四棱豆總黃酮含量的研究論文

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1、四棱豆總黃酮含量的研究論文【關(guān)鍵詞】四棱豆；,,總黃酮；,,提取工藝；,,含量摘要：目的研究了四棱豆總黃酮的提取工藝和含量。方法采用正交實(shí)驗(yàn)分析和分光光度法。結(jié)果四棱豆總黃酮的最佳提取工藝是水浴溫度為85℃，提取時(shí)間為6h，提取劑乙醇濃度為80%，并且該提取方法穩(wěn)定性好，精密度和回收率高；以蘆丁為對(duì)照品，測(cè)得四棱豆根、莖、葉、花、果實(shí)、種子和整株的總黃酮含量分別為0.73%，0.93%，2.30%.freeletryandtheorthogonalexperiments.ResultsTheanalyticalresultshou

2、mextractingconditionsperature85℃,extractingtime6h,extractionreagent80%alcohol.Andthestabilityofthemethodeanaterial,s,leaves,.freelentofportantguidingsignificanceinboththeoryandpractice.Key）下的吸光度，以光波波長(zhǎng)為橫軸，以吸光度(A)為縱軸，繪制四棱豆（葉）提取液的吸收曲線。結(jié)果見圖1。1.3.2提取方法的正交實(shí)驗(yàn)方案在實(shí)際操作中，考慮到各種因素

3、之間的影響，因此主要對(duì)乙醇的濃度、浸提溫度和提取時(shí)間三因素四個(gè)水平進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，以便測(cè)定不同條件下四棱豆總黃酮的含量。正交實(shí)驗(yàn)方案見表1。1.3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備準(zhǔn)確稱取蘆丁對(duì)照品26.80mg，用65%乙醇定容至100ml，即蘆丁對(duì)照液的濃度為0.2680mg/ml，作為儲(chǔ)備液。精確吸取上述儲(chǔ)備液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分別放置于5個(gè)25ml容量瓶中，分別加入5%NaNO2溶液1.0ml，放置6min后，加入5%Al(NO3)3溶液1.0ml，室溫放置6min后，再加入5%NaOH溶液10ml，用65%乙醇溶液

4、定容,搖勻，堿性條件下顯色15min后,用1cm比色皿,以試劑空白為參比,于最大吸收波長(zhǎng)（500nm）處測(cè)定吸光度值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（如圖2）。所得的標(biāo)準(zhǔn)曲線回追方程為A=6.857C－0.002，R=0.9994，線性關(guān)系良好，并且由此可推導(dǎo)出公式：C=（A+0.002）/6.857。1.3.4四棱豆總黃酮的測(cè)定方法準(zhǔn)確稱取四棱豆各器官（根、莖、葉、花、果實(shí)和種子）及整株樣品各2.0000g，用索氏提取器加最適提取劑（80%乙醇）100ml在85℃水浴溫度條件下回流提取6h，冷卻后，用80%乙醇定容至100ml，備用。準(zhǔn)確移取各樣

5、品液2組，每份1ml，置于25ml容量瓶中，其中一組直接以65%乙醇定容至25ml作空白對(duì)照；另一組按上述方法進(jìn)行顯色測(cè)定。圖1四棱豆總黃酮的吸收光譜（略）圖2蘆丁樣品標(biāo)準(zhǔn)曲線（略）1.3.5精密度實(shí)驗(yàn)精密稱取干燥的四棱豆（葉）粉末6份，2.0000g/份，按1.3.4實(shí)驗(yàn)方法測(cè)定其吸光度（A）。表1因素水平（略）1.3.6穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)以四棱豆（葉）提取液為樣品液，測(cè)定顯色液穩(wěn)定性和提取液穩(wěn)定性。①顯色液穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：每間隔20min測(cè)1次吸光度，共測(cè)定6次；②提取液穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：每5d測(cè)定1次，共測(cè)定6次。1.3.7加樣回收率的測(cè)定準(zhǔn)

6、確移取上述四棱豆（葉）提取液5份，1.0ml/份，分別置于5個(gè)25ml的容量瓶中，并且分別加入蘆丁標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml，即分別加入蘆丁對(duì)照品0.2680，0.5360，0.8040，1.0720，1.3400mg。然后按上述顯色方法進(jìn)行比色測(cè)定。2結(jié)果與分析2.1最大吸收波長(zhǎng)由圖1可知，四棱豆黃酮提取液硝酸鋁顯色后穩(wěn)定的最大吸收峰值在500nm波長(zhǎng)處。因此，蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線及四棱豆各樣品黃酮的比色測(cè)定均在500nm波長(zhǎng)處進(jìn)行。2.2正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析準(zhǔn)確稱取四棱豆（果實(shí)）干燥粉末16份，每份2.0000

7、g，分4組，按表2配置方案制備黃酮提取液100ml，并分別取1.0ml黃酮提取液置于25ml容量瓶中，按1.3.3實(shí)驗(yàn)的顯色方法測(cè)定其吸光度。根據(jù)表2中R1，R2，R3，R4和R值分析可知，影響總黃酮提取得率的所選因素的主次依次為提取時(shí)間→乙醇濃度→水浴溫度，提取四棱豆總黃酮的最佳提取工藝為A3B3C3，即水浴溫度為85℃，提取時(shí)間為6h，乙醇濃度為80%。2.3四棱豆不同部位的總黃酮含量比較分別測(cè)定四棱豆各器官及整株的吸光度（A值），3份/樣品，取吸光度的平均值（）計(jì)算各樣品總黃酮的百分含量（波長(zhǎng)處，并且首次測(cè)得四棱豆根、莖、葉

8、、花、果實(shí)、種子和整株的總黃酮含量分別為0.73%，0.93%，2.30%，3.96%，2.88%，3.12%和2.44%，其中花的總黃酮含量最高為3.96%。這為四棱豆具有清熱解毒、消炎止痛等多種藥用功效，提供了理論依據(jù)。同時(shí)，四棱豆的適應(yīng)性強(qiáng)，