白芷香豆素的鎮(zhèn)痛作用部位及其機(jī)制

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1、白芷香豆素的鎮(zhèn)痛作用部位及其機(jī)制作者：王海莉王春梅李賀崔新穎【摘要】目的觀察白芷香豆素(CoumarinofAngelicaeDahuricae，CAD)的鎮(zhèn)痛作用部位及其機(jī)制。方法利用小鼠福爾馬林實(shí)驗(yàn)及側(cè)腦室注射CAD對小鼠熱板痛反應(yīng)潛伏期的影響以分析CAD的鎮(zhèn)痛作用部位;觀察CAD對甲醛所致傷害性疼痛模型小鼠血清一氧化氮(NO)和腦組織中β內(nèi)啡肽(βEP)含量的影響。結(jié)果CAD(30，60，120mg/kg)不同程度地抑制了小鼠福爾馬林實(shí)驗(yàn)第一和第二時相反應(yīng)。側(cè)腦室注射CAD(6mg/kg)明顯延長小鼠熱板痛反應(yīng)潛伏期。CAD(30，60，120mg/kg)連續(xù)給藥4d，使甲醛所

2、致傷害性疼痛模型小鼠血清NO含量和腦中βEP含量明顯下降。結(jié)論CAD對物理、化學(xué)等傷害性刺激具有明顯鎮(zhèn)痛作用，作用部位可能既在中樞也在外周，鎮(zhèn)痛機(jī)制可能與抑制NO的合成或釋放有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】白芷香草醛;鎮(zhèn)痛作用;一氧化氮;β內(nèi)啡肽　　【Abstract】ObjectiveToobserveanalgesicsiteandmechanismsunderlyingofCoumarinsofAngdicaeDahuricae(CAD).MethodsTheantinociceptivesiteofCADiceformalintestandmicehotplatetestafterintr

3、acerebroventricular(icv)administration;theconcentrationofnitricoxide(NO)inserumandβEPinbrainofmiceeasuredethodandradioimmunoassay(RIA)respectively.ResultsCAD(30，60，120mg/kg)reducedthefirstandsecondphaseresponsesofmiceformalintestparedeicvadministrationofCAD(6mg/kg)formice，hotplatelatencyandβE

4、Pinbrainofmiceinducedbyformalinayberelatedtocentralandperipheralmechanisms.　　【Keya公司產(chǎn)品;NO試劑盒，由南京建成生物工程研究所提供，批號：20061221;β內(nèi)啡肽放射免疫測定盒，由北京?？其J生物技術(shù)中心提供，批號：070115。　　1.2福爾馬林致痛法〔5〕小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為6組，分別為對照組、嗎啡組、阿司匹林組、CAD低、中、高劑量組。嗎啡組和阿司匹林組腹腔注射(ip)給藥后0.5h，其余各組ip給藥后2h，每鼠右后足跖皮下注射0.25%福爾馬林10μl。分別記錄注射后0～5min(第一

5、時相)和15～30min(第二時相)小鼠舔或抖被注射足的累計(jì)時間，以秒(s)為計(jì)算單位?！　?.3小鼠側(cè)腦室注射法〔6〕小鼠40只，隨機(jī)分為4組，分別為對照組、嗎啡組、CAD組、CAD同容積腹腔注射組。固定小鼠后，使用10μl微量注射器，針頭外連細(xì)長硬塑料管，硬塑料管接4號針頭，使針尖部露出約2.5mm的進(jìn)針長度，于兩耳前緣線與矢狀線交點(diǎn)處的前、外各2mm處進(jìn)針注射0.5%伊文思藍(lán)生理鹽水溶液，注射容積10μl，時間5s，留針10s，處死小鼠，解剖觀察伊文思藍(lán)是否進(jìn)入腦室，以確定注射部位。按上述方法進(jìn)行小鼠側(cè)腦室給藥，然后以熱板法分別測定給藥后5、15、30、45、60min小鼠痛閾，觀

6、察鎮(zhèn)痛效應(yīng)。　　1.4CAD對甲醛所致傷害性疼痛模型小鼠血清NO含量和腦βEP含量的影響小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分5組，分別為陰性對照組、嗎啡組、CAD低、中、高劑量組，每天分別腹腔注射，連續(xù)4d(嗎啡組除外)，末次給藥后(1.5h后陽性組腹腔注射嗎啡10mg/kg)2h，每只鼠右后足跖皮下注射0.25%甲醛溶液20μl，2h后處理〔7〕。將小鼠快速斷頭取血，分離血清，-20℃冰箱保存待測。小鼠頭部立即于冰臺上分離全腦，投入沸生理鹽水中煮4min，取出濾紙吸干、稱重，制備10%腦組織勻漿，取上清液貯存于-20℃保存。采用硝酸還原酶法和放射免疫學(xué)方法分別測定血清中NO含量和腦組織中β

7、EP的含量，具體步驟說明書?！　?.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)以x±s表示，采用SPSS10.1軟件進(jìn)行兩組間t檢驗(yàn)和多組間方差分析?！　?結(jié)果　　2.1CAD對小鼠福爾馬林實(shí)驗(yàn)的影響小鼠一次性腹腔注射給藥CAD30，60，120mg/kg，與對照組比較，CAD中、高劑量組使福爾馬林實(shí)驗(yàn)第一時相內(nèi)舔或抖注射足累計(jì)時間明顯減少(P<0.01),3個劑量組均使第二時相內(nèi)舔或抖注射足累計(jì)時間明顯減少(P<0.05或P<0.01)。