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《苦丁茶冬青葉多糖的提取及含量測(cè)定》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、苦丁茶冬青葉多糖的提取及含量測(cè)定【關(guān)鍵詞】苦丁茶冬青葉多糖;,,提?。?,苯酚 摘要:目的研究苦丁茶冬青葉多糖含量的測(cè)定方法。方法以水提醇沉的方法從苦丁茶冬青葉中提取得到苦丁茶冬青葉多糖并以正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化顯色條件,采用苯酚-硫酸法測(cè)定其多糖含量。結(jié)果測(cè)定波長(zhǎng)為482nm,最佳顯色條件為6%苯酚用量1.0ml,濃硫酸用量7.0ml,反應(yīng)時(shí)間40min。標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為A=0.0546C-0.0033(n=10),r=0.9998,并在2.51~45.11mg・L1范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。平均回收率為98.55%,RSD=1.8
2、6%(n=5)。測(cè)得多糖平均含量為31.90%,RSD=1.75%(n=6)。結(jié)論該方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好,可為其繼續(xù)研究開發(fā)及應(yīng)用提供參考依據(jù)?! £P(guān)鍵詞:苦丁茶冬青葉多糖;提?。槐椒恿蛩岱?;含量測(cè)定;正交實(shí)驗(yàn) ExtractionandDeterminationofthePolysaccharidesfromtheLeavesofIlexkudinchaC.J.Tseng Abstract:ObjectiveTostudythedeterminationmethodforpolysaccharidesintheleavesofI
3、lexkudinchaC.J.Tseng.MethodsTheleavesofIlexkudinchaC.J.TsengesbySevagmethod,andfrometricmethodappliedforthedeterminationofpolysaccharidesfromtheleavesofIlexkudinchaC.J.Tsengizedbyorthogonalexperiment.ResultsTheresultsshoeasurement.Thebestcolorimetricconditionseofreactiono
4、f40minandthedosageof6%phenylhydrateandH2SO4of1.0and7.0ml,respectively.Linearrangeg・L1(A=0.0546C-0.0033,r=0.9998).Theaveragerecoveryethodusedinthispaperissimple,accurateandstable.Theresultobtainedmayactasabaseforthefurtherstudyandapplicationofit. KeytheleavesofIlex
5、kudinchaC.J.Tseng;Extraction;Phenylhydrate-sulfuricacidmethod;Determination;Orthogonalexperiment 苦丁茶冬青IlexkudinchaC.J.Tseng是冬青科(Aquifoliaceae)冬青屬喬木植物,主產(chǎn)于湖南、湖北、廣東、廣西、海南等省。葉(苦丁茶)苦、甘、涼。清熱解毒,祛暑。主要用于治療頭痛、齒痛、目赤、熱病煩渴、痢疾等癥[1]。近年來,已有人對(duì)苦丁茶冬青葉(苦丁茶)的化學(xué)成分和藥理作用作了一些研究,為其臨床應(yīng)用提供了一定的理論依據(jù)[
6、2]。迄今為止,對(duì)其具有生物活性的多糖成分研究未見報(bào)道。本文首次從苦丁茶冬青葉中分離提取得到粗多糖,并以正交設(shè)計(jì)L9(33)優(yōu)化顯色條件,研究了苯酚-硫酸法測(cè)定苦丁茶冬青葉多糖含量的方法,為其進(jìn)一步研究開發(fā)與應(yīng)用提供了參考依據(jù)?! ?儀器與材料 1.1原料苦丁茶冬青葉水提物精粉。苦丁茶冬青葉由海南澄邁萬昌苦丁茶場(chǎng)提供,經(jīng)晾干、粉碎后,用水于80℃浸提,提取液經(jīng)濃縮后噴霧干燥得紅棕色粉末,密封保存?zhèn)溆??! ?.2儀器紫外可見吸收光譜儀(UV2501PC,日本島津公司);真空干燥箱(8764S型,上海錦屏儀器儀表有限公司);低速離心機(jī)(CL
7、12,新專紅旗電機(jī)廠);循環(huán)水式多用真空泵(SHBⅢ,鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司)。 1.3試劑苯酚(AR,鄭州市德眾化學(xué)試劑廠),使用前重蒸餾;無水乙醇、無水乙醚、95%乙醇、三氯甲烷、正丁醇、硫酸等均為國(guó)產(chǎn)分析純?cè)噭褂们拔刺幚?。 ?結(jié)果 2.1多糖的提?。?,4]稱取苦丁茶冬青葉水提物噴霧干燥粉末10g,加入95%乙醇200ml浸泡過夜,抽濾,取濾渣重復(fù)以上操作直至乙醇液無色時(shí)止。80℃烘干,加入去離子水200ml溶解,過濾除去不溶物質(zhì)。向?yàn)V液中加入95%乙醇至含醇量達(dá)到80%,邊加邊攪拌,得灰白色絮狀沉淀。靜置6h后進(jìn)行離心分
8、離沉淀,回收上層乙醇溶液,取固體部分再重復(fù)溶解、沉淀、離心分離操作至乙醇液澄清無色為止。溶解后,將體積比4∶1的三氯甲烷/正丁醇混合液等體積加入多糖溶液中,振蕩30min后,靜置,除去中間層變