養(yǎng)血定顫方對帕金森病大鼠行為學、多巴胺能神經(jīng)元和自由基損傷的影響

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1、養(yǎng)血定顫方對帕金森病大鼠行為學、多巴胺能神經(jīng)元和自由基損傷的影響【摘要】目的：探討?zhàn)B血定顫方治療帕金森病的作用及機制。方法：采用6羥基多巴胺單點注射法制備帕金森病大鼠模型,考察養(yǎng)血定顫方對模型大鼠平均轉(zhuǎn)速、TH陽性細胞數(shù)和自由基損傷的影響。結果：養(yǎng)血定顫方能顯著降低平均轉(zhuǎn)速，增加黑質(zhì)TH陽性細胞，降低MDA水平,提高SOD、GSH水平。結論：養(yǎng)血定顫方能改善帕金森病大鼠旋轉(zhuǎn)行為，保護受損神經(jīng)元，其機制與減少自由基損傷有關?！娟P鍵詞】帕金森病行為學多巴胺能神經(jīng)元自由基損傷養(yǎng)血定顫方　帕金森病是一種常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性性疾病，其病理特征是中腦黑質(zhì)致密部多巴胺能神經(jīng)元變性缺失。多巴替代療法

2、雖能改善臨床癥狀，但長期應用會出現(xiàn)“開—關”現(xiàn)象、運動及精神障礙等副作用,且仍無法延緩多巴胺能神經(jīng)元進行性缺失〔1〕，因此尋求新的有效治療手段具有重要意義。養(yǎng)血定顫方系導師張伯禮教授所創(chuàng)新方，治療帕金森病有較好療效，本研究旨在觀察該方對帕金森病大鼠行為學、受損神經(jīng)元和自由基損傷的影響，為臨床進一步應用提供科學依據(jù)。　　1材料與方法　　1.1材料實驗動物DA、SOD、GSH試劑盒(南京建成生物工程研究所)。儀器：江灣II型立體定位儀(第二軍醫(yī)大學)，微量進樣器(安亭微量進樣器廠)，病理圖文分析系統(tǒng)(千屏影像工程公司)。　　1.2方法模型藥物配制:以0.01%VC溶液配制3μg/μL6羥基

3、多巴胺，避光冷藏；模型制備DA、GSH含量和SOD活性?！　〗y(tǒng)計學處理：所有描述性參數(shù)以均數(shù)±標準差表示，組間比較采用方差分析。用SPSS13.0軟件包進行分析，P0.05為差異有顯著性。　　2實驗結果　　2.1各組大鼠平均轉(zhuǎn)速比較見表1?！　”?各組大鼠平均轉(zhuǎn)速比較（略）　　注：與模型組比較##P0.01　　2.2TH免疫組化染色鏡下可見棕色陽性物位于胞漿及突起，正常組細胞飽滿，突起完整；模型組突起變短，胞體變圓；養(yǎng)血定顫方組有明顯改善，見圖14。各組大鼠TH陽性細胞數(shù)目比較，見表2?！　D1正常組TH免疫組化（略）　　圖2模型組TH免疫組化（略）　　圖3美多芭組TH免疫組化（略）　

4、　圖4養(yǎng)血定顫方組TH免疫組化（略）　　表2各組大鼠TH陽性細胞數(shù)比較（略）　　注：與正常組比較##P0.01，與模型組比較△△P0.01　　2.3各組大鼠黑質(zhì)MDA、SOD、GSH比較見表3?！　”?各組大鼠黑質(zhì)MDA、SOD、GSH比較（略）　　注:與正常組比較##P0.01,與模型組比較△△P0.01　　3討論　　　　帕金森病(Parkinsonsdisease，PD)是老年人常見的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，60歲以上約1%患本病，主要表現(xiàn)為靜止性震顫、僵直、少動、姿勢障礙等癥狀。帕金森病的內(nèi)源性氧自由基中毒假說是由于氧自由基清除系統(tǒng)的缺陷，使黑質(zhì)、紋狀體中氧自由基堆積，過量自由基可以

5、引起生物膜上的不飽和脂肪酸形成過氧化脂質(zhì)，導致膜流動性降低、通透性增高、線粒體腫脹、溶酶體釋放生物酶、細胞器及酶的結構和功能破壞，脂質(zhì)過氧化物活性增加，生成大量丙二醛，同時引起超氧化物歧化酶活力下降，進一步加重腦組織損傷，以致黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元受損而進行性退變〔3〕?！　《喟桶诽娲煼ㄊ鞘走x療法，但多數(shù)患者隨著治療時間的延長，藥物有效時間會逐漸縮短，終至完全失效〔4〕。因此尋找新的安全有效的治療手段具有重要意義?！　　　○B(yǎng)血定顫方系導師結合多年臨床經(jīng)驗和實驗研究成果精心錘煉而成，方中地黃生用，甘寒質(zhì)潤，為補腎要藥，白芍養(yǎng)血柔肝、緩急止痛，地、芍合用，酸甘化陰，壯水涵木為君；川芎辛散溫通，血

6、中氣藥，助白芍養(yǎng)血，鱉甲咸寒，血肉有情之品，助生地黃滋陰，共為臣藥，全蝎、蟬蛻、僵蠶諸蟲藥入絡搜剔、息風止痙，桑葉、刺蒺藜、珍珠母平肝潛陽，俱為佐使藥，諸藥合用，滋陰養(yǎng)血以固其本，定痙止顫以蠲其標，并酌加蟲類藥息風通絡，治療帕金森病有一定療效，尤其在改善震顫癥狀、提高患者生活質(zhì)量等方面療效顯著〔56〕?！　　　”狙芯坎捎脝吸c注射法制備帕金森病模型，從模型大鼠平均轉(zhuǎn)速、TH陽性細胞數(shù)和自由基損傷等方面考察養(yǎng)血定顫方治療帕金森病的作用及機制。結果表明養(yǎng)血定顫方能顯著降低平均轉(zhuǎn)速，增加黑質(zhì)TH陽性細胞，降低MDA水平，提高SOD、GSH水平。上述結果提示養(yǎng)血定顫方能改善帕金森病大鼠旋轉(zhuǎn)行為，

7、保護受損神經(jīng)元，其機制與減少自由基損傷有關。【