參歸軟肝膠囊對(duì)脾虛小鼠免疫功能的影響論文

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1、參歸軟肝膠囊對(duì)脾虛小鼠免疫功能的影響論文李艷路西明王淑英王建剛【摘要】目的觀察參歸軟肝膠囊(SGR)對(duì)脾虛小鼠免疫功能的影響。方法通過腹腔巨噬細(xì)胞吞噬實(shí)驗(yàn)及淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)[使用脾虛型小鼠以刀豆素(ConA)或脂多糖(LPS)作誘導(dǎo)劑,通過體內(nèi)給藥,體外實(shí)驗(yàn)的方法]測定SGR對(duì)脾虛小鼠非特異性的吞噬細(xì)胞功能及特異性的細(xì)胞免疫、體液免疫功能的影響。結(jié)果給脾虛小鼠灌服受試藥,能明顯提高其腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬能力和T、B淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)(P<0.05)。結(jié)論參歸軟肝膠囊能提高脾虛小鼠巨噬細(xì)胞吞噬能力、細(xì)胞免疫及體液免疫的功能?!娟P(guān)鍵詞】參歸軟肝膠囊;脾虛小鼠;免疫功能AbstractOb

2、jectiveTostudytheeffectsofSGRcapsuleonimmunityfunctionofspleen-deficientmice.MethodsThespleen-deficientmicemodelinalphagocyteandthetransformtestoflymphocytesultiplicationrateofT,Blymphocytesinvitro.ResultsAfterfededicine,theengulfingofabdominalphagocyticcellsandthemultiplicationrateofT,Blymph

3、ocytesarkedly(P<0.05).ConclusionSGRcapsulecanimprovethefunctionsofnonspecificimmunity,cellularimmunityandhumoralimmunityofthespleen-deficientmice.Keymunefunction參歸軟肝膠囊主要由丹參、當(dāng)歸、黃芪、川芎、白芍、郁金組成,有益氣、活血養(yǎng)血、疏肝解郁功能。本實(shí)驗(yàn)通過腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能及淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn),觀察參歸軟肝膠囊對(duì)脾虛小鼠非特異性的吞噬細(xì)胞功能及特異性的細(xì)胞免疫、體液免疫功能的影響,為該藥的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1材料

4、1.1動(dòng)物昆明小鼠,河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供.freela公司產(chǎn)品;LPS為美國Sigma公司產(chǎn)品;MTT瑞士試劑公司產(chǎn)品;RPMI1640培養(yǎng)基,日本產(chǎn)品;小牛血清,天津生化制品廠生產(chǎn),批號(hào)060312。1.3檢測儀器OD-3022酶標(biāo)儀,國營華樂電子管廠制;CO2培養(yǎng)箱,日本產(chǎn);721分光光度計(jì),上海第三分析儀器廠生產(chǎn)。2方法2.1分組小鼠60只,體重20~22g,雌雄各半,隨機(jī)分為6組,每組10只,0.2ml/10g·d-1×14,ig。正常對(duì)照組0.5%CMC-Na;用大黃煎劑造模為脾虛小鼠,造模小鼠分為模型組,復(fù)方鱉甲軟肝片組,SGR低、中、高劑量組。模型組0.5%CMC

5、-Na;復(fù)方鱉甲軟肝片對(duì)照組2.7g·kg-1;SGR低、中、高3劑量組分別為(生藥·kg-1)2.5,5.0,7.5g。2.2方法除正常對(duì)照組外,其余各組動(dòng)物均按上述劑量每日灌服大黃煎劑(40g生藥·kg-1),連續(xù)10d,給藥組動(dòng)物于第7天起按擬定劑量灌服相應(yīng)受試藥,連續(xù)14d。2.2.1SGR對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響[1,2]將小鼠處死,仰臥固定于工作臺(tái)上,腹部碘伏局部消毒后,注入2ml的1640培養(yǎng)液沖涮腹腔后,吸出腹腔液,滴0.1ml液體于干凈玻片上,滴加致敏酵母液(按腹腔細(xì)胞∶酵母顆粒=1∶10比例),4℃,濕盒內(nèi)過夜,用1640培養(yǎng)液輕輕沖洗,0.25%戊二醛固

6、定,40倍光學(xué)顯微鏡下,隨機(jī)計(jì)數(shù)200個(gè)腹腔巨噬細(xì)胞(貼壁細(xì)胞)中吞噬或吸附3個(gè)酵母以上的巨噬細(xì)胞數(shù)量。2.2.2SGR對(duì)ConA,LPS誘導(dǎo)脾虛小鼠T、B淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)的影響[1,2]在超凈工作臺(tái)中取小鼠脾臟,制成脾細(xì)胞懸液(2×106·ml-1),在96孔板上每孔加100μl細(xì)胞懸液,分別加入ConA(10mg·ml-1)和LPS(20mg·ml-1)100μl。每個(gè)樣品設(shè)3個(gè)重復(fù)孔。置37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)66h。棄上清,每孔加入20μl的MTT,37℃孵育4h,再加入DMSO振蕩。采用酶標(biāo)儀測OD值,λ=570nm。細(xì)胞增殖反應(yīng)率(%)=(實(shí)驗(yàn)孔平均OD值/對(duì)照

7、孔平均OD值)×100%3結(jié)果3.1對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響結(jié)果見表1。模型組結(jié)合致敏酵母3個(gè)以上的百分?jǐn)?shù)低于正常對(duì)照組(P0.05),受試藥3個(gè)劑量組均高于模型組(P0.05)。3.2對(duì)ConA,LPS誘導(dǎo)T,B淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)的影響結(jié)果見表2。3.2.1ConA模型組低于正常對(duì)照組(P0.05),受試藥各組高于模型組(P0.05和P0.01)。3.2.2LPS模型組低于正常對(duì)照組(P0.05),各受試藥組均高于模型組(P0.05)。表1SGR膠囊對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影

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