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1、對(duì)免疫金標(biāo)法檢測(cè)血清結(jié)核抗體的某些改良 我們?cè)诠ぷ髦邪l(fā)觀，應(yīng)用免疫金標(biāo)滲濾法(以下簡(jiǎn)稱金標(biāo)法)快速檢測(cè)血清結(jié)核抗體時(shí)，重度黃疸、溶血、乳糜血清等樣本在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中滲入反應(yīng)膜的速度慢，觀察結(jié)果時(shí)反應(yīng)膜背景偏紅、有的無(wú)法判斷結(jié)果。因此，對(duì)原實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行改進(jìn)，克服樣本因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下?！ ?材料與方法 1.1材料肺結(jié)核患者，按中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)核病分會(huì)關(guān)于“肺結(jié)核診斷與治療指南”［1］確診。選擇重度黃疸血清43例、溶血血清12例，乳糜血清6例，共計(jì)61例血清，-20℃保存?zhèn)錂z?！ ?.2方法 1.2.1原方法試劑盒由福建籃波生物研究
2、所提供、按說(shuō)明使用?！ ?.2.2改良方法(以下稱本法)改良要點(diǎn)：第一，將1∶5稀釋后的(黃疸血清、溶血、乳糜血清)樣本0.6ml~1．0ml經(jīng)G6除菌濾膜(注射器式)，取濾液檢測(cè)。第二，待濾液完全滲入濾膜后，加A液1滴~2滴洗滌后加金標(biāo)二抗。第三，觀察結(jié)果時(shí)，如果反應(yīng)膜有殘留影響結(jié)果判斷，用棉簽沾A液輕輕擦拭除去殘留物，加A液1滴~2滴洗滌后觀察結(jié)果。第四，可用酶免中PBST替代A液使用。 2.2兩種方法的樣本完全滲入反應(yīng)膜所用時(shí)間的比較本文對(duì)22例重度黃疸血清用生理鹽水1∶5稀釋后直接加入實(shí)驗(yàn)濾膜上，樣本滲入反應(yīng)膜所用的時(shí)間為(8．2±2．
3、4)min；取上述22例1∶5稀釋血清經(jīng)G6除菌過(guò)濾后的濾液加入實(shí)驗(yàn)濾膜上，樣本完全滲入反應(yīng)膜所用的時(shí)間為(4．0±2．2)min。二者進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差異非常顯著(P<0．01)?！ ?.3本法對(duì)61例肺結(jié)核患者血清結(jié)核抗體的檢測(cè)結(jié)果我們應(yīng)用本法對(duì)61例血清為重度黃疸、溶血、乳糜血清的肺結(jié)核患者血清結(jié)核抗體進(jìn)行檢測(cè)，其結(jié)果為陽(yáng)性52例，陽(yáng)性率為85.1％，與文獻(xiàn)報(bào)道一致［2］?！ ?討論 本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，應(yīng)用本法對(duì)61例血清為重度黃疸、溶血、乳糜血清的肺結(jié)核患者血清結(jié)核抗體進(jìn)行檢測(cè)，觀察結(jié)果時(shí)反應(yīng)膜背景偏紅者為7/61(11．4％)，
4、與原方法(34．3％)相比明顯減少(P<0．01)。我們對(duì)22例重度黃疸血清1∶5稀釋樣本完全滲入反應(yīng)膜的時(shí)間進(jìn)行比較，原方法為(8.2±3．4)min；本法為(4.0±2．2)min，二者差異非常顯著(P<0．01)。提示本法對(duì)1∶5稀釋的重度黃疸、溶血、乳糜血清樣本進(jìn)行過(guò)濾，取濾液進(jìn)行測(cè)定，減少了樣本中大分子物質(zhì)對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾，使樣本滲透入反應(yīng)膜的速度加快，觀察結(jié)果時(shí)反應(yīng)膜背景更為清晰。我們?cè)谘芯恐邪l(fā)現(xiàn)，部分經(jīng)過(guò)G6除菌過(guò)濾后的重度黃疸、溶血樣本，在樣本完全滲入反應(yīng)膜后，其膜上仍有部分黃色、紅色殘留物，滴加1滴~2滴A液洗滌可除去上
5、述殘留物，再加B液，實(shí)驗(yàn)結(jié)果容易判斷。我們?cè)诠ぷ髦性?jīng)用本法對(duì)結(jié)核性胸膜炎患者胸腔積液結(jié)核抗體進(jìn)行檢測(cè)［3］，獲得了滿意的效果。我們用棉簽沾少量A液擦拭殘留在反應(yīng)膜上的金標(biāo)二抗時(shí)發(fā)現(xiàn)，特異性結(jié)合(陽(yáng)性反應(yīng))金標(biāo)二抗不容易被擦拭；而殘留在反應(yīng)膜上的金標(biāo)二抗容易被擦拭。我們應(yīng)用本法對(duì)61例血清為重度黃疸、溶血、乳糜血清的肺結(jié)核患者血清結(jié)核抗體進(jìn)行檢測(cè)，其結(jié)果為陽(yáng)性52例，陽(yáng)性率85．1％，與文獻(xiàn)報(bào)道一致。表明本法可以減少或克服黃疸、溶血、乳糜血清對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠?！ ⒖嘉墨I(xiàn)： ?。?］中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)核病分會(huì).肺結(jié)核診斷與治療指南［S］.中華
6、結(jié)核和呼吸雜志，2001，24：70. ［2］唐少華，鄭延迪.斑點(diǎn)免疫金滲濾法檢測(cè)結(jié)核抗體［J］.上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1998，13：46. ［3］吳松遠(yuǎn)，石賀芹，夏其海，等.結(jié)核分枝桿菌抗體檢測(cè)在胸腔積液中的應(yīng)用及影響因素的探討［J］.實(shí)用診斷與治療雜志，2003，17：205.
