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《反相高效液相色譜法測(cè)定絞股藍(lán)50%總皂苷提取物中蘆丁和槲皮素的含量》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、反相高效液相色譜法測(cè)定絞股藍(lán)50%總皂苷提取物中蘆丁和槲皮素的含量作者：盧金清，喻樊，田耀平，肖波，陳黎，徐玉婷，詹曉蓮【關(guān)鍵詞】絞股藍(lán)50%總皂苷提取物；,,蘆??；,,槲皮素；,,反相高效液相色譜法, 摘要：目的建立絞股藍(lán)50%總皂苷提取物中蘆丁與槲皮素的含量測(cè)定方法。方法采用高效液相色譜儀，使用TURNERKromasilTMC18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm），流動(dòng)相為0.4%磷酸水溶液甲醇乙腈進(jìn)行梯度洗脫，流速為0.5ml・min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)為360nm；柱溫為40℃。結(jié)果蘆丁在0.37~3
2、.70μg范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，r=0.9999。槲皮素在0.05~0.50μg范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，r=0.9999；蘆丁的平均加樣回收率為99.2%，RSD為1.69%；槲皮素的平均加樣回收率為99.1%，RSD為2.21%。結(jié)論該方法簡(jiǎn)便快捷，準(zhǔn)確度高。 關(guān)鍵詞：絞股藍(lán)50%總皂苷提取物；蘆?。婚纹に?；反相高效液相色譜法 DeterminationofRutinandQuercetinin50%TotalGypenosideExtractionofGynostemmabyRPHPLC Abstract：Obje
3、ctiveTodeterminethemainflavonoidsrutinandquercetinin50%totalsaponinsofGynostemmabyRPHPLC.MethodsTheseparationedonTURNERKromasilTMC18column（250mm×4.6mm，5μm），themobilephaseconsistedof0.4%phosphoricacid-methanol-acetonitrile，l・min-1at40℃，theeasurement.ResultsThe
4、calibrationcurvesethodisaccurateandreproducible. Keyma;Rutin;Quercetin;RPHPLC 絞股藍(lán)(Gynostemma)又名七葉膽，是葫蘆科絞股藍(lán)屬植物。該屬植物我國(guó)有14種和3變種［1］?，F(xiàn)代藥理學(xué)證明，絞股藍(lán)具有抑制腫瘤、防止衰老、降低血脂、增強(qiáng)免疫力、鎮(zhèn)靜止痛、保護(hù)心臟和肝臟等作用［2］。絞股藍(lán)50%總皂苷提取物是總皂苷含量達(dá)50%的、一種適用于口服制劑生產(chǎn)的原料藥，它具有很廣的應(yīng)用范圍，故本文采用反相高效液相色譜法，可對(duì)絞股藍(lán)50%總皂苷提取物中的蘆
5、丁、槲皮素等成分進(jìn)行有效的分離和準(zhǔn)確的含量測(cè)定，并且操作簡(jiǎn)便、快速、靈敏度高、重現(xiàn)性好，能為建立絞股藍(lán)50%總皂苷提取物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。 1儀器與試藥 DIONEXP680高效液相色譜儀（四元泵、Chromeleon色譜工作站、UVD170U檢測(cè)器），AT201電子分析天平（d=0.01mg，瑞士），蘆丁對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)0080－9705）、槲皮素對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)081－9003）；甲醇（色譜純，天津大茂化學(xué)儀器供應(yīng)站）、乙腈（色譜純，天津大茂化學(xué)儀器供應(yīng)站），其它試劑均為分析純
6、，水為雙蒸水。絞股藍(lán)原50%總皂苷提取物由湖北中醫(yī)學(xué)院中藥制劑教研室提供?！ ?方法與結(jié)果 2.1色譜條件色譜柱為T(mén)URNERKromasilTM（4.6mm×250mm，5μm）；以0.4%磷酸水溶液為流動(dòng)相A，以甲醇為流動(dòng)相B，以乙腈為流動(dòng)相C；按表1進(jìn)行梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為360nm；流速為0.5ml・min-1，柱溫為40℃。理論板數(shù)按蘆丁、槲皮素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。色譜圖見(jiàn)圖1~4?！ ”?梯度洗脫（略） 圖1蘆丁對(duì)照品HPLC圖譜（略） 圖2槲皮素對(duì)照品HPLC圖譜（略） 圖3絞股藍(lán)50%
7、總皂苷提取物供試品的HPLC圖譜（略） 圖4空白溶劑圖譜（略） 2.2供試品溶液的制備取本品0.2g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱(chēng)定重量，超聲處理30min，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，精密量取20ml，蒸干，殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。 2.3對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取蘆丁對(duì)照品適量，加甲醇制成每毫升含0.368mg的溶液，即得蘆丁對(duì)照品溶液；精密稱(chēng)取槲皮素對(duì)照品適量，加甲醇制成每毫升含0.0548mg的溶液，即得槲皮素對(duì)照品溶液。 2
8、.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別精密吸取蘆丁、槲皮素對(duì)照品溶液1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0μl，注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積值，結(jié)果見(jiàn)表1，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)（X），峰面積為縱坐標(biāo)（Y），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得蘆丁的回歸方程為：y=61.1945x+1.1004，r=0.99
