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1、Shh基因在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義作者：云建劉蛟陳強(qiáng)譜歐琨管清海夏國(guó)華汪謙【摘要】目的探討sonichedgehog(Shh)基因在肝細(xì)胞癌(HCC)中的表達(dá)及其臨床意義。方法采用組織芯片技術(shù)和免疫組化(ABC?HRP)法對(duì)150例HCC手術(shù)切除標(biāo)本進(jìn)行Shh檢測(cè)，評(píng)估Shh的表達(dá)與HCC臨床病理的關(guān)系。結(jié)果150例肝癌組織，脫片9例，139例中39例有高表達(dá)(％);25例癌旁肝組織無(wú)脫片，陽(yáng)性表達(dá)3例(％);二者比較有顯著性差異(POoShh陽(yáng)性表達(dá)與HCC的轉(zhuǎn)移、淋巴浸潤(rùn)、包膜形成及細(xì)胞分化密切相關(guān)(P<)。結(jié)論
2、Shh檢測(cè)對(duì)判斷HCC的轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)及預(yù)后具有意義?！娟P(guān)鍵詞】肝腫瘤Sonichedghog基因[Abstract]0bjectiveToinvestigatetheeffectofsonichedgehoggeneontheinvasion,metastasisandprognosisofhepatocellularcarcinoma(HCC).Methodslmmunohistochemistryandtissuemarraytechniquewereusedtoevaluatetheexpressionofson
3、ichedgehoggene，andtherelationshipbetweenitsexpressionandtheclinicopathologicalprognosticparameterswasanalyzedin150HCC.ResultsTheresultsshowedthatthepositiveexpressionrateofpatchedgeneinHCCtissue(n=139)was%,butthatinnormallivertissuewas%.Theexpressionwassignific
4、antlyhigherinHCCthanthatinnormallivertissue.ThepositiverateofShhgenewascorrelatedwithlymphnodeinvasion,capsule，metastasis(intra?orextra?hepaticmetastasis)andpathologicalTheseresultssuggestthatShhgenemayplayimportantrolesintheinvasion,metastasisandprognosisofHCC
5、.【Keywords】hepatictumor,sonichedgehoggeneSonichedgehog(Shh)基因與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展關(guān)系密切。我們采用組織芯片技術(shù)和免疫組化(ABC?HRP)法對(duì)150例肝細(xì)胞癌(HCC)手術(shù)切除標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，研究Shh基因表達(dá)與HCC臨床病理的關(guān)系，旨在探討其在HCC的轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)及預(yù)后判斷中的作用，現(xiàn)報(bào)告如下。1材料與方法材料標(biāo)本來(lái)自本院1993—1997年手術(shù)切除的HCC150例，肝癌癌旁組織25例為對(duì)照，患者術(shù)前未行放療、化療。標(biāo)本在甲醛中浸泡8?12h后石蠟包埋。150
6、例中，脫片11例；參檢的139例中，男115例，女24例；年齡24?77歲。有肝外轉(zhuǎn)移者占％(42/139)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者占％(15/139)。對(duì)照組25例組織取自腫瘤邊緣外部位，并經(jīng)HE染色，病理切片證實(shí)無(wú)癌變。組織微陣列制備蠟塊用組織芯片儀（MD）制作。150例腫瘤組織和25例癌旁組織每例放入兩孔，孔直徑mm。制作芯片時(shí)參考HE染色玻片，選擇最有代表性區(qū)域取組織。小心切片（厚約6um）固定在顯微鏡的玻片上。HE染色的組織芯片供形態(tài)學(xué)參考。免疫組化石蠟包埋的組織芯片經(jīng)脫蠟，％H20210min阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化酶活
7、性。微波爐抗原熱修復(fù)處理（700WX20min）。山羊血清封閉非特異性抗原，滴加一抗4°C過(guò)夜，然后滴加生物素化羊抗鼠/兔IgG，37°C孵育30min。DAB顯色后，蘇木素復(fù)染細(xì)胞核，脫水樹膠封固。每項(xiàng)試驗(yàn)都有陰性對(duì)照（缺少一抗）。結(jié)果判定光鏡下以細(xì)胞質(zhì)（膜）呈棕黃色為陽(yáng)性。每例組織芯片隨機(jī)觀察10個(gè)高倍（HPFsX400）視野，胞質(zhì)（膜）呈棕黃色細(xì)胞數(shù)＜10%為0，10%?30%為1，31%?50%為2，＞50%為3。對(duì)照組Shh染色程度1為正常。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用Fisher精確計(jì)算法或x2檢驗(yàn)。P＜為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)
8、意義。2結(jié)果Shh在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)139例HCC中，39例陽(yáng)性表達(dá)；25例癌旁組織中，3例（12%）陽(yáng)性表達(dá)。兩者比較，有顯著性差異（P＜）。Shh表達(dá)水平和HCC臨床病理特征的關(guān)系見表1。Shh陽(yáng)性表達(dá)率與HCC的淋巴浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移、包膜形成、腫瘤分化明顯相關(guān)(分別為P=，P=，P=)，而與性別、年齡、腫瘤大小及腫瘤分期無(wú)明顯關(guān)系。表IShh表
