資源描述:
《四棱豆總黃酮含量的研究論文》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、四棱豆總黃酮含量的研究論文【關(guān)鍵詞】四棱豆;,,總黃酮;,,提取工藝;,,含量摘要:目的研究了四棱豆總黃酮的提取工藝和含量。方法采用正交實(shí)驗(yàn)分析和分光光度法。結(jié)果四棱豆總黃酮的最佳提取工藝是水浴溫度為85℃,提取時(shí)間為6h,提取劑乙醇濃度為80%,并且該提取方法穩(wěn)定性好,精密度和回收率高;以蘆丁為對(duì)照品,測(cè)得四棱豆根、莖、葉、花、果實(shí)、種子和整株的總黃酮含量分別為0.73%,0.93%,2.30%.freeletryandtheorthogonalexperiments.ResultsTheanalyticalresultshou
2、mextractingconditionsperature85℃,extractingtime6h,extractionreagent80%alcohol.Andthestabilityofthemethodeanaterial,s,leaves,.freelentofportantguidingsignificanceinboththeoryandpractice.Key)下的吸光度,以光波波長(zhǎng)為橫軸,以吸光度(A)為縱軸,繪制四棱豆(葉)提取液的吸收曲線。結(jié)果見圖1。1.3.2提取方法的正交實(shí)驗(yàn)方案在實(shí)際操作中,考慮到各種因素
3、之間的影響,因此主要對(duì)乙醇的濃度、浸提溫度和提取時(shí)間三因素四個(gè)水平進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn),以便測(cè)定不同條件下四棱豆總黃酮的含量。正交實(shí)驗(yàn)方案見表1。1.3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備準(zhǔn)確稱取蘆丁對(duì)照品26.80mg,用65%乙醇定容至100ml,即蘆丁對(duì)照液的濃度為0.2680mg/ml,作為儲(chǔ)備液。精確吸取上述儲(chǔ)備液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml分別放置于5個(gè)25ml容量瓶中,分別加入5%NaNO2溶液1.0ml,放置6min后,加入5%Al(NO3)3溶液1.0ml,室溫放置6min后,再加入5%NaOH溶液10ml,用65%乙醇溶液
4、定容,搖勻,堿性條件下顯色15min后,用1cm比色皿,以試劑空白為參比,于最大吸收波長(zhǎng)(500nm)處測(cè)定吸光度值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(如圖2)。所得的標(biāo)準(zhǔn)曲線回追方程為A=6.857C-0.002,R=0.9994,線性關(guān)系良好,并且由此可推導(dǎo)出公式:C=(A+0.002)/6.857。1.3.4四棱豆總黃酮的測(cè)定方法準(zhǔn)確稱取四棱豆各器官(根、莖、葉、花、果實(shí)和種子)及整株樣品各2.0000g,用索氏提取器加最適提取劑(80%乙醇)100ml在85℃水浴溫度條件下回流提取6h,冷卻后,用80%乙醇定容至100ml,備用。準(zhǔn)確移取各樣
5、品液2組,每份1ml,置于25ml容量瓶中,其中一組直接以65%乙醇定容至25ml作空白對(duì)照;另一組按上述方法進(jìn)行顯色測(cè)定。圖1四棱豆總黃酮的吸收光譜(略)圖2蘆丁樣品標(biāo)準(zhǔn)曲線(略)1.3.5精密度實(shí)驗(yàn)精密稱取干燥的四棱豆(葉)粉末6份,2.0000g/份,按1.3.4實(shí)驗(yàn)方法測(cè)定其吸光度(A)。表1因素水平(略)1.3.6穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)以四棱豆(葉)提取液為樣品液,測(cè)定顯色液穩(wěn)定性和提取液穩(wěn)定性。①顯色液穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn):每間隔20min測(cè)1次吸光度,共測(cè)定6次;②提取液穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn):每5d測(cè)定1次,共測(cè)定6次。1.3.7加樣回收率的測(cè)定準(zhǔn)
6、確移取上述四棱豆(葉)提取液5份,1.0ml/份,分別置于5個(gè)25ml的容量瓶中,并且分別加入蘆丁標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml,即分別加入蘆丁對(duì)照品0.2680,0.5360,0.8040,1.0720,1.3400mg。然后按上述顯色方法進(jìn)行比色測(cè)定。2結(jié)果與分析2.1最大吸收波長(zhǎng)由圖1可知,四棱豆黃酮提取液硝酸鋁顯色后穩(wěn)定的最大吸收峰值在500nm波長(zhǎng)處。因此,蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線及四棱豆各樣品黃酮的比色測(cè)定均在500nm波長(zhǎng)處進(jìn)行。2.2正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析準(zhǔn)確稱取四棱豆(果實(shí))干燥粉末16份,每份2.0000
7、g,分4組,按表2配置方案制備黃酮提取液100ml,并分別取1.0ml黃酮提取液置于25ml容量瓶中,按1.3.3實(shí)驗(yàn)的顯色方法測(cè)定其吸光度。根據(jù)表2中R1,R2,R3,R4和R值分析可知,影響總黃酮提取得率的所選因素的主次依次為提取時(shí)間→乙醇濃度→水浴溫度,提取四棱豆總黃酮的最佳提取工藝為A3B3C3,即水浴溫度為85℃,提取時(shí)間為6h,乙醇濃度為80%。2.3四棱豆不同部位的總黃酮含量比較分別測(cè)定四棱豆各器官及整株的吸光度(A值),3份/樣品,取吸光度的平均值()計(jì)算各樣品總黃酮的百分含量(波長(zhǎng)處,并且首次測(cè)得四棱豆根、莖、葉
8、、花、果實(shí)、種子和整株的總黃酮含量分別為0.73%,0.93%,2.30%,3.96%,2.88%,3.12%和2.44%,其中花的總黃酮含量最高為3.96%。這為四棱豆具有清熱解毒、消炎止痛等多種藥用功效,提供了理論依據(jù)。同時(shí),四棱豆的適應(yīng)性強(qiáng),