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1、四棱豆總黃酮含量的研究論文【關鍵詞】四棱豆；,,總黃酮；,,提取工藝；,,含量摘要：目的研究了四棱豆總黃酮的提取工藝和含量。方法采用正交實驗分析和分光光度法。結(jié)果四棱豆總黃酮的最佳提取工藝是水浴溫度為85℃，提取時間為6h，提取劑乙醇濃度為80%，并且該提取方法穩(wěn)定性好，精密度和回收率高；以蘆丁為對照品，測得四棱豆根、莖、葉、花、果實、種子和整株的總黃酮含量分別為0.73%，0.93%，2.30%.freeletryandtheorthogonalexperiments.ResultsTheanalyticalresultshou
2、mextractingconditionsperature85℃,extractingtime6h,extractionreagent80%alcohol.Andthestabilityofthemethodeanaterial,s,leaves,.freelentofportantguidingsignificanceinboththeoryandpractice.Key）下的吸光度，以光波波長為橫軸，以吸光度(A)為縱軸，繪制四棱豆（葉）提取液的吸收曲線。結(jié)果見圖1。1.3.2提取方法的正交實驗方案在實際操作中，考慮到各種因素
3、之間的影響，因此主要對乙醇的濃度、浸提溫度和提取時間三因素四個水平進行正交實驗，以便測定不同條件下四棱豆總黃酮的含量。正交實驗方案見表1。1.3.3標準曲線的制備準確稱取蘆丁對照品26.80mg，用65%乙醇定容至100ml，即蘆丁對照液的濃度為0.2680mg/ml，作為儲備液。精確吸取上述儲備液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分別放置于5個25ml容量瓶中，分別加入5%NaNO2溶液1.0ml，放置6min后，加入5%Al(NO3)3溶液1.0ml，室溫放置6min后，再加入5%NaOH溶液10ml，用65%乙醇溶液
4、定容,搖勻，堿性條件下顯色15min后,用1cm比色皿,以試劑空白為參比,于最大吸收波長（500nm）處測定吸光度值，繪制標準曲線（如圖2）。所得的標準曲線回追方程為A=6.857C－0.002，R=0.9994，線性關系良好，并且由此可推導出公式：C=（A+0.002）/6.857。1.3.4四棱豆總黃酮的測定方法準確稱取四棱豆各器官（根、莖、葉、花、果實和種子）及整株樣品各2.0000g，用索氏提取器加最適提取劑（80%乙醇）100ml在85℃水浴溫度條件下回流提取6h，冷卻后，用80%乙醇定容至100ml，備用。準確移取各樣
5、品液2組，每份1ml，置于25ml容量瓶中，其中一組直接以65%乙醇定容至25ml作空白對照；另一組按上述方法進行顯色測定。圖1四棱豆總黃酮的吸收光譜（略）圖2蘆丁樣品標準曲線（略）1.3.5精密度實驗精密稱取干燥的四棱豆（葉）粉末6份，2.0000g/份，按1.3.4實驗方法測定其吸光度（A）。表1因素水平（略）1.3.6穩(wěn)定性實驗以四棱豆（葉）提取液為樣品液，測定顯色液穩(wěn)定性和提取液穩(wěn)定性。①顯色液穩(wěn)定性實驗：每間隔20min測1次吸光度，共測定6次；②提取液穩(wěn)定性實驗：每5d測定1次，共測定6次。1.3.7加樣回收率的測定準
6、確移取上述四棱豆（葉）提取液5份，1.0ml/份，分別置于5個25ml的容量瓶中，并且分別加入蘆丁標準儲備液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml，即分別加入蘆丁對照品0.2680，0.5360，0.8040，1.0720，1.3400mg。然后按上述顯色方法進行比色測定。2結(jié)果與分析2.1最大吸收波長由圖1可知，四棱豆黃酮提取液硝酸鋁顯色后穩(wěn)定的最大吸收峰值在500nm波長處。因此，蘆丁標準曲線及四棱豆各樣品黃酮的比色測定均在500nm波長處進行。2.2正交實驗結(jié)果與分析準確稱取四棱豆（果實）干燥粉末16份，每份2.0000
7、g，分4組，按表2配置方案制備黃酮提取液100ml，并分別取1.0ml黃酮提取液置于25ml容量瓶中，按1.3.3實驗的顯色方法測定其吸光度。根據(jù)表2中R1，R2，R3，R4和R值分析可知，影響總黃酮提取得率的所選因素的主次依次為提取時間→乙醇濃度→水浴溫度，提取四棱豆總黃酮的最佳提取工藝為A3B3C3，即水浴溫度為85℃，提取時間為6h，乙醇濃度為80%。2.3四棱豆不同部位的總黃酮含量比較分別測定四棱豆各器官及整株的吸光度（A值），3份/樣品，取吸光度的平均值（）計算各樣品總黃酮的百分含量（波長處，并且首次測得四棱豆根、莖、葉
8、、花、果實、種子和整株的總黃酮含量分別為0.73%，0.93%，2.30%，3.96%，2.88%，3.12%和2.44%，其中花的總黃酮含量最高為3.96%。這為四棱豆具有清熱解毒、消炎止痛等多種藥用功效，提供了理論依據(jù)。同時，四棱豆的適應性強，
