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《不同品種葛根中葛根素及總黃酮的含量測(cè)定》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、不同品種葛根中葛根素及總黃酮的含量測(cè)定作者:王言才段金廒華永慶宿樹(shù)蘭【摘要】 目的建立不同品種葛根中葛根素及總黃酮的含量測(cè)定方法。方法采用RP-HPLC法,以甲醇-水(32∶68)為流動(dòng)相,檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm測(cè)葛根素含量;紫外分光光度法測(cè)柴葛、粉葛中總黃酮含量。結(jié)果葛根素峰分離度提高,峰形改善;葛根素0.204~2.04μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好(r=0.9999),回收率為98.7%(n=5),精密度RSD=0.86%??傸S酮濃度在4.08~16.32μg/ml范圍內(nèi)與吸收度線性關(guān)系良好(
2、r=0.9998)。結(jié)論該法靈敏、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便易行,重復(fù)性好,可用于中藥葛根藥材及飲片的質(zhì)量控制?!娟P(guān)鍵詞】柴葛粉葛葛根素總黃酮高效液相色譜 Abstract:ObjectiveTostudythedeterminationmethodofpuerarinandisoflavonesinPuerarialobata(ethodsTheseparationedonRPHPLCobilephaseofCH3OH-H2O(32∶68V/V)solutionandthedetectionforthedet
3、erminationofPueraria.UV-spectrophotometryforthedeterminationofisoflavones.ResultsPuerarinandotherpeaksl(r=0.9998).ConclusionThismethodissensitive,accurateandreproducible.ItcanbeusedasthequalitycontrolmethodofPuerarialobataanddrug. Keysonii;Pueraria;is
4、oflavones;HPLC 葛根為豆科植物柴葛Puerarialobata(illenium數(shù)據(jù)處理系統(tǒng);m×250mm,5μm);流動(dòng)相∶甲醇-水(32∶68);流速1ml/min;檢測(cè)波長(zhǎng)250nm;柱溫22℃;進(jìn)樣體積10μl。理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算不低于5000。在該色譜條件下,樣品中的葛根素與其它峰均能達(dá)到基線分離,保留時(shí)間在14.3min左右,對(duì)照品與樣品的色譜圖見(jiàn)圖1?! D1對(duì)照品Ⅰ、柴葛索氏提取Ⅱ、粉葛索氏提取Ⅲ的HPLC色譜圖(略) 2.1.2對(duì)照品溶液的制備精密稱取葛根素
5、對(duì)照品5.1mg,甲醇定容于25ml量瓶。分別移取0.5,1.0,2.0,2.5ml于5ml量瓶,水定容,與原液共同作為HPLC用對(duì)照品溶液?! ?.1.3供試品溶液的制備 熱回流提取法:精密稱取柴葛、粉葛粉末(過(guò)50目篩)各0.1g,置具塞錐形瓶中,精密加入30%乙醇50ml,稱重。回流提取30min,放冷,稱重并以30%乙醇補(bǔ)足減失重量,搖勻過(guò)濾,取續(xù)濾液為供試品,待測(cè)。 索氏提取法:稱取柴葛、粉葛粉末各0.5g,精密稱定,以甲醇為提取劑提取4h,過(guò)濾,濃縮提取液并用甲醇定容于10ml量瓶。
6、超聲處理30min,取上清液以水定容于10ml量瓶,待測(cè)?! ?.1.4線性關(guān)系考察取對(duì)照品溶液,按照“2.1.1”色譜條件進(jìn)樣10μl,葛根素進(jìn)樣量X(μg)為橫坐標(biāo),以峰面積Y為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,其回歸方程為:Y=3.5076×106X+3.2745×104,r=0.9999。結(jié)果表明,葛根素進(jìn)樣量在0.204~2.04μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好,可用外標(biāo)兩點(diǎn)法計(jì)算含量?! ?.1.5精密度考察在“2.1.1”項(xiàng)色譜條件下,吸取同一對(duì)照品溶液10μl,連續(xù)進(jìn)樣5次,測(cè)得峰面積,RSD=0.
7、8%,表明進(jìn)樣與峰面積積分的精密度良好?! ?.1.6重復(fù)性考察取同一批柴葛、粉葛樣品5份,按“2.1.3”項(xiàng)下的方法制樣后,以“2.1.1”項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣10μl,測(cè)定葛根素的峰面積,按外標(biāo)法計(jì)算含量,RSD=2.8%,表明分析方法重復(fù)性良好?! ?.1.7穩(wěn)定性考察精密吸取對(duì)照品溶液10μl,分別在0,1,2,4,8,12,24,48h時(shí)進(jìn)樣,在“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件下測(cè)定峰面積,其RSD值為1.4%。表明葛根素在室內(nèi)正常條件下48h內(nèi)穩(wěn)定,因此整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程可以在常溫不避光的條件下操作?! ?/p>
8、2.1.8回收率考察精密稱取已知葛根素含量的同一樣品藥材粉末5份,20mg/份,精密稱定后,每份加入濃度為0.204mg/ml的對(duì)照品溶液2.5~3.3ml,按“供試品溶液制備”項(xiàng)下操作,精密吸取10μl,進(jìn)樣,計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表1?! ”?加樣回收率測(cè)定結(jié)果(略) 2.1.9樣品測(cè)定按“供試品溶液制備”項(xiàng)下操作,制備各樣品溶液,精密吸取10μl,進(jìn)樣,在所選色譜條件下測(cè)定,外標(biāo)兩點(diǎn)法計(jì)算含量,結(jié)果見(jiàn)表2?! ”?樣品中葛根素測(cè)定結(jié)果(略) 2.2紫外分光光度法