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《高效液相色譜法測(cè)定舒肝寧注射液中黃芩苷和梔子苷含》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、高效液相色譜法測(cè)定舒肝寧注射液中黃芩苷和梔子苷含【關(guān)鍵詞】高效 摘要:目的:建立高效液相色譜法測(cè)定舒肝寧注射液中黃芩苷和梔子苷含量。方法:AtlantisTMdC18柱,4.6×150mm,5μ;黃芩苷流動(dòng)相為0.01mol/L磷酸鹽緩沖液(pH2.8)甲醇(60:40),流速1ml/min,檢測(cè)波長280nm;梔子苷流動(dòng)相為甲醇水冰醋酸(20:80:0.5),流速1ml/min,檢測(cè)波長238nm。結(jié)果:黃芩苷和梔子苷線性范圍分別為30~100μg/ml、30~150μg/ml,平均回收率分別為99.68%、99.66%。結(jié)論:該法簡便快速、結(jié)果準(zhǔn)確,適合舒肝寧注射液的質(zhì)量控制?! £P(guān)鍵詞
2、:舒肝寧注射液;含量測(cè)定;黃芩苷;梔子苷 舒肝寧注射液由茵陳、梔子、黃芩、板蘭根和靈芝提取物制成的滅菌水溶液,主治清熱解毒,利濕退黃,益氣扶正,保肝護(hù)肝,是有效治療各種病毒性肝炎的中藥制劑,其主要有效成分為黃芩苷和梔子苷。有采用高效液相色譜法測(cè)定其黃芩苷或梔子苷含量的報(bào)道[1,2],但樣品上柱運(yùn)行周期較長,在15min以上。本研究建立舒肝寧注射液中黃芩苷和梔子苷含量測(cè)定的高效液相色譜方法,具有快速、靈敏、簡捷、特異性強(qiáng)等特點(diǎn),可以較好的消除有效成分之間的干擾?! ?儀器與試劑 pom,5μm;黃芩苷流動(dòng)相為0.01mol/L磷酸鹽緩沖液(pH2.8)甲醇(60:40),流速1ml/min,
3、檢測(cè)波長280nm;梔子苷流動(dòng)相為甲醇水冰醋酸(20:80:0.5),流速1ml/min,檢測(cè)波長238nm?! ?2溶液的制備 221對(duì)照品溶液的制備 精密稱取黃芩苷和梔子苷各對(duì)照品適量,適量甲醇溶解后,用水定溶,分別制成30、45、60、75、100μg/ml黃芩苷對(duì)照品溶液,30、60、90、120、150μg/ml梔子苷對(duì)照品溶液?! ?22樣品溶液的制備 精密量取供試品溶液2mL至25mL量瓶中,甲醇稀釋至刻度,搖勻,用0.45μm微孔濾膜過濾,濾液作為梔子苷測(cè)定的樣品溶液。再精密吸取上述濾液2mL置25mL量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,作為測(cè)定黃芩苷的樣品溶液?! 》謩e取黃
4、芩苷和梔子苷對(duì)照品和樣品溶液10μL,在上述色譜條件下進(jìn)樣,得上述兩組分對(duì)照品和供試品溶液的色譜圖,結(jié)果見圖1,2?! ?3線性關(guān)系考察 在上述色譜條件下對(duì)兩個(gè)組分的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液依次測(cè)定,以對(duì)照品的濃度作為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸分析。黃芩苷和梔子苷的回歸方程分別為A=3.26×10-7C-0.01,r=0.9999;A=7.04×10-7C-0.002,r=0.9998。結(jié)果表明黃芩苷在30~100μg/ml內(nèi)、梔子苷在30~150μg/ml內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。 24精密度試驗(yàn) 按樣品溶液測(cè)定的色譜條件用同一樣品溶液重復(fù)進(jìn)樣(n=6),測(cè)定峰面積,計(jì)算黃芩苷和梔子苷的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)
5、偏差(RSD)分別為0.98%和1.04%。 25穩(wěn)定性試驗(yàn) 取2.4項(xiàng)下溶液分別于0、2、4、8、12h進(jìn)樣,測(cè)定峰面積,計(jì)算RSD。結(jié)果表明樣品在12h內(nèi)穩(wěn)定,黃芩苷和梔子苷的RSD分別為0.98%和1.05%?! ?6回收率試驗(yàn) 用加樣回收法在已知含量的舒肝寧注射液內(nèi),分別加入不同量的黃芩苷和梔子苷對(duì)照品,按2.2.2項(xiàng)下方法操作,得回收率試驗(yàn)用溶液,取10μL進(jìn)樣,計(jì)算回收率,結(jié)果見表1。表1樣品回收率(略) 分別取對(duì)照品和樣品溶液,各取10μL進(jìn)樣,用外標(biāo)法計(jì)算樣品含量,結(jié)果見表2。表2樣品測(cè)定結(jié)果(略) 3討論 舒肝寧注射液的主要有效成分為黃芩苷和梔子苷,因此對(duì)其進(jìn)行定
6、量,明確其含量范圍是控制其質(zhì)量的關(guān)鍵。黃芩苷和梔子苷的理化特性和紫外特征吸收有較大差異,很難使其在常規(guī)條件下同時(shí)得到分離,滿足定量要求。龍琳[1,2]分別報(bào)道用高效液相色譜法測(cè)定其黃芩苷和梔子苷的含量,但樣品上柱運(yùn)行時(shí)間較長。本研究建立了在兩個(gè)紫外檢測(cè)波長下,用兩種流動(dòng)相分別測(cè)定黃芩苷和梔子苷含量的方法,具有快速、靈敏、簡捷、特異性強(qiáng)等特點(diǎn),可以較好的消除有效成分之間的干擾,適合舒肝寧注射液的質(zhì)量控制。