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1、山茱萸多糖的提取及含量測(cè)定作者：張彩瑩，張良，惠豐立，褚學(xué)英【關(guān)鍵詞】山茱萸；,,山茱萸多糖；,,均勻設(shè)計(jì)；,,提取 摘要：目的從山茱萸中提取多糖，并建立山茱萸多糖含量的測(cè)定方法。方法采用均勻設(shè)計(jì)優(yōu)化山茱萸多糖的提取條件，用熱水浸提、乙醇沉淀、DE-52柱層析的方法提取純化山茱萸多糖，用苯酚-硫酸比色法測(cè)定多糖含量。結(jié)果山茱萸中多糖的含量為16.04%，平均回收率為99.01%，RSD=1.13%（n=3）。結(jié)論首次運(yùn)用均勻設(shè)計(jì)優(yōu)化山茱萸多糖的提取條件，提取得率高，苯酚-硫酸比色法測(cè)定山茱萸多糖含量穩(wěn)定性、回收率較好?！ ￡P(guān)鍵詞
2、：山茱萸；山茱萸多糖；均勻設(shè)計(jì)；提取 xtractionandDeterminationoftheContentofPolysaccharidefromFructusCorni Abstract：ObjectiveToextractpolysaccharideandestablishthemethodfordeterminationofthecontentofpolysaccharidesfromFructusCorni.MethodsUniformdesigntestFructusCorni.Polysaccharideen
3、tation,DE-52chromatography.Thecontentofpolysaccharideinedbyphenol-vitrioliccolorimetry.ResultsThecontentofpolysaccharideintheFructusCorniethatuniformdesignisusedtooptimizeextractionconditionsofpolysaccharide.Theextractionrateofpolysaccharideishigh.Phenol-vitrioliccolo
4、rimetryethodtodeterminecontentofpolysaccharideinFructusCorni. Keydesign;Extraction 山茱萸［1］(FructusCorni)為山茱萸科植物山茱萸CornusOfficinalisSieb.etZucc.的干燥果肉，又名山萸肉、藥棗、肉棗等，臨床上以除去種子的成熟果實(shí)入藥，其味酸、澀、微溫，歸肝腎經(jīng)，有補(bǔ)益肝腎、澀精固脫的功效，是我國(guó)傳統(tǒng)的中藥材。中醫(yī)藥臨床研究證明［2，3］，山茱萸是治療糖尿病、冠心病和高血壓病的主要藥材。果肉中主要成分有糖類(lèi)、有
5、機(jī)酸類(lèi)及其酯類(lèi)、鞣質(zhì)類(lèi)等。多糖類(lèi)物質(zhì)是生命代謝不可缺少的重要物質(zhì)，具有多種生物活性而成為當(dāng)今生物醫(yī)藥研究和開(kāi)發(fā)的一大熱點(diǎn)。本文以山茱萸為材料，采用均勻設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)［4］優(yōu)化山茱萸多糖提取條件，并通過(guò)乙醇沉淀，DE-52柱層析進(jìn)一步純化，用苯酚-硫酸比色法測(cè)定山茱萸多糖的含量?！ ?器材 1.1材料山茱萸干燥果實(shí)（產(chǎn)地：河南西峽縣，購(gòu)自藥店）?！ ?.2試劑D（+）-葡萄糖（Fluka進(jìn)口分裝，上海華碩精細(xì)化學(xué)品有限公司）；重蒸苯酚（北京市雙翔達(dá)生化試劑）；DE-52（進(jìn)口分裝，an產(chǎn)品，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分
6、析純?！ ?.3儀器TU-1901雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限公司）；臺(tái)式離心機(jī)（太倉(cāng)市醫(yī)療器械廠）；數(shù)顯恒溫水浴鍋HH-6（國(guó)華電器有限公司）；中興高速萬(wàn)能粉碎機(jī)（中興偉業(yè)有限公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE-52AA（上海亞榮生化儀器廠）；層析裝置（上海滬西分析儀器廠）。 2方法與結(jié)果 2.1山茱萸多糖的提取與純化 2.1.1山茱萸多糖的提取純化工藝流程干燥的山茱萸果實(shí)粉碎→100目篩篩分→山茱萸粉末→八倍體積95%乙醇回流8h脫脂→冷卻抽濾→濾渣晾干→預(yù)處理的山茱萸粉末→水浸提→離心→上清液→合并上清液→濃縮→
7、乙醇沉淀→干燥得粗多糖。粗多糖溶于水→透析→DE-52柱層析純化→收集部分多糖洗脫液濃縮→乙醇沉淀→冷凍干燥→白色山茱萸多糖?！ ?.1.2均勻設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化山茱萸多糖的提取條件選擇提取溫度、提取時(shí)間和料液比3個(gè)因素，以山茱萸多糖的提取得率為考察指標(biāo)進(jìn)行三因素八水平的均勻設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)如表1。稱(chēng)取一定量的預(yù)處理的山茱萸粉末，以不同的料液比、提取溫度、提取時(shí)間在恒溫水浴中保溫浸提，4000r/min離心15min，合并上清液，加入3倍體積95%的乙醇，4℃放置24h離心得粗多糖，熱水溶解，定容，苯酚-硫酸法［5］測(cè)定多糖的含量，計(jì)算多糖得率
8、。結(jié)果見(jiàn)表1?！ ”?實(shí)驗(yàn)方案及山茱萸多糖的得率（略） 多糖得率（mg/g）=（C×D×V×f）/］.南陽(yáng)：三秦出版社，2004：454. ?。?］周京華,李春生,李電東.山茱萸有效化學(xué)成分的研究進(jìn)展［J］.中國(guó)新藥雜志，2001，10(11):
