短波近紅外光譜法測(cè)定葛根中總異黃酮含量

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1、短波近紅外光譜法測(cè)定葛根中總異黃酮含量【摘要】目的建立短波近紅外光譜法測(cè)定葛根中總異黃酮含量的方法。方法應(yīng)用吸光光度法測(cè)定葛根中總異黃酮的含量,并在此基礎(chǔ)上建立葛根中總異黃酮含量的短波近紅外數(shù)學(xué)模型。結(jié)果在850~1100nm分析譜區(qū)內(nèi),建模樣品集的標(biāo)準(zhǔn)值與短波近紅外預(yù)測(cè)值的相關(guān)系數(shù)r=0.981,檢驗(yàn)樣品集的標(biāo)準(zhǔn)值與短波近紅外預(yù)測(cè)值的相關(guān)系數(shù)r=0.972。結(jié)論應(yīng)用短波近紅外光譜法測(cè)定葛根中總異黃酮含量的方法是可行的。【關(guān)鍵詞】短波近紅外光譜法葛根總異黃酮  Abstract:ObjectiveTodeterminethecontentoftotalisoflavonesofP

2、.lobatabyshort.MethodsTakingthecontentoftotalisoflavonesofP.lobatabyspectrephotometryasthereferencevalue,athematicalmodelofthecontentoftotalisoflavonesofP.lobata.Results850~1100nmonstratedthatthecorrelationbetodelingsamplesetandtheshortplesetandtheshortinationofthecontentoftotalisoflanonesofP

3、.lobatabyshortisfeasible.  Key;P.lobata;Totalisoflavones葛根為常用中藥,其主要有效成分為異黃酮[1]。葛根中的總異黃酮成分一般是利用紫外250nm處的吸收進(jìn)行比色[2~6],但前處理較復(fù)雜,需要時(shí)間較長(zhǎng)。而原料質(zhì)量的好壞直接關(guān)系到產(chǎn)品的質(zhì)量和企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益,因此生產(chǎn)上迫切需要快速、簡(jiǎn)便的分析方法。近紅外光是指波長(zhǎng)介于可見(jiàn)區(qū)與中紅外區(qū)的電磁波,其波長(zhǎng)范圍約為0.8~2.5μm,波數(shù)范圍約為12500~4000cm-1。在實(shí)際應(yīng)用中通常把近紅外譜區(qū)分為兩段,即800~1100nm的短波近紅外譜區(qū)和1100~2500nm的中長(zhǎng)波近

4、紅外譜區(qū)。短波近紅外譜區(qū)更適合做透射分析,故又叫近紅外透射區(qū),中長(zhǎng)波近紅外區(qū)更適合做反射或漫反射分析,故又叫近紅外反射區(qū)。近紅外光譜分析的最大特點(diǎn)是對(duì)樣品無(wú)破壞性、操作簡(jiǎn)便、分析迅速,采用近紅外透射、散射、漫反射法可直接對(duì)樣品進(jìn)行分析[7]。用中長(zhǎng)波近紅外光譜法測(cè)定葛根中總異黃酮等成分的含量已有研究[1],作者使用的是德國(guó)BRUKER儀器公司生產(chǎn)的VECTOR22/N傅立葉變換近紅外光譜儀,但是由于該儀器的價(jià)格昂貴,在實(shí)際應(yīng)用和普及中有一定的局限性。利用我國(guó)自行設(shè)計(jì)研發(fā)的短波近紅外光譜儀(國(guó)家“十五”科技專項(xiàng)),來(lái)建立快速檢測(cè)葛根中總異黃酮含量的數(shù)學(xué)模型,以探索其實(shí)際應(yīng)用可行性。

5、現(xiàn)報(bào)道如下?! ?器材  1.1儀器短波近紅外谷物分析儀(CCD陣列硅檢測(cè)器、波長(zhǎng)范圍為650~1100nm),北京世農(nóng)綠方高新技術(shù)發(fā)展中心;UV8500型紫外可見(jiàn)光光度計(jì),上海天美科學(xué)儀器公司;Glanzg,用無(wú)水乙醇定容至25ml,即為母液。按照表1要求移取母液和無(wú)水乙醇,用蒸餾水定容至10ml,配成標(biāo)準(zhǔn)溶液。于紫外分光光度計(jì)250nm處測(cè)其吸光度,以葛根素計(jì)算總異黃酮的含量,以其吸光度對(duì)葛根素濃度作圖,其線性回歸方程為:Y=9.0947X+0.0603,相關(guān)系數(shù)r=0.9998,線性范圍為0~19.20μg/ml。表1標(biāo)準(zhǔn)溶液配制體積比例(略)  2.2葛根中總異黃酮含量的

6、測(cè)定將葛根粉末樣品置烘箱中于80℃下烘4h,精密稱取葛根粉末樣品0.2g,置于50ml三角瓶中,加入70%乙醇10ml,稱重,微波加熱60s,取出冷卻,再處理60s,取出冷卻,稱重,補(bǔ)足損失重量,混勻。取0.2ml于25ml試管中,加入無(wú)水乙醇2.5ml,定容至刻度,作為供試品溶液。于紫外分光光度計(jì)250nm處測(cè)供試品溶液吸光度,計(jì)算葛根樣品中總異黃酮的百分含量,作為其標(biāo)準(zhǔn)值?! ?.3葛根中總黃酮含量的近紅外光譜法測(cè)定將葛根粉末樣品不經(jīng)任何化學(xué)預(yù)處理,直接進(jìn)行近紅外光譜的測(cè)定。測(cè)定的方法是將樣品置于一可旋轉(zhuǎn)的直徑為5cm,光程為3mm的圓柱狀樣品池中,使樣品的松緊度基本保持一致

7、,掃描區(qū)間為800~1100nm,掃描分辨率為8cm-1。將已測(cè)得化學(xué)值的葛根樣品光譜分成兩組,一組為建模集樣品,用以建立總異黃酮的近紅外分析數(shù)學(xué)模型。一組為檢驗(yàn)集樣品,用以檢驗(yàn)所建模型的效果。利用PLS法建立建模集樣品圖譜和葛根總異黃酮含量之間的數(shù)學(xué)模型。由于波長(zhǎng)處于800~850nm時(shí)儀器噪聲較大,通過(guò)對(duì)模型的優(yōu)化,確定選取850~1100nm作為分析譜區(qū),采用中心化和一階導(dǎo)數(shù)法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理。所建模型和預(yù)測(cè)模型可以用化學(xué)值和近紅外預(yù)測(cè)值的相關(guān)系數(shù)(R)和標(biāo)準(zhǔn)差兩個(gè)指標(biāo)來(lái)共

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