短波近紅外光譜法測定葛根中總異黃酮含量論文

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1、短波近紅外光譜法測定葛根中總異黃酮含量論文【摘要】目的建立短波近紅外光譜法測定葛根中總異黃酮含量的方法。方法應(yīng)用吸光光度法測定葛根中總異黃酮的含量,并在此基礎(chǔ)上建立葛根中總異黃酮含量的短波近紅外數(shù)學(xué)模型。結(jié)果在850~1100nm分析譜區(qū)內(nèi),建模樣品集的標(biāo)準(zhǔn)值與短波近紅外預(yù)測值的相關(guān)系數(shù)r=0.981,檢驗樣品集的標(biāo)準(zhǔn)值與短波近紅外預(yù)測值的相關(guān)系數(shù)r=0.972。結(jié)論應(yīng)用短波近紅外光譜法測定葛根中總異黃酮含量的方法是可行的?!娟P(guān)鍵詞】短波近紅外光譜法葛根總異黃酮Abstract:ObjectiveTodetermi

2、nethecontentoftotalisoflavonesofP.lobatabyshort.MethodsTakingthecontentoftotalisoflavonesofP.lobatabyspectrephotometryasthereferencevalue,athematicalmodelofthecontentoftotalisoflavonesofP.lobata.Results850~1100nmonstratedthatthecorrelationbetodelingsamplesetan

3、dtheshortplesetandtheshortinationofthecontentoftotalisoflanonesofP.lobatabyshortisfeasible.Key;P.lobata;Totalisoflavones葛根為常用中藥,其主要有效成分為異黃酮[1]。葛根中的總異黃酮成分一般是利用紫外250nm處的吸收進行比色[2~6],但前處理較復(fù)雜,需要時間較長。而原料質(zhì)量的好壞直接關(guān)系到產(chǎn)品的質(zhì)量和企業(yè)的經(jīng)濟效益,因此生產(chǎn)上迫切需要快速、簡便的分析方法。近紅外光是指波長介于可見區(qū)與中紅外區(qū)的

4、電磁波,其波長范圍約為0.8~2.5μm.freel-1。在實際應(yīng)用中通常把近紅外譜區(qū)分為兩段,即800~1100nm的短波近紅外譜區(qū)和1100~2500nm的中長波近紅外譜區(qū)。短波近紅外譜區(qū)更適合做透射分析,故又叫近紅外透射區(qū),中長波近紅外區(qū)更適合做反射或漫反射分析,故又叫近紅外反射區(qū)。近紅外光譜分析的最大特點是對樣品無破壞性、操作簡便、分析迅速,采用近紅外透射、散射、漫反射法可直接對樣品進行分析[7]。用中長波近紅外光譜法測定葛根中總異黃酮等成分的含量已有研究[1],作者使用的是德國BRUKER儀器公司生產(chǎn)的V

5、ECTOR22/N傅立葉變換近紅外光譜儀,但是由于該儀器的價格昂貴,在實際應(yīng)用和普及中有一定的局限性。利用我國自行設(shè)計研發(fā)的短波近紅外光譜儀(國家“十五”科技專項),來建立快速檢測葛根中總異黃酮含量的數(shù)學(xué)模型,以探索其實際應(yīng)用可行性?,F(xiàn)報道如下。1器材1.1儀器短波近紅外谷物分析儀(CCD陣列硅檢測器、波長范圍為650~1100nm),北京世農(nóng)綠方高新技術(shù)發(fā)展中心;UV8500型紫外可見光光度計,上海天美科學(xué)儀器公司;Glanzg,用無水乙醇定容至25ml,即為母液。按照表1要求移取母液和無水乙醇,用蒸餾水定容至1

6、0ml,配成標(biāo)準(zhǔn)溶液。于紫外分光光度計250nm處測其吸光度,以葛根素計算總異黃酮的含量,以其吸光度對葛根素濃度作圖,其線性回歸方程為:Y=9.0947X+0.0603,相關(guān)系數(shù)r=0.9998,線性范圍為0~19.20μg/ml。表1標(biāo)準(zhǔn)溶液配制體積比例(略)2.2葛根中總異黃酮含量的測定將葛根粉末樣品置烘箱中于80℃下烘4h,精密稱取葛根粉末樣品0.2g,置于50ml三角瓶中,加入70%乙醇10ml,稱重,微波加熱60s,取出冷卻,再處理60s,取出冷卻,稱重,補足損失重量,混勻。取0.2ml于25ml試管中,

7、加入無水乙醇2.5ml,定容至刻度,作為供試品溶液。于紫外分光光度計250nm處測供試品溶液吸光度,計算葛根樣品中總異黃酮的百分含量,作為其標(biāo)準(zhǔn)值。2.3葛根中總黃酮含量的近紅外光譜法測定將葛根粉末樣品不經(jīng)任何化學(xué)預(yù)處理,直接進行近紅外光譜的測定。測定的方法是將樣品置于一可旋轉(zhuǎn)的直徑為5cm,光程為3mm的圓柱狀樣品池中,使樣品的松緊度基本保持一致,掃描區(qū)間為800~1100nm,掃描分辨率為8cm-1。將已測得化學(xué)值的葛根樣品光譜分成兩組,一組為建模集樣品,用以建立總異黃酮的近紅外分析數(shù)學(xué)模型。一組為檢驗集樣品,

8、用以檢驗所建模型的效果。利用PLS法建立建模集樣品圖譜和葛根總異黃酮含量之間的數(shù)學(xué)模型。由于波長處于800~850nm時儀器噪聲較大,通過對模型的優(yōu)化,確定選取850~1100nm作為分析譜區(qū),采用中心化和一階導(dǎo)數(shù)法對數(shù)據(jù)進行預(yù)處理。所建模型和預(yù)測模型可以用化學(xué)值和近紅外預(yù)測值的相關(guān)系數(shù)(R)和標(biāo)準(zhǔn)差兩個指標(biāo)來共同評價,結(jié)果見表2。表2葛根中總異黃酮建模集和

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