié)炎的可行性。方法32只新西蘭大白兔隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、骨碎補(bǔ)總黃酮組和維固力組。以關(guān)節(jié)制動(dòng)法建立兔膝骨性關(guān)節(jié)炎模型。成模后灌胃給藥,8周后鏡下觀察骨碎補(bǔ)總黃酮對(duì)動(dòng)物模型關(guān)節(jié)軟骨、滑膜組織形態(tài)學(xué)及基質(zhì)金屬蛋白酶-3表達(dá)的影響。結(jié)果骨碎補(bǔ)總黃酮組與模型對(duì)照組比較滑膜及軟骨組織形態(tài)學(xué)改變明顯較輕(P<0.01),滑膜、軟骨組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-3表達(dá)減少(P<0.01);骨碎補(bǔ)總黃酮組與維固力

2、組相比,各指標(biāo)間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論骨碎補(bǔ)總黃酮能夠減輕兔膝骨性關(guān)節(jié)炎的軟骨退行性變和滑膜炎癥,其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)基質(zhì)金屬蛋白酶-3表達(dá)有關(guān)?!娟P(guān)鍵詞】骨性關(guān)節(jié)炎;骨碎補(bǔ)總黃酮;軟骨;滑膜;基質(zhì)金屬蛋白酶-3;兔Abstract:ObjectiveToobservetheeffectsofosteopractictotalflavone(OTF)ontreatmentofosteoarthritisinexperimentalrabbitsandtoexplorethefeasibilityofusing

3、OTFinthepreventionandtreatmentofosteoarthritis.Methods32rabbitslydividedintonormalgroup,modelcontrolgroup,OTFgroupandGlucosamineSulfateCapsulesgroup.Therabbitosteoarthritismodelmobilizingthekneesofrabbit,folloatrixmetalloproproteinases(MMP)-3incartilageandsynovialodel

4、group(P<0.01).ThelevelsofMMP-3incartilageandsynoviadecreased.Thereodelgroup(P<0.01),ineSulfateCapsulesgroupodel,ofechanismisrelatedtotheadjustmentofthelevelsofMMP-3.Keyetalloproteinases-3;rabbit骨性關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis,OA)是一種慢性退行性關(guān)節(jié)疾病,以關(guān)節(jié)軟骨退變及繼發(fā)性骨質(zhì)增生和滑膜改變?yōu)橹饕卣鳌D壳?,我?/p>

5、已進(jìn)入老齡化社會(huì),OA的發(fā)生也日益增多。骨碎補(bǔ)總黃酮是水龍骨科植物干燥根莖中提取的黃酮類化合物,研究發(fā)現(xiàn)骨碎補(bǔ)總黃酮可以抑制巨噬細(xì)胞分泌細(xì)胞因子[1]。本研究通過觀察骨碎補(bǔ)總黃酮對(duì)實(shí)驗(yàn)性兔膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨、滑膜組織形態(tài)變化的影響,同時(shí)采用免疫組化法對(duì)關(guān)節(jié)軟骨及滑膜中金屬蛋白酶-3(MMP-3)的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),探討骨碎補(bǔ)總黃酮治療骨性關(guān)節(jié)炎的機(jī)制,為今后臨床應(yīng)用骨碎補(bǔ)總黃酮治療骨性關(guān)節(jié)炎提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1材料和方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物6月齡新西蘭大白兔32只,雌雄不限,平均體重(2.0±0.2)kg,由徐州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。室溫下飼養(yǎng),

6、自由攝食、飲水。1.2主要試劑和設(shè)備骨碎補(bǔ)總黃酮膠囊(北京歧黃制藥公司,0.25g/粒),維固力(愛爾蘭羅達(dá)藥廠,0.25g/粒),光學(xué)顯微鏡(OLYMPUS),自動(dòng)包埋機(jī)及石蠟切片機(jī)(LEICA),MMP-3免疫組化檢測(cè)試劑盒(武漢博士德)。1.3動(dòng)物OA模型制備采用膝關(guān)節(jié)伸直位制動(dòng)法制作兔膝骨關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型,將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的左膝用石膏固定于伸直位,6周后去除石膏。建模成功標(biāo)準(zhǔn):造模側(cè)膝關(guān)節(jié)間隙較健側(cè)變窄,患膝關(guān)節(jié)主、被動(dòng)活動(dòng)受限;大體解剖可見關(guān)節(jié)滑膜充血,關(guān)節(jié)表面失去光澤、粗糙、潰瘍形成;鏡下滑膜細(xì)胞增生、滑膜下層纖維增生。此動(dòng)物

7、OA模型的病理學(xué)變化與人類OA相似。1.4動(dòng)物分組及處理32只新西蘭大白兔隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、骨碎補(bǔ)總黃酮組和維固力組,每組8只。模型動(dòng)物去除石膏即日開始灌胃給藥,每日1次,共計(jì)8周。骨碎補(bǔ)總黃酮與維固力2種藥物制成溶液,每日用量根據(jù)Meeh-Rubner公式A=K×W2/3×10-4計(jì)算,按成人(60kg)體表面積與家兔體表面積換算。正常對(duì)照組每日以生理鹽水6ml·kg-1灌胃;模型對(duì)照組每日以生理鹽水6ml·kg-1灌胃;骨碎補(bǔ)總黃酮組每日按35mg·kg-1劑量給予骨碎補(bǔ)總黃酮溶液(6g·L-1)灌胃,相當(dāng)于成人

8、劑量0.75g·d-1;維固力組每日按69mg·kg-1劑量給予維固力溶液(12g·L-1)灌胃,相當(dāng)于成人劑量1.5g·d-1。灌胃給藥8周后,耳緣靜脈栓塞法處死動(dòng)物。取膝關(guān)節(jié)股骨髁及部分滑車部位的軟骨和滑膜制作光鏡標(biāo)本,常規(guī)蘇木精-伊紅染色,中

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