3種中藥對(duì)金黃色葡萄球菌體外抑菌作用的比較

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1、3種中藥對(duì)金黃色葡萄球菌體外抑菌作用的比較【】目的：比較3種中藥對(duì)金黃色葡萄球菌體外抑菌作用。目的：利平皿挖洞灌藥法測(cè)定了大豆異黃酮、檸檬提取物和甘肅金銀花的抑菌活性。結(jié)果：大豆異黃酮、檸檬提取物和甘肅金銀花對(duì)金黃色葡萄球菌均有較為明顯的抑制作用。同時(shí)隨著濃度的增加，中藥的抑菌作用也增強(qiáng)，但達(dá)到一定濃度后，其抑菌作用不再加強(qiáng)。結(jié)論：大豆異黃酮、檸檬提取物和甘肅金銀花都對(duì)多重耐藥金黃色葡萄球菌有明顯的抑制作用，提示其在感染性疾病以及生物膜相關(guān)性疾病的治療中將具有廣闊的應(yīng)用前景。　　【關(guān)鍵詞】大豆異黃酮；檸檬提取物；甘肅金銀花；金黃色葡萄球菌；體外抑菌　

2、　　　眾所周知，金黃色葡萄球菌是醫(yī)院內(nèi)感染常見(jiàn)的病原菌，隨著抗生素的廣泛使用，細(xì)菌的耐藥性問(wèn)題也趨于嚴(yán)重[1]。因此，探求新的不同于抗生素的抗菌藥物對(duì)于改善金黃色葡萄球菌感染性疾病的治療現(xiàn)狀具有重要意義。近年來(lái)許多研究表明中藥的有效提取物具有抑菌的生物活性[2]。因此，本文旨在3種中藥對(duì)金黃色葡萄球菌體外抑菌作用，希望為新型抗菌藥物的開(kāi)發(fā)奠定工作基礎(chǔ)。　　1材料與方法　　1.1實(shí)驗(yàn)材料大豆異黃酮：實(shí)驗(yàn)室從脫脂豆粕中提??；甘肅金銀花(采自甘肅榆中興隆山)；檸檬提取物：由實(shí)驗(yàn)室提供。金黃色葡萄球菌(StaphylococcusaureusATCC2611

3、2)。其濃度分別為0.10g/mL與0.01g/mL?！　?.2實(shí)驗(yàn)方法　　1.2.1菌種培養(yǎng)從活化好的菌種斜面分別沾取少量細(xì)菌、酵母菌的菌苔，將其分別接種在肉湯蛋白胨和麥芽汁培養(yǎng)基中，用營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板培養(yǎng)37℃18h，用無(wú)菌生理鹽水分別將各新鮮平板培養(yǎng)物洗下，以無(wú)菌生理鹽水配制成菌懸液，用分光光度計(jì)調(diào)整菌液吸光值OD600=0.1，用時(shí)再稀釋10倍。培養(yǎng)至菌體濃度為106-107cfu/mL。　　1.2.2抑菌試驗(yàn)采用平皿挖洞灌藥法先在無(wú)菌平皿內(nèi)加入已溶化的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基20毫升作為底層，待凝固后再加入培養(yǎng)了16-18小時(shí)的營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基菌液1

4、-2毫升，用玻璃涂布器涂布均勻，用直徑7毫米無(wú)菌金屬打孔器在每個(gè)平皿內(nèi)均勻打洞3個(gè)，除去洞內(nèi)瓊脂，灌入少許營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基墊底，待凝固后再加入大豆異黃酮、檸檬提取物和甘肅金銀花藥液樣本，以不外溢為度，置37℃水浴恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18—24小時(shí)，觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，若有抑菌作用，洞周出現(xiàn)的無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)地帶，稱為抑菌圈，記錄抑菌圈直徑的大小?！　?.2.3抑菌指標(biāo)判定抑菌圈直徑D≥20mm為高度敏感，用“+++”表示；15≤D≤20mm為中度敏感，用“++”表示；85≤D≤15mm為低度敏感，用“+”表示；D≤8mm為不敏感，用“-”表示[3]?！　?結(jié)果　　大豆

5、異黃酮、檸檬提取物和甘肅金銀花對(duì)金黃色葡萄球菌均有較為明顯的抑制作用。分析之間的不同抑菌效果，甘肅金銀花抑菌效果稍弱，但是與其他兩組比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)。同時(shí)隨著濃度的增加，中藥的抑菌作用也增強(qiáng)，但達(dá)到一定濃度后，其抑菌作用不再加強(qiáng)。　　3討論　　大量流行病學(xué)調(diào)查資料顯示，細(xì)菌耐藥性普遍存在，藥物對(duì)耐藥菌的臨床療效降低或無(wú)效，對(duì)感染性疾病尤其是危重癥感染患者構(gòu)成威脅。金黃色葡萄球菌是臨床上醫(yī)院內(nèi)感染常見(jiàn)的病原菌，而且常為耐藥菌株。金黃色葡萄球菌相關(guān)感染疾病的治療目前尚無(wú)特異性方法，應(yīng)用大劑量或滲透性較強(qiáng)的抗菌藥物亦不能完全清除金黃色葡萄球

6、菌[4]。萬(wàn)古霉素是治療金黃色葡萄球菌的首選藥物，然而1996年日本發(fā)現(xiàn)萬(wàn)古霉素中介的金黃色葡萄球菌(VISA)，2002年和2004年美國(guó)又相繼報(bào)道萬(wàn)古霉素高度耐藥的金黃色葡萄球菌(VRSA)。同時(shí)細(xì)菌的耐藥性從醫(yī)院內(nèi)菌株發(fā)展至醫(yī)院外菌株，同時(shí)也從對(duì)單種藥物耐藥發(fā)展至多重耐藥，成為臨床治療棘手的難題。因此，探求新的不同于抗生素的抗菌藥物對(duì)于改善感染性疾病的治療現(xiàn)狀具有重要意義?！　”窘Y(jié)果顯示，柑橘檸檬提取物對(duì)金黃色葡萄球菌有顯著的抑制作用，且對(duì)能形成生物膜細(xì)菌有殺傷作用。有研究報(bào)告指出，提取物對(duì)人和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，無(wú)論口服還是注射，不會(huì)在任何器官中蓄

7、積，目前認(rèn)為檸檬提取物無(wú)毒副作用，可以大量攝入，應(yīng)用小鼠體細(xì)胞、生殖細(xì)胞和微生物檢測(cè)系統(tǒng)，從不同檢測(cè)終點(diǎn)證明它無(wú)致突變性。本組研究證實(shí)了這一點(diǎn)。金銀花對(duì)多種致病菌均有一定抑制作用。這些病原菌包括引起中醫(yī)熱毒證的金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、肺炎球菌、腦膜炎球菌，引起腸道急性熱性感染的傷寒桿菌、副傷寒桿菌、志賀氏菌、福氏痢疾桿菌以及霍亂桿菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、結(jié)核桿菌等。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明：金銀花含有豐富的綠原酸，具有廣泛的抗菌作用，木犀草素也有抗菌作用，其他成分如肌醇、皂苷、鞣酸等，因?yàn)樗鼈兒写罅康倪€原基團(tuán)，所以對(duì)多種致病菌具有抑制作用。本結(jié)果顯

8、示甘肅金銀花雖然抑制效果不是最好，但是也有很強(qiáng)的抑菌效果?！　】傊?，大豆異黃酮、檸檬提取物和甘肅金銀花都對(duì)多