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1、ACE基因I/D多態(tài)性與超重對(duì)原發(fā)性高血壓的影響論文宋鑫姜秀波汪韶潔姜文潔逄增昌張東峰【摘要】目的探討血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)基因第16內(nèi)含子插入或缺失(I/D)多態(tài)性變異與超重及其交互作用對(duì)原發(fā)性高血壓的影響。方法隨機(jī)抽取青島市3個(gè)社區(qū)中未經(jīng)藥物系統(tǒng)治療的91名漢族原發(fā)性高血壓病人及109名正常血壓對(duì)照者進(jìn)行調(diào)查,用聚合酶鏈反應(yīng)限制性片段長度多態(tài)性(PCRRFLP)方法檢測I/D變異;應(yīng)用相加模型分析血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)基因I/D多態(tài)性變異與超重交互作用。結(jié)果利用多因素非條件Logistic回歸分析調(diào)整年齡、性別、三酰甘油及腰臀比等因素后,
2、ACE基因D等位基因與超重的協(xié)同作用指數(shù)為1.38,歸因交互效應(yīng)為2.94,歸因交互效應(yīng)百分比為25.39%,純因子間歸因交互效應(yīng)百分比為27.79%。結(jié)論ACE基因D等位基因與超重對(duì)原發(fā)性高血壓存在正交互作用。控制體質(zhì)量可明顯降低居民原發(fā)性高血壓患病的危險(xiǎn)性?!娟P(guān)鍵詞】血管緊張素轉(zhuǎn)化酶基因超重高血壓交互作用[ABSTRACT]ObjectiveToanalyzetheeffectofangiotensinconvertingenzyme(ACE)geneI/Dmutation,overedicationand109normotensioncontrol
3、slyrecruitedfromthreemunitiesinQingdaocity.ACEgeneI/Dmutationerasechainreaction(PCR)andrestrictionfragmentlengthpolymorphism(RFLP).Anadditivemodelutationandoverultiplefactorlogisticregression,attributableinteractione;Gene;OverL,EDTANa抗凝,采用天根生化科技(北京)有限公司的試劑盒提取DNA。1.3ACE基因I/D變異檢測
4、參考RIGAT等1設(shè)計(jì)的PCR反應(yīng)引物:正向5′CTGGAGACCACTCCCATCCTTTCT3′,反向5′GATGTGGCCATCACATTCGTCAGAT3′,由上海閃晶分子生物科技有限公司合成。PCR反應(yīng)體系25μL:1.25UTaqDNA聚合酶,250μmol/LdNTP,25mmol/LTrisHCl(pH8.7),10mmol/LKCl,2mmol/LMgCl2,100ng基因組DNA,以及10μmol/L上下游引物各1μL,用ddH2O補(bǔ)齊體系體積。反應(yīng)條件:94℃變性3min;30個(gè)循環(huán)中94℃變性30s,55℃退火30s,7
5、2℃延伸60s;最后72℃延伸5min。擴(kuò)增產(chǎn)物于20g/L瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳后,于紫外線凝膠成像系統(tǒng)觀察。1.4生化檢測采集研究對(duì)象的空腹靜脈血3mL,全自動(dòng)生化分析儀上測定血清葡萄糖(GLU)及血脂指標(biāo)。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法用SPSS15.0軟件對(duì)資料進(jìn)行分析,OR計(jì)算及混雜因素的調(diào)整用多因素Logistic回歸進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;交互作用分析選用相加模型。2結(jié)果2.1ACE基因I/D變異與原發(fā)性高血壓的關(guān)系病例組DD、ID和II基因型頻率分別為22%,47%及31%,對(duì)照組為13%、38%及49%,兩組比較差異有顯著意義(χ2=7.79,P0.05);病
6、例組等位基因D及I的頻率分別為45.60%、54.40%,對(duì)照組為31.65%、68.35%,兩組比較差異有顯著性(χ2=4.10,P0.05)。見表1。2.2超重與原發(fā)性高血壓的關(guān)系病例組超重者占81.32%,對(duì)照組為49.54%,兩組比較差別有顯著性(χ2=21.74,P0.01)。2.3ACE基因D等位基因與超重的交互作用定性分析單因素分析結(jié)果提示,ACE基因D等位基因獨(dú)立存在是原發(fā)性高血壓的危險(xiǎn)因素(OR=4.18,P0.05,95%CI為1.08~16.21);超重獨(dú)立存在時(shí)也與原發(fā)性高血壓發(fā)生有關(guān)(OR=7.74,P0.05,95%CI為2.
7、09~28.71);ACE基因D等位基因與超重同時(shí)存在時(shí)患高血壓危險(xiǎn)性增加(OR=16.33,P0.05,95%CI為4.51~59.11);因兩種因素同時(shí)存在時(shí)的OR值大于分別作用時(shí)的OR值之和,所以二者存在正交互作用。以是否患原發(fā)性高血壓為因變量(對(duì)照=0,病例=1),是否為ACE基因D等位基因、是否超重等因素分別為自變量進(jìn)行非條件Logistic回歸分析,調(diào)整年齡、性別、三酰甘油、腰臀比、吸煙和飲酒等因素以后,ACE基因D等位基因單獨(dú)存在時(shí)的危險(xiǎn)度為4.69(95%CI為1.06~20.75);超重單獨(dú)存在的危險(xiǎn)度則為4.95(95%CI為1.19
8、~20.62);兩者聯(lián)合作用的危險(xiǎn)度為11.58(95%CI為2.88~46.5