資源描述：
《刺五加對(duì)癡呆模型小鼠記憶障礙及mda含量、sod和乙酰膽堿酯酶活性的影》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、刺五加對(duì)癡呆模型小鼠記憶障礙及MDA含量、SOD和乙酰膽堿酯酶活性的影【摘要】 目的觀察刺五加提取液對(duì)老年性癡呆(AD)模型小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙及腦組織生化學(xué)改變的保護(hù)作用。方法50只健康昆明種小鼠雌雄各半，隨機(jī)分為5組，對(duì)照組、AD模型組、刺五加低劑量組、刺五加高劑量組、腦復(fù)康組。50d隔日腹腔注射三氯化鋁100mg/kg小鼠，建立擬AD模型，采用跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)和水迷宮測(cè)試方法和生化學(xué)檢測(cè)方法，觀察刺五加提取液對(duì)AD模型小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的影響以及腦組織丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、乙酰膽堿酯酶（TChE
2、）活性改變的影響。結(jié)果模型組跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)潛伏期縮短、錯(cuò)誤反應(yīng)率增加（P＜0.05）；水迷宮實(shí)驗(yàn)中小鼠全程游泳時(shí)間延長(zhǎng)、無(wú)誤率減少，腦組織MDA含量增高、SOD活性降低、TChE活性增加（P＜0.05）。同時(shí)給予低、高劑量刺五加提取液不同程度地緩解學(xué)習(xí)記憶能力障礙及腦組織生化學(xué)改變（P＜0.05，P＜0.01）。結(jié)論刺五加提取液通過(guò)提高小鼠腦組織中SOD活性和抑制腦中TChE活性，明顯改善AD模型小鼠的學(xué)習(xí)記憶障礙及腦組織生化學(xué)改變，對(duì)AD有一定的改善和保護(hù)作用。【關(guān)鍵詞】刺五加；老年癡呆；MDA；SOD；TChE 老年性
3、癡呆（AD）病因及發(fā)病機(jī)制迄今尚不清楚，更沒(méi)有研究出根治AD病的藥物，目前在臨床上已經(jīng)使用的治療藥物副作用大，療效均不能令人滿意〔1〕。中藥刺五加（Acanthopanaxsenticosus）為五加科植物，味辛、微苦、性溫、無(wú)毒，具有多種藥理作用和臨床應(yīng)用，能益氣健脾、補(bǔ)腎安神，用于脾腎陽(yáng)虛,體虛乏力,食欲不振,腰膝酸痛,失眠多夢(mèng)〔2〕。本文采用慢性鋁中毒模型，選用行為學(xué)測(cè)試方法和腦組織生化學(xué)檢測(cè)方法，初步探討了刺五加提取液對(duì)AD的保護(hù)作用?！ ?材料與方法 1.1材料與試劑 本院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科提供的昆明種小鼠50只
4、，體重18～20g，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只。刺五加藥材由延邊成大藥品有限公司提供。取0.5kg刺五加，先用水浸泡1h后加1.5kg的水，每次煮沸1h，共提取3次，把提取液合并濃縮至500ml,然后加水配制成25％（250g/L）和50％(500g/L)的刺五加溶液。三氯化鋁為分析純，由北京化工廠生產(chǎn)；腦復(fù)康片由山東羅欣藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)；丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、乙酰膽堿酯酶（TChE）試劑盒、考馬斯亮藍(lán)蛋白測(cè)試盒均由南京建成生物工程有限公司購(gòu)買?！ ?.2儀器與設(shè)備 水迷宮實(shí)驗(yàn)記錄3
5、min內(nèi)小鼠到達(dá)終點(diǎn)前的錯(cuò)誤次數(shù)。小鼠跳臺(tái)儀，移液器，組織勻漿機(jī)，722分光光度計(jì)，離心機(jī)，分析天平等均由本院基礎(chǔ)部預(yù)防醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心提供。 1.3小鼠模型建立 ?、賹?duì)照組：按小鼠每10g體重0.1ml的標(biāo)準(zhǔn)每日上午灌胃給予0.85％生理鹽水，5d后開(kāi)始下午隔日腹腔注射等體積的生理鹽水；②模型組：每日上午灌胃給予0.85％生理鹽水，5d后開(kāi)始下午隔日腹腔注射三氯化鋁100mg/kg；③刺五加25％組（刺1組）：每日上午灌胃給予25％刺五加液，5d后開(kāi)始下午隔日腹腔注射三氯化鋁；④刺五加50％組（刺2組）：每日上午灌胃給
6、予50％刺五加液，5d后開(kāi)始下午隔日腹腔注射三氯化鋁；⑤腦復(fù)康組：每日上午灌胃給予腦復(fù)康230mg/kg，5d后開(kāi)始下午隔日注射三氯化鋁。各組連續(xù)腹腔注射20次，實(shí)驗(yàn)時(shí)間共為50d。每天觀察動(dòng)物一般癥狀，包括行為狀態(tài)、體征、飲水量、攝食等，每天記錄一次體重?！ ?.4記憶障礙測(cè)試 跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)在小鼠染毒第15天進(jìn)行訓(xùn)練，過(guò)24h后重新測(cè)試，觀察其跳臺(tái)的潛伏期和3min內(nèi)跳臺(tái)的錯(cuò)誤次數(shù)。在長(zhǎng)方形迷宮中注入溫水，水溫保持在30℃左右。測(cè)定前2d訓(xùn)練小鼠，每日4次，共訓(xùn)練8次，讓小鼠能沿著正確的路線游動(dòng)到終點(diǎn)。染毒第20，23
7、，26，29天分別測(cè)試其全程游泳時(shí)間、錯(cuò)誤次數(shù)及無(wú)誤率。 1.5腦組織中MDA含量、SOD、TChE活性檢測(cè) 處死小鼠，立即取全腦，用冰冷的生理鹽水漂洗，除去血液，濾紙拭干，稱取組織重量，加9倍量的勻漿液，用勻漿器勻漿（操作要在冰水浴中進(jìn)行），制成10%勻漿液，3500r/min離心10min，取上清液，用考馬斯亮藍(lán)顯色法測(cè)定腦組織蛋白含量。MDA含量測(cè)定：MDA可與硫代巴比妥酸（TBA）縮合，形成紅色產(chǎn)物，在532nm處有最大吸收峰，測(cè)吸光度值。SOD測(cè)定：通過(guò)黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子自由基（O
8、2），后者氧化胺形成亞硝酸鹽，在顯色劑的作用下呈現(xiàn)紫紅色，用可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)其吸光度。TChE測(cè)定：乙酰膽堿酯酶水解乙酰膽堿生成膽堿及乙酸，膽堿與巰基顯色劑反應(yīng)生成TNB（對(duì)三硝基苯）黃色化合物，根據(jù)顏色深淺進(jìn)行比色定量，水解產(chǎn)物膽堿的數(shù)量可反應(yīng)膽堿酯酶的活力。 1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 計(jì)量資料以x±s表示，采用SPSS11.0統(tǒng)
