不同品種葛根中葛根素及總黃酮的含量測(cè)定

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1、不同品種葛根中葛根素及總黃酮的含量測(cè)定作者：王言才段金廒華永慶宿樹(shù)蘭【摘要】　　目的建立不同品種葛根中葛根素及總黃酮的含量測(cè)定方法。方法采用RP-HPLC法，以甲醇-水（32∶68）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm測(cè)葛根素含量；紫外分光光度法測(cè)柴葛、粉葛中總黃酮含量。結(jié)果葛根素峰分離度提高，峰形改善；葛根素0.204～2.04μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好（r=0.9999），回收率為98.7%(n=5)，精密度RSD=0.86%?？傸S酮濃度在4.08～16.32μg/ml范圍內(nèi)與吸收度線性關(guān)系良好（

2、r=0.9998)。結(jié)論該法靈敏、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便易行,重復(fù)性好,可用于中藥葛根藥材及飲片的質(zhì)量控制?！娟P(guān)鍵詞】柴葛粉葛葛根素總黃酮高效液相色譜　　Abstract:ObjectiveTostudythedeterminationmethodofpuerarinandisoflavonesinPuerarialobata(ethodsTheseparationedonRPHPLCobilephaseofCH3OH-H2O(32∶68V/V)solutionandthedetectionforthedet

3、erminationofPueraria.UV-spectrophotometryforthedeterminationofisoflavones.ResultsPuerarinandotherpeaksl(r=0.9998).ConclusionThismethodissensitive,accurateandreproducible.ItcanbeusedasthequalitycontrolmethodofPuerarialobataanddrug.　　Keysonii；Pueraria；is

4、oflavones；HPLC　　葛根為豆科植物柴葛Puerarialobata(illenium數(shù)據(jù)處理系統(tǒng);m×250mm,5μm)；流動(dòng)相∶甲醇-水（32∶68）；流速1ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)250nm；柱溫22℃；進(jìn)樣體積10μl。理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算不低于5000。在該色譜條件下，樣品中的葛根素與其它峰均能達(dá)到基線分離，保留時(shí)間在14.3min左右，對(duì)照品與樣品的色譜圖見(jiàn)圖1?！　D1對(duì)照品Ⅰ、柴葛索氏提取Ⅱ、粉葛索氏提取Ⅲ的HPLC色譜圖（略）　　2.1.2對(duì)照品溶液的制備精密稱取葛根素

5、對(duì)照品5.1mg，甲醇定容于25ml量瓶。分別移取0.5，1.0，2.0，2.5ml于5ml量瓶，水定容，與原液共同作為HPLC用對(duì)照品溶液?！　?.1.3供試品溶液的制備　　熱回流提取法：精密稱取柴葛、粉葛粉末（過(guò)50目篩）各0.1g，置具塞錐形瓶中，精密加入30%乙醇50ml，稱重。回流提取30min，放冷，稱重并以30%乙醇補(bǔ)足減失重量，搖勻過(guò)濾，取續(xù)濾液為供試品，待測(cè)。　　索氏提取法：稱取柴葛、粉葛粉末各0.5g,精密稱定，以甲醇為提取劑提取4h，過(guò)濾，濃縮提取液并用甲醇定容于10ml量瓶。

6、超聲處理30min，取上清液以水定容于10ml量瓶，待測(cè)?！　?.1.4線性關(guān)系考察取對(duì)照品溶液，按照“2.1.1”色譜條件進(jìn)樣10μl，葛根素進(jìn)樣量X(μg)為橫坐標(biāo)，以峰面積Y為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程為：Y=3.5076×106X+3.2745×104，r=0.9999。結(jié)果表明，葛根素進(jìn)樣量在0.204～2.04μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好，可用外標(biāo)兩點(diǎn)法計(jì)算含量?！　?.1.5精密度考察在“2.1.1”項(xiàng)色譜條件下，吸取同一對(duì)照品溶液10μl，連續(xù)進(jìn)樣5次，測(cè)得峰面積，RSD=0.

7、8%，表明進(jìn)樣與峰面積積分的精密度良好?！　?.1.6重復(fù)性考察取同一批柴葛、粉葛樣品5份，按“2.1.3”項(xiàng)下的方法制樣后，以“2.1.1”項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣10μl，測(cè)定葛根素的峰面積，按外標(biāo)法計(jì)算含量，RSD=2.8%，表明分析方法重復(fù)性良好?！　?.1.7穩(wěn)定性考察精密吸取對(duì)照品溶液10μl，分別在0，1，2，4，8，12，24，48h時(shí)進(jìn)樣，在“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件下測(cè)定峰面積，其RSD值為1.4%。表明葛根素在室內(nèi)正常條件下48h內(nèi)穩(wěn)定，因此整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程可以在常溫不避光的條件下操作?！　?/p>

8、2.1.8回收率考察精密稱取已知葛根素含量的同一樣品藥材粉末5份，20mg/份，精密稱定后，每份加入濃度為0.204mg/ml的對(duì)照品溶液2.5～3.3ml，按“供試品溶液制備”項(xiàng)下操作，精密吸取10μl，進(jìn)樣，計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表1?！　”?加樣回收率測(cè)定結(jié)果（略）　　2.1.9樣品測(cè)定按“供試品溶液制備”項(xiàng)下操作，制備各樣品溶液，精密吸取10μl，進(jìn)樣，在所選色譜條件下測(cè)定，外標(biāo)兩點(diǎn)法計(jì)算含量，結(jié)果見(jiàn)表2?！　”?樣品中葛根素測(cè)定結(jié)果（略）　　2.2紫外分光光度法