超聲對金黃色葡萄球菌生物膜的體外研究

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1、1?霣苓輪碩士學位論文超聲對金黃色葡萄球菌生物膜的體外研究Ultrasoundofstaphylococcusaureusbiofllminvitrostudy作者：張偉導師：蔚艾二?一五年五月中圖分類號R639學校代碼10634UDC617.3密級授予單位川北醫(yī)學院超聲對金黃色葡萄球菌生物膜的體外研究Ultrasoundofstaphylococcusaureusbiofilminvitrostudy作者張偉導師蔚芃培養(yǎng)院系臨床醫(yī)學院授位類別學術學位授位級別碩士學科門類醫(yī)學學科專業(yè)外科學研究方向骨與關節(jié)損傷修復與重建年級2012級學號201203096二○一五年五月致謝當文章寫

2、到此處，也意示著我的碩士研究生生涯臨近尾聲，回首三年來的學習經(jīng)歷，以及近一年來完成論文的光陰，心中感慨良多。我滿懷一顆感恩的心面對身邊所有的老師、同學和朋友們，不知道感謝二字能否表達出心底那份最深厚的情誼。感謝我的導師蔚芃主任，一位才華橫溢的學者，一位寬厚仁慈的長輩，一位可以談心的朋友，盡管從中學到的東西僅僅九牛一毛，卻能讓我受益終生。在我的論文的每一次修改過程中，老師幫助我開拓研究思路，精心點撥，熱忱鼓勵，并為我指點迷津，才使得我在面對各種問題的時候得以豁然開朗。不僅教會我學術的點點常識，更教我做人道理，雖歷時三載，卻給以終生受益無窮之道。對老師的感激之情是無法用言語來表達的，

3、學生只有通過不斷學習不斷前進來作為對老師的報答。同時，我也要感謝川北醫(yī)學院骨科的全體醫(yī)生護士，感謝他們三年來對我的幫助和支持，要感謝吳青老師，何江濤老師，陳路老師，宋超敏老師，蒲勁松老師，蔣成老師，明偉老師在我學習中給予的幫助和指導，感謝為我的實驗設計和完成過程中提出寶貴的意見。此外，也十分感激科室內的師兄師弟們，在工作中對我的幫助，我能成為這個大家庭的一員，感到非常的榮幸。感謝風濕研究所的各位老師在實驗過程中對我的技術指導和幫助，感謝我的同學們在實驗中給予的幫助。最后還要感謝我的家人對我讀書的支持和鼓勵，他們是我努力前進的不竭動力。超聲對金黃色葡萄球菌生物膜的體外研究摘要目的：

4、研究超聲對常見細菌（金黃色葡萄球菌）的殺菌作用及其生物膜的破壞作用方法：1.采用引導片培養(yǎng)法建立金黃色葡萄球菌的生物膜體外模型，分為對照組（假輻照）實驗組一（低強度超聲輻照）和實驗組二（HIFU高強度輻照組）。采用碘化丙啶(PI)和FITC-ConA分別標記細菌DNA和多糖,激光掃描共聚焦顯微鏡檢測生物膜成型情況。2.用超聲振蕩-活菌計數(shù)法評價超聲空化對BF菌的影響；用激光共聚焦顯微鏡采集不同層面的圖像，觀察細菌生物膜和細菌在超聲空化前后的變化。結果：1.超聲振蕩-活菌計數(shù)法：對照組，實驗組一和實驗組二的菌3落分別為(5.12±0.81，5.14±0.66，3.97±0.43)l

5、gcfu/cm,經(jīng)統(tǒng)計學比較，對照組與低強度組無明顯差異，與高強度組有統(tǒng)計學差異。2.在激光共聚焦顯微鏡下觀察，可得超聲空化作用后綠色熒光染色的EPS及紅色熒光染色的細胞核DNA有減少，強度越高，且減少量越多。結論：低強度的超聲空化作用不能殺滅細菌，且對細菌生物膜的破壞作用微小；高強度的超聲空化作用能有效殺滅細菌，并且對細菌生物膜具有顯著的破壞作用。關鍵詞：細菌生物膜；激光共聚焦顯微鏡；免疫熒光技術；超聲空化UltrasoundofstaphylococcusaureusbiofilminvitrostudyAbstractObject:Tostudyultrasoniccavi

6、tationoncommonbacterium(Staphylococcusaureus)anditsdestructiveeffectonthebiofilmofthebacterium.Methods:1.Usetheguidanceplatecultivationmethodtoestablishanextracorporealmodelofbiofilmofstaphylococcusaureus,whichisdividedintothecontrolgroup(falseirradiation),experimentalgroupI(lowintensityultra

7、sonicirradiation)andexperimentalgroupII(highintensityHIFUirradiation).Propidiumiodide(PI)andFITC-ConAarerespectivelyadoptedtomarkDNAandpolysaccharideofthebacteria,andconfocallaserscanningmicroscopeisusedtoexaminethemoldingofthebilfilm.2.Ultra